COLORACION HISTOLOGICA
Se necesita de colorantes para poder observar con claridad los diferentes componentes de
los tejidos, la tinción histológica permite diferenciar componentes celulares y de la matriz
Materiales y productos
Lamina portaobjeto con la
muestra del tejido
Lamina cubreobjeto
Hematoxilina
Eosina
Alcohol 70%, 96% y 100%
Xilol
Agua de caño
SIXTO JAVIER RETO ZAPATA
extracelular.
Coloración con hematoxilina
El primer paso que debe realizarse es la desparafinización la cual consiste en
eliminar la parafina con xilol ya que la hematoxilina no es soluble con la
parafina. Introducimos la muestra en xilol, y esta se hace translucida o
transparente, lo que se llama diafanización, después de 5 minutos se pasa a
un xilol mas limpio donde se deja la muestra 5 minutos más.
El segundo paso es la hidratación, se pasa a alcohol de 100% que se encarga
de sacar el xilol, debido a que es soluble en él. Posteriormente se pasa el
xilol a un alcohol 100% (2) que elimina totalmente el xilol, esto por 5
minutos. Ahora hidratamos con alcohol 96%, luego se pasa con alcohol 96%
(2) y finalmente se pasa a alcohol 70% por 5 minutos. Ya hidratada la
muestra se comienza la tinción con hematoxilina, que se encarga de teñir los
lugares donde hay carga negativa como el ADN del núcleo.
La hematoxilina actúa como colorante básico que tiñe componentes ácidos
de la célula. Luego de 10 minutos se le agrega a la muestra agua de grifo para
que cambie el color de la hematoxilina. Luego de la tinción con hematoxilina
comienza la tinción con eosina.
Coloración con eosina
Colocamos los cortes en eosina, sacamos el agua
para obtener un preparado definitivo. De la eosina se
pasa a alcohol 96% y luego a un alcohol de 96% (2)
y por último en alcohol 100% quien termina de
eliminar el agua.
Posteriormente se pasa la muestra a xilol que
transparenta el tejido y elimina el alcohol 100%. Por
ultimo se coloca la lámina cubreobjetos con bálsamo
sintético. Se agrega una gota de bálsamo sobre la
muestra y sobre ella se coloca el cubreobjetos. Con
esto se acabaría el proceso de coloración.