Universidad Autonoma de Sinaloa

Fac. Medicina
Lic. Medico General
LAB. mICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA

EQUIPO 2

● Camarena Valenzuela Ricardo

● Castillo Beltran Omar
● Castro Bonilla Maria de Lourdes
● Castro Garcia Diana Enedel
● Castro Ruelas Maryan
● Duarte Beltran Francisco Antonio Otthoniel
 Tincion de
Diana Castro

Tipo de tinción diferencial empleado para la visualización de

bacterias, sobre todo en muestras clínicas. En lugares donde
se sospecha una infección, como la garganta, los pulmones,
los genitales o las lesiones en la piel.

Debe su nombre al bacteriólogo danés Christian Gram, que

desarrolló la técnica en 1884.
 Tincion de gram Diana Castro

Se utiliza tanto para poder referirse a la

morfología celular bacteriana y de esta
forma realizar una primera aproximación a
la diferenciación bacteriana.
Según la distribución del peptidoglicano
de la pared celular que las envuelve, se
tiñen de una forma u otra. considerándose
Bacteria Gram positiva a las bacterias que
se visualizan de color violeta y Bacteria
Gram negativa a las que se visualizan de
color rosa.
Tincion de GRAM-
Diana Castro

● Recoger la muestra de bacterias a estudio

mediante un hisopo.
● Extender dicha muestra sobre un portaobjetos
y dejarla secar.
● Fijar la muestra mediante un alcohol (metanol).
● Aplicar el tinte de violeta sobre el portaobjetos
y esperar un minuto.
● Enjuagar la muestra con agua y aplicar Yodo
(fijador)
● Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol. (decolora bac. Gram-)
● Añadir una tinción de safranina o fucsina (contratinción) para distinguir las gram
negativas que aparecerán bajo el microscopio.
 Antibiograma Omar Castillo

Prueba microbiológica para determinar la

susceptibilidad, resistencia o sensibilidad de
una bacteria a un grupo de antibióticos.
Esta prueba ayuda a identificar qué agente
antimicrobiano será capaz de inhibir el
crecimiento de bacterias u hongos causantes
de enfermedades.
 ¿Como se realiza un Antibiograma? Omar Castillo

El procedimiento más común es el antibiograma

es el disco-placa
Que consiste en dos pasos:
1-Depositar discos de papel secante impregnados
con diferentes antibióticos en la superficie de agar
de una placa de Petri previamente inoculada con el
microorganismo.
2-Después de la incubación, se observa si hay
crecimiento bacteriano alrededor del disco y se
mide el diámetro de la zona libre de crecimiento.
Este diámetro se compara con los valores estándar
para determinar la susceptibilidad o resistencia
del microorganismo a cada antibiótico.
 Resultados del Antibiograma Omar Castillo

Normalmente, los resultados del antibiograma se

obtienen entre 24 y 48 horas después de haber
sembrado la muestra.
Sin embargo, el resultado puede demorar entre 3 a
5 días dependiendo del microorganismo y sus
mecanismos de resistencia.
En el caso de los cultivos para hongos y para la
micobacteria causante de la tuberculosis se
requiere mucho más tiempo, entre 6 y 8 semanas.
Es importante tener en cuenta que la lectura
interpretada del antibiograma es un proceso
necesario en el estudio de la sensibilidad a los
antimicrobianos.
 SEnsibilidad y resistencia
Evaluar en el laboratorio la respuesta de
un microorganismo a uno o a varios
antimicrobianos.
Aproximación de resultado como
factor predictivo de la eficacia
clínica
Condiciones de los antibiogramas con el objetivo de asegurar su
reproducibilidad.
CMI: Concentración Mínima Inhibitoria
Ricardo Camarena
Características destacables de un AB:
- Análisis de las poblaciones
microbianas en función de los valores
de la CMI de los antimicrobianos.
- Relación con los mecanismos de
resistencia.
- Pk del antimicrobiano.
- Correlación entre el valor de la CMI y el
posible éxito o fracaso terapéutico.
 SEnsibilidad y resistencia Ricardo Camarena

● Sensible: cuando un aislado bacteriano es inhibido in vitro por una concentración de

un antimicrobiano que se asocia a una alta probabilidad con el éxito terapéutico.

