Reporte de Laboratorio de Operaciones Unitarias II. 21-08-22 Práctica #6.
Extracción
de pigmentos fotosintéticos(clorofila)
Karime Alejandra Torres Ceceña. karime.torres205865@potros.itson.edu.mx Instituto Tecnológico
de Sonora, 5 de febrero 818 sur, CP 85000, Cd. Obregón, Sonora, México.
Introducción. La fotosíntesis es el principal
proceso fisiológico por el que las plantas
responden a los cambios en las condiciones
ambientales (Calatayud y Barreno et al.
2004).
El término 'pigmento' es utilizado para
describir una molécula que absorbe luz y
presenta un color. Los pigmentos
fotosintéticos son importantes para las plantas
principalmente para la cosecha de luz y
producción de poder reductor como ATP y
NADPH (Masoudi-Sadaghiani et al. 2011).
Los pigmentos vegetales son compuestos
químicos responsables de los colores típicos
delas plantas. Los pigmentos se caracterizan
por absorber luz y presentar color por el
reflejo de ciertos espectros de luz.
Los pigmentos fotosintéticos son los únicos
que tienen la capacidad de absorber la energía
de la luz solar y hacerla disponible para el
aparato fotosintético. En las plantas terrestres
hay dos clases de pigmentos fotosintéticos:
las clorofilas y los carotenoides.
La capacidad de las clorofilas y los
carotenoides para absorber la luz del sol y
utilizarla de manera efectiva está relacionada
con su estructura molecular y su organización
dentro de la célula (Meringer, 2020).
El contenido de clorofila de las hojas a
menudo se utiliza como parámetro para
determinar el estado fisiológico de la planta,
ya que representa una medida de las
dimensiones del sistema fotosintéticos y su
eficiencia (Innplant, 2021).
Obtener pigmentos vegetales fotosintéticos
aplicando metodologías para separación
simples. Analizar el pigmento fotosintético
donde se menciona que los cloroplastos
poseen una mezcla de pigmentos de
diferentes colores estudiando solamente la
clorofila.
Metodología. Extracción de pigmentos
(sólido – líquido). Se lavaron y se cortaron
trozos pequeños cinco hojas de espinaca
eliminando la nervadura y se trituraron en un
mortero con 60 ml de etanol y se trituraron
por 10 minutos.
Con la solución obtenida, se filtró utilizando
un papel filtro sobre un embudo obteniendo
el líquido filtrado en un vaso precipitado de