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UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO


FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL Y DE RECURSOS NATURALES

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FACULTAD DE INGENIERÍA AMBIENTAL Y DE RECURSOS
NATURALES

GUÍA DE PRACTICAS DE LABORATORIO

CARLOS ODORICO TOME RAMOS


Biólogo con mención en Microbiología y parasitología
Mg. Gestión Ambiental

Callao-2023-Perú
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PRÁCTICA N°2 Y 3

MUESTREO, OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA Y


RECONOCIMIENTO DE FITOPLACTON Y ZOOPLANCTON

2. Introducción
Según (Samanez et al., 2014); para realizar un muestreo de agua con fines de observar
el fitoplancton y zooplancton, se debe emplear la red de plancton , el cual debe ser
arrastrado en forma horizontal; es una metodología que permite realizar un análisis
cualitativo y semicuantitativo; también señala que, de preferencia se debe utilizar
botellas de color ámbar de 150 ml de capacidad y, se debe llenar hasta un 90 % con la
muestra, asimismo, si se requiere observar en vivo la muestra dura unas 12 horas, pero,
si se quiere preservar recomienda el uso de formol al 4-5% o Lugol al 1% (0,5
ml/100ml de muestra) como preservante.
3. Competencia
Realiza el muestreo de un ecosistema acuático para un análisis microscópico y reconoce
el fitoplancton y zooplancton
4. Fundamento teórico
Los microrganismos fotosintéticos son los responsables de la fijación de C en los
ecosistemas acuáticos y, en el libro de Microbiología de Prescott señalan:
“La fuente principal de materia orgánica en las aguas de superficie iluminada es
la actividad fotosintética, principalmente a través del fitoplancton, unos
organismos autótrofos que flotan en la zona fótica. Algunos géneros de
cianobacterias planctónicas comunes son Prochlorococcus y Synechococcus, que
pueden alcanzar densidades de 104 a 105 células por mililitro en la superficie del
océano. Este picoplancton (microorganismos planctónicos entre 0,2 y 2 µm de
tamaño) pueden representar del 20 al 80% del total de la biomasa del
fitoplancton. Los eucariotas autótrofos, especialmente las diatomeas, también
pueden contribuir en una fracción significativa del carbono fijado en estos
ecosistemas”. (Willey, Sherwood, Woolverton 2009, pág. 670)
En relación a la toma de muestra de agua, en el libro de Ecología microbiana y
microbiología ambiental señalan:
“Las muestras de agua que se toman para el recuento de algas, de protozoos, o
de ambos tipos de microorganismos, a menudo se recolectan con botellas

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hidrográficas, especialmente la de Nansen y la de Van Dorn, pero estos


dispositivos no son apropiados para el muestreo bacteriológico, ya que no se
pueden esterilizar. Las algas y protozoos planctónicos se recogen
frecuentemente con redes arrastradas por una barca, pero muchos micro
flagelados no sobreviven a este método de recogida, los organismos planctónicos
deben ser dirigidos hacia botellas de recogida, donde serán concentrados”.
(Atlas, Bartha 2008, pág. 220)
5. Equipos, materiales y/o reactivos
● Red de Plancton
● Microscopio
● Frasco de vidrio ámbar con tapa hermética
● Laminas por objetos y cubre objetos
● Papel lente
● Etanol
● Agua destilada
 Lugol
6. Procedimiento
● Muestreo por arrastre en un ecosistema acuático según la indicación del docente.
● Preservación de la muestra
● Observar al microscopio y con el apoyo de un manual identificar los
microorganismos.
7. Resultados e interpretación
Observar al microscopio y reconocer las interacciones microbianas en la biopelícula
formada del agua residual.
Dibujo Interpretación

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8. Cuestionario del laboratorio


¿Cuál es la diferencia entre fitoplancton y zooplancton?
¿Cuál es la diferencia entre las cianobacterias y las diatomeas?
Explique brevemente la resistencia a las condiciones adversas de las cianobacterias

9. Bibliografía

Atlas, R., & Bartha, R. (2008). Ecología Microbiana y Microbiología Ambiental (S. A.
PEARSON EDUCACIÓN (ed.); Cuarta edi).
Samanez, I., Rimarachín, V., Palma, C., Arana, J., Ortega, H., Correa, V., & Hidalgo,
M. (2014). Métodos de colecta, identificación y análisis de comunidades
biológicas: plancton, perifiton, bentos (macroinvertebrados) y necton (peces) en
aguas continentales del Perú. In Universidad Nacional Mayor de San Marcos.

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http://www.minam.gob.pe/diversidadbiologica/wp-content/uploads/sites/
21/2014/02/Métodos-de-Colecta-identificación-y-análisis-de-comunidades-
biológicas.compressed.pdf
Willey, J., Sherwood, L., & Woolverton, C. (2009). Microbiología de Prescott, Harley
y Klein (McGrawHill (ed.); Séptima ed).

