Microbiologia Informe Practica 3

SISTEMA DE GESTIÓN DE CALIDAD
FORMATO PARA LA ELABORACIÓN DEL INFORME DE

PRÁCTICAS DE LABORATORIO, TALLER O CENTRO DE
SIMULACIÓN EN LAS CARRERAS
VICERRECTORADO ACADÉMICO / DIRECCIÓN
FECHA CÓDIGO VERSIÓN PÁGINA
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Plan 14 Fortalecimiento
Institucional 2014 - 2015
UNIDAD ACADÉMICA DE SALUD Y BIENESTAR

INFORME DE PRÁCTICAS
CARRERA DE ODONTOLOGÍA
Asignatura: Microbiologia Humana
Estudiante: Nayely Luna
Jorge Gonzalez
Docente: Dra. Johanna Rodriguez.
Ciclo: Segundo Paralelo A
:
Laboratorio: Fecha: 19/01/2021
Bloque 2 Título Técnicas de identificación de microorganismos
Temático Nº: del
bloque
:
Tema de la Tinciones Simples y Diferenciales.
práctica:
OBJETIVO GENERAL
 Reconocer las técnicas de tinción simples y diferenciales de los microorganismos
INTRODUCCIÓN
TÉCNICAS DE IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
FASES ANALITICAS DE LAS MUESTRAS:
 Fase pre analítica: incluye todos los procesos desde la solicitud del análisis por parte del
clínico, hasta el procesamiento de la muestra.
 Fase analítica: abarca todos los procedimientos relacionados directamente con el
procesamiento de la muestra.
 Fase post-analítica: se fundamenta en la validación de resultados, elaboración y emisión del
informe por parte del laboratorio.
PREPARACIONES MICROBIOLÓGICAS:
 Preparación en fresco simple; consiste en colocar una gota de líquido con los
microorganismos sobre un portaobjetos y a continuación cubrirla con un cubreobjetos.
 En preparaciones fijadas y teñidas: Las bacterias vivas son casi incoloras y no tienen
Cuenca: Av. Las Américas y Tarqui. Telf..: 2830751, 2824365, 2826563 Azogues: Campus Universitario “Luis Cordero El Grande” (frente al Terminal
Terrestre). Telf.: 2241613, 2243444, 2245205 Cañar: Calle Antonio Ávila Clavijo. Telf.: 2235268, 2235870 San Pablo de La Troncal: Cdla. Universitaria Km 72
Quinceava Este y Primera Sur. Telf.: 2424110 Macas: Av. Cap. Villanueva s/n Telf.: 2700392, 2700393
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InstitucionalAl
suficiente contraste con el medio que las rodea, lo cual hace su observación dificultosa. 2014 - 2015
teñirlas se les otorga un contraste de color respecto al medio que las rodea, ya que el
colorante reacciona con la célula pero no con el medio externo, con lo cual se hacen más
visibles.
FROTIS:
 Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o
cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen
agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida
TINCIONES:
 Consisten en la aplicación de dos colorantes que contrastan en su intensidad o color y un
paso intermedio que provoca una respuesta diferente entre microorganismos distintos o
entre determinadas células dentro de una población.
 Simples Se utiliza un solo colorante (básicos). - Azul de metileno - Safranina - Cristal violeta
 Compuestas Se utilizan dos ó más colorantes. Pueden usar mordentes y decolorantes -
Giemsa - Wrigth - May Grünwald (Eosina -Azul de metileno)
 Tinción negativa de Cápsula:
Selectivas: Son utilizadas para dar color y aislar partes específicas de los microorganismos
Diferenciales Reaccionan de manera diferente entre las distintas clases de bacterias.
COLORANTES:
 Los colorantes son sustancias de origen químico o biológico, generalmente tintes,
pigmentos, reactivos u otros compuestos, empleados en la coloración de tejidos
microorganismos para exámenes microscópicos, debiendo tener al menos, un grupo
cromóforo que le proporcione la propiedad de teñir.
 Mordente : compuesto químico intensificador de color.
 Básicos: son sales en las que la base, normalmente una amina, aporta el color, mientras
que la parte ácida es incolora.
 Ácidos: son sales con el anión coloreado y la base incolora. Son derivados de grupos
sulfónicos, carboxilos o hidroxilos fenólicos.
TÉCNICAS DE TINCIÓN:
 Tinciones simple:
En las tinciones simples se usa un solo colorante a la preparación. Todas las célulasde la
preparación quedan teñidas y se observan del mismo color.
 Tinción de cápsula:
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Es una técnica de coloración diferencial que tiene la propiedad de resaltar la estructuraInstitucional 2014 - 2015
polisacárida que rodea a ciertas bacterias y levaduras denominada cápsula. Se utiliza en los
laboratorios clínicos para ayudar al diagnóstico de ciertas patologías originadas por
microorganismos capsulados.
 Tinción de esporas:
Es la metodología usada para colorear las estructuras de resistencia que forman algunos géneros
bacterianos cuando se encuentran en condiciones desfavorables; estas estructuras corresponden
a una forma de supervivencia.
 Tinción de flagelos:
Se logra observar flagelos de bacterias. Es usada en laboratorios, pero no de rutina. Los pasos
que sigue son el de usar rosanilina sirve como tinción principal, y ácido tánico es agregado a la
solución como mordiente.
 Tincion de GRAM:
La tinción de Gram es un tipo de tinción que se realiza sobre las bacterias para observarlas mejor
bajo el microscopio. Según la distribución del peptidoglicano de la pared celular que las envuelve,
se tiñen de una forma u otra. Así, las bacterias que no se tiñen mediante esta técnica se
denominan Gram negativas. Están formadas por una pared más fina formada por menos capas de
peptidoglicano y una segunda membrana rica en lípidos (que repele la tinción Gram), al
microscopio aparecen incoloras.
 Tinción de Ziehl Neelsen :
Es una técnica de coloración de microorganismos para la identificación de patógenos, como
Mycobacterium tuberculosis causante de la tuberculosis
MICROSCOPIA:
 Se define la microscopía como la observación de objetos muy pequeños bajo grandes

