Doctorado en Ciencia y Tecnología Analítica

Facultad de Farmacia
Universidad de Concepción
Certamen I

Quimiometría 2022

Mienka Albornoz Pierattini.

1) Evalúe y concluya si la espectroscopía Raman permite detectar las diferencias existentes entre los diversos tipos de
tabletas, los que corresponden a métodos distintos de preparación de las mismas.

Para lograr detectar diferencias entre los diversos tipos de tabletas se aplicó un modelo PCA aplicando SNV además de filtro
savitzky-golay con una ventana de 25, segunda derivada y orden 2, además se aplicó centrado a la media. En la figura 1 se puede
ver el espectro de la data cruda y la data pretratada.

A) B)

Figura 1: A) Data cruda sin tratar, B) Data pretratada

Para el modelo PCA se utilizó 3 componentes principales y se obtuvo la gráfica de scores y loadings que se muestra en la Figura 2.
En base a los resultados obtenidos se puede concluir que la espectroscopia Raman sólo permite detectar diferencias claras en las
tabletas de tipo A que son las de color rojo las cuales se encuentran claramente agrupadas.

Figura 2: Gráfico Scores para PC1 y PC2, separar diferentes tipos de tabletas A=1, B=2,C=3,D=4.

2) En caso de que estas diferencias sean visualizadas en las muestras, informe qué señalesRaman son responsables de
las separaciones observadas.

Para poder ver que señales Raman son las responsables de esta separación es necesario evaluar el gráfico de Scores y Loadings, el
cual se puede ver a continuación.
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Se puede observar que las bandas a 2238 cm-1 2237 cm-1 influyen más para la separación de las tabletas de color rojo.

3) Es de particular interés del laboratorio farmacéutico evaluar las características espectrales de las muestras de tipo
A y C. ¿Puede usted reportar desde un análisis multivariado, qué bandas son características para cada uno de estos grupos?.

Para las tabletas del grupo A las bandas características son la de 2237 cm-1, para las tabletas del grupo C las bandas características
son las que se encuentran entre los 634 cm -1 y los 625 cm -1.

4) Comente el efecto de diversas técnicas de pretratamiento de datos, que mejoró o hizo posible la diferenciación de
muestras por su tipo.

Las técnicas que se aplicaron se muestran a continuación en las siguientes figura 4, 5 y 6, se puede apreciar que la mejor separación
se logra aplicando SNV, segunda derivada y suavizado (Figura 5). Debido a que el espectro Raman es muy ruidoso se optó por
suavizar y visualizando la data original se decidió aplicar segunda derivada para corregir la línea base. Al aplicar MSC el RMSEC y
RMSECV es muy alto además de que la varianza explicada en el primer componente principal es del 97,87% lo que podría significar
que se está perdiendo información valiosa de los otros PC, lo que puede llevar a conclusiones erróneas.

Figura 4: MSC-Savgol-Centrado a la media (25,2,2)

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Figura 5: SNV-Savgol –Centrado a la media(25,2,2)

Figura 6: Sin pretratamiento-Centrado a la media

2) Utilizando el mismo archivo 'ws-Ramadata_tablets.mat':

a) Determine la concentración de sustancia activa (% w/w)en las tabletas número 27, 28,48 y 50.
Para determinar la concentración de sustancia activa en las tabletas número 27, 28 , 48 y 50 se excluyó de la data las muestras
antes nombradas y a continuación se analizó la data con el método PLS debido al número elevado de longitudes de onda, se
evaluaron distintos pretratamientos para la data obteniéndose los siguientes resultados con el pretratamiento PLS-Centrado a la
media-MSC.

PLS – CENTRADO A LA MEDIA- MSC

Muestra Concentración nominal Concentración predicha
1 5,2816 5,9369
2 5,6545 6,2400
3 7,9131 7,6531
4 8,0956 7,7158
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b) ¿Es posible reportar una predicción confiable de la concentración de la sustancia activa sin importar el tipo de tableta que se esté
cuantificando? Discuta y comente su respuesta con la mayor evidencia analítica y estadística posible.

Para predecir las concentraciones de las muestras solicitadas se usaron distintos pretratamientos (MSC y SNV ambos centrados a
la media), obteniéndose los resultados que se presentan a continuación:

PLS-SNV

PLS-MSC

Como se puede observar si bien el RMSEP para ambos pretratamientos es similar se escogió como modelo predictivo el
PLS-SNV, sin embargo ambos modelos son poco precisos en cuanto a la predicción.
Los datos utilizados para el modelos son poco homogéneos lo que no permite obtener un buen modelamiento de
predicción por lo que al ser poco homogéneos se imposible reportar una predicción confiable sin importar el tipos de
tableta, para que esto ocurriera sería necesario agregar un universo mayor de muestras mucho más heterogéneo del que
se presenta en la data.

3) En la carpeta de datos ‘pregunta 3-2023’, encontrará señales espectrales de 9 muestras de calibración (Resp_cal.txt) y
concentraciones de los dos analitos presentes en éstas (Conc_cal.txt).

a) Reporte el perfil espectral de cada analito (compuesto químico) presente en elconjunto de datos de calibración.

A continuación se presenta la gráfica de la matriz de sensibilidades la cual representa los espectros puros de los analitos que se
encuentran presente en la muestra y que son espectroscópicamente activos, en azul se representa el compuesto 1 y en naranjo se
representa el compuesto 2.
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Figura 6: E

b) Determine las concentraciones de los analitos presentes en el set de 3 muestras desconocidas cuyas respuestas espectrales se
encuentran el archivo ‘Resp_tst.txt’

Para determinar las concentraciones desconocidas de los analitos primero se procedió a calibrar y validar el modelo CLS lo cual
se realizó de la siguiente manera:
La data Resp_cal.txt y Conc_cal.txt se dividió en dos set de datos, 6 muestras se utilizaron para calibrar y 3 muestras se utilizaron
para validar obteniéndose los resultados de concentración para los analitos de las 3 muestras para validar que se muestran a
continuación.
Tabla 3: Resultados de concentraciones nominales y predichas para muestras de validación.

Muestras Concentración nominal

Concen Concentración predicha Residuo
Analito 1 Analito 2 Analito 1 Analito 2 Espectral
Muestra 1 0 0 -0.00082191 -0.0016594 0.00050136
Muestra 2 2.5 2.5 2.4863 2.5336 0.001098
Muestra 3 5.0 5.0 4.9568 4.7479 0.0039061

Luego se determinaron las concentraciones de las 3 muestras de concentraciones desconocidas cuyos resultados se presentan a
continuación:
Tabla 4: Resultados de concentración predicha para muestras desconocidas.

Muestras Concentración Residuo

predicha espectral
Analito
Analito
1 Analito 2
Muestra 1 2.0021 1.9784 0.0084591
Muestra 2 1.0162 1.0459 0.011864
Muestra 3 4.0335 3.8431 0.0066037

c) Concluya si todas las muestras desconocidas en ‘Resp_tst.txt’ tienen solo doscomponentes. Justifique su respuesta.

Se puede concluir que todas las muestras test que se encuentran en el archivo ‘Resp_tst.txt’ tienen tan solo dos analitos que son
espectroscópicamente activos, esto se puede corroborar observando sus residuos espectrales ya que éstos poseen valores muy
bajos como se observa en la tabla 4, a diferencia de ejercicios realizado en clases donde una muestra no pudo ser predicha debido a
que su residuo espectral eran 100 veces mayor que los residuos espectrales de las otras muestras.