● Intermedio: cuando un aislado bacteriano es inhibido in vitro por una concentración

de un antimicrobiano que se asocia a un efecto terapéutico incierto.

● Resistente: cuando un aislado bacteriano es inhibido in vitro por una concentración de

un antimicrobiano que se asocia a una alta probabilidad con el fracaso terapéutico.
Sensibilidad y resistencia Ricardo Camarena

c
 Microorganismo
Ricardo Camarena

Deducción del Identificación

fenotipo de +
resistencia Antibiograma

Mecanismo de Interpretación del Antibiograma

resistencia implicado (S, I, R)

Informe de
resultados
 Neisseria Maryan Castro

● Diplococo Gram-Negativa Aparece rojo o rosa después de la coloración

● Aaerobios estrictos
● Catalasa (+)
● Crece en Agar Thayer Martin
● Formadores de esporas

La tinción de Gram directo del fluido purulento permite

visualizar diplococos intracelulares dispuestos en
"granos de café

Se refiere a la susceptibilidad de las cepas de

Neisseria a los diferentes antibióticos.
 Neisseria Maryan Castro

Neisseria gonorrhoeae:

El color predominante de Neisseria gonorrhoeae Resistencia:

es el anaranjado ligeramente fluorescente y el ● Penicilina
ADN y ARN participan en el carácter tintorial[ ● Tetraciclinas
● Ceftriaxona
Además, se describe que N. gonorrhoeae tiene un
● ciprofloxacina
tamaño promedio de 0,8 µm de diámetro[4

Las fluoroquinolonas, la ceftriaxona y otras cefalosporinas son

efectivas contra Neisseria
E. neumoniae Maria Bonilla
 HAEMOPHILUS Francisco Duarte

- Gram negativa
- No esporulada
- Anaerobia facultativa
- Temperatura optima de crecimiento 37°
- Cocobacilos
- Forman pili
- 2 grupos

SI NO TIENE CAPSULA:
RESISTENCIA A ANTIBIÓTICOS
Baja incidencia de enfermedad - Ampicilina
SI TIENE CAPSULA: - Ceftriaxona
- Azitromicina
Clasificación por serotipos (A, B, C, D, E, F) - Claritromicina
- Cloramfenicol
- Trimetoprim
 HAEMOPHILUS Francisco Duarte

Cuando se quiere aislar e identificar la bacteria se realiza el siguiente proceso:

1. Crecimiento en agar chocolate durante 5 días en microaerofilia (CO2 al 5%)

2. Identificación de cocobacilos gram negativos pleomorficos
3. Siembra en agar sangre y chocolate de 24 a 48 horas en microaerofilia (CO2 al 5%) y a
37°C con una estría de Staphylococcus spp
4. Se observa el crecimiento de haemophilus spp formando colonias pequeñas, convexas y
translucidas de 0,5 a 1 mm de diametro a las 24h.
HAEMOPHILUS Francisco Duarte
 REFERENCIAS
● Gil-Setas, A., Mazón, A., Torroba, L., Barricarte, A., Garcia-Irure, J. J., Petit, A., & Polo, M. E. (2004,
April). Sensibilidad antibiótica y recomendaciones de tratamiento para Streptococcus
pneumoniae. In Anales del Sistema Sanitario de Navarra (Vol. 27, No. 1, pp. 37-43). Gobierno
de Navarra. Departamento de Salud.
● Knapp JS, Brathwaite AR, Hinds A, Duncan W, Rice RJ. Plasmid-mediated antimicrobial
resistance in Neisseria gonorrhoeae in Kingston, Jamaica: 1990-1991. Sex Transm Dis
1995;(22):155-9.
● Cantón, R. (2010, 1 junio). Lectura interpretada del antibiograma: una necesidad clínica |
Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica.
● Orden B, Martínez-Ruiz R, Millán R. Sensibilidad antibiótica de Haemophilus spp. en el área 6
de la comunidad de Madrid (2000-2004). Rev Esp Quimioterap 2005; 18(2): 173-8