aumentos. Los aparato que se usan para ello se denominan microscopios. En la medicina
se usan la microscopía especialmente para analizar tejidos, células, componentes
sanguíneos y microorganismos.
BACTERIAS:
 Los microorganismos que reciben el nombre de bacterias se pueden encontrar en todas

partes. La inmensa variedad de especies ha permitido a estas formas de vida colonizar casi
cualquier punto del mundo. Tampoco hace falta remarcar que han sido y siguen siendo
elementos esenciales para la vida actual, están al cargo de la descomposición orgánica.
Cocos: este tipo de bacterias se caracteriza por tener una envoltura celular de forma esférica. Es
decir, cuando son observadas por el microscopio son células circulares. De esta manera son
fácilmente identificables, y resulta sencillo distinguir entre ellas como individuos y el entorno.
Bacilos: La característica principal en este tipo de bacterias es que presentan forma de bastoncillos
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alargados. Al igual que pasaba en los cocos, los subtipos parten de cómo se agrupan Institucional
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La forma solitaria es lo que se llama como bacilo. Si se encuentran dos células unidas, entonces
se trata de un diplobacilo. Existe una forma que se encuentra entre las dos primeras que se ha
visto; no es tan esférica como un coco pero tampoco llega a ser tan alargada como un bacilo. Esta
recibe el nombre de cocobacilo.
Helicoidales: En este último tipo de bacterias se agrupan distintas formas que presentan curvaturas
en su estructura. Pueden ser entendidas como si fuesen bacilos que se han retorcido sobre sí
mismos, alcanzando una forma de hélice. Así, se trata de otro de esos tipos de bacterias que son
fácilmente reconocibles usando el microscopio, debido a su apariencia. Principalmente se dividen
en dos, espirales rígidas o espirales flexibles. La diferencia está en si las espirales que dibujan su
envoltura celular se mantienen iguales o pueden cambiar con el tiempo.
MATERIALES Y MÉTODOS
MATERIALES:
Elementos de protección personal (epp)
 Mascarilla.
 Bata quirúrgica
 Guantes.
 Zapatos quirúrgicos
 Gajas.
 Cofia Uniforme
Materiales para la realización de la tinción de gram
 Porta y cubre objetos
 Pinzas
 Asasa microbiológica
 Hisopo ésteril
 Fuente de coloración
 Safranina
 Lugol
 Mechero de alcohol
 Cristal violeta
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 Cultivo Bacteriano Institucional 2014 - 2015
 Asa Bacteriológica
 Temporizador
 Solución salina
 Agua Destilada
 Mechero
MÉTODOS:
TINCIÓN DE GRAM
Recoger la muestra de bacterias a estudio mediante un isopo (bastón estéril de algodón).
Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y dejarla secar.
Fijar la muestra mediante un alcohol (metanol).
Aplicar el tinte de violeta de genciana sobre el portaobjetos y esperar un minuto.
Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del violeta de genciana (lugol). El lugol y el
violeta de genciana forman un complejo insoluble en agua capaz de penetrar en la pared de
las células bacterianas.
Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol y acetona durante unos
segundos.
Opcionalmente se puede añadir una tinción de safranina o fucsina para distinguir las gram
negativas que aparecerán bajo el microscopio (en lugar de incoloras) con un tono rosado o
rojo. Lavar con agua.
Ya se puede observar la muestra al microscopio donde se visualizarán de color violeta las
gram positivas y de color rosa-rojizo las gram negativas
RESULTADOS
Como resultado de esta practica, explicamos que las bacterias Gramnegativas se llegan a teñir de
un color rosado mientras que las bacterias Grampostivas se tiñen de un color morado o azul.
CONCLUSIÓN
Se concluye explicando que la tinción de gram es una técnica primordial en la laboratorio científico
para poder hacer pruebas e identificar los tipos de hongos o bacterias que se obtenga de cada
muestra, como la cavidad oral que esta llena de muchos organismos.
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FOTOS (Evidencias)
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RECOMENDACIONES
-sin recomendaciones
BIBLIOGRAFÍA
 López-Jácome, L. E., Hernández-Durán, M., Colín-Castro, C. A., Ortega-Peña, S., Cerón-
González, G., & Franco-Cendejas, R. (2014). Las tinciones básicas en el laboratorio de
microbiología. Investig. en discapacidades, 3(1), 10-18. Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/invdis/ir-2014/ir141b.pdf?
fbclid=IwAR3z9_ljzoGBF2taww_xeAuX2t1CkNP71GcChg-iew_43tDohre_o7mAInM
 http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/U2j_PreparacionesMicrobiologicas_17194.PDF
 Alejandra, S. P. L. t¿Técnicas de tinción. Disponible en:

http://ri.uaemex.mx/bitstream/handle/20.500.11799/70467/secme-29089_1.pdf?sequence=1
EVALUACIÓN
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 Los microorganismos que reciben el nombre de bacterias se pueden encontrar en todas

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