PRÁCTICA N°4 Y 5

COLUMNA DE WINOGRADSKY

2. Introducción

La columna de Winogradsky es una forma de realizar cultivos mixtos, donde se pone en

evidencia las interacciones de diversas poblaciones microbianas a nivel de sus

características metabólicas; (Jiménez Salazar, Parra Serna, & Buriticá Herrera, 2010) al

realizar la identificación de microorganismos a partir de la elaboración de la columna de

Winogradsky, señalaron que los microorganismos ocupan lugares altamente específicos

según sus necesidades de fuente de carbono, fuente de energía y, sus requerimientos y

tolerancias a los factores fisicoquímicas, es un sistema completo y autónomo que se

mantiene sólo con la energía solar y; según la descripción de la columna de

Winogradsky por (Pibernat, Garcia-Gil, & Abella, 1991), señalaron que facilita el

estudio de las migraciones de microrganismos planctónicos, que en condiciones

naturales se encuentran asociados a gradientes de temperatura, luz y conductividad, tal

como se comporta en la naturaleza. Aprovechando las actividades metabólicas e

interacciones de diversas poblaciones microbianas en la columna de Winogradsky, se va

a elaborar y explicar los ciclos biogeoquímicos del C y S.


1. Competencia
Prepara la columna de Winogradsky y explica los ciclos biogeoquímicos del C y S.
2. Fundamento teórico

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Se llama columna de Winogradsky en honor a su creador, el microbiólogo Sergei


Winogradsky y, según (Atlas & Bartha, 2008) lo definen y describen de la siguiente
manera:
“Una columna de Winogradsky consiste en lodo o sedimento colocado dentro de
un cilindro de cristal o de plástico transparente. La altura de la columna permite
el desarrollo de una zona aeróbica en la superficie del lodo y de una zona
microaerófilo y de otra anóxica por debajo. La columna se expone a la luz de
manera que diversas poblaciones fotosintéticas se desarrollan a diferentes
profundidades en la columna. El lodo o sedimento contiene (o se le añaden)
sustratos de carbono orgánico, sulfuros y sulfatos. Esto permite el desarrollo de
numerosas poblaciones heterótrofas y fotoautótrofas, entre las cuales se
encuentran bacterias anaerobias y fotosintéticas del azufre. Aunque son posibles
muchas variaciones, un buen método de preparación de la columna consiste en
poner lodo, sustrato carbonatado (puede ser papel de filtro en tiras), CaSO 4 y
CaCO3, en el fondo de la columna, y cubierto todo con arena de color claro y
agua. Esto hace que se desarrolle un gradiente de potencial redox, y que los
microrganismos pigmentados desataquen sobre la arena de color claro.” (Pág.
429)
3. Equipos, materiales y/o reactivos
 Cilindro de cristal o de plástico con tapa hermética
 Lodo o suelo de cultivo
 Agua de riego
 Arena de color claro (lavada)
 Tiras de papel blanco (papel higiénico)
 Clara de huevo
 CaSO4
 CaCO3
4. Procedimiento
 Mezclar: lodo, tiras de papel, clara de huevo batido, CaSO4 y CaCO3 (1% del
volumen total de la mezcla).
 Colocar la mezcla hasta la tercera parte del cilindro de cristal o plástico.
 Compactarlo para que quede sin aire
 Colocar una capa de 1 cm aproximadamente de arena clara

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 Agregar el agua hasta completar la capacidad del cilindro y, taparlo con su tapa
de cierre hermético
 Dejarlo a la luz solar por 4 a 6 semanas, haciendo observaciones periódicas.
TRABAJO REMOTO: Un grupo de estudiantes realizará la parte experimental;
adecuando una botella de plástico de tres litros y colocando los materiales señalados, lo
expondrán a la luz solar y anotarán periódicamente los cambios de colores en la
columna. A través de un vídeo mostraran el procedimiento y resultados y; en una
exposición no presencial se discutirá los resultados.
5. Resultados e interpretación
Dibuje la columna e identifique la diversidad de las poblaciones microbianas señalando
sus características metabólicas en función de la fuente de carbono y la fuente de energía.

6. Cuestionario del laboratorio


¿Qué función cumplen: las tiras de papel, la clara del huevo, el CaSO4 y el CaCO3
¿Por qué razón la columna se mantiene en la luz del día durante el transcurso del
experimento?
7. Bibliografía
Atlas, R., & Bartha, R. (2008). Ecología Microbiana y Microbiología Ambiental.
Pearson.
Jiménez Salazar, M., Parra Serna, L. V., & Buriticá Herrera, H. M. (2010). Repositorio
UniLibre. Recuperado el 18 de Junio de 2020, de
https://repository.unilibre.edu.co/handle/10901/17615
Pibernat, I., Garcia-Gil, L., & Abella, C. (1991). Descripcio d'un model experimental de
columna de Winogradsky. SCIENTIA gerundensis, 59-68. Recuperado el 18 de

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Junio de 2020, de file:///C:/Users/USER/Downloads/45461-Text%20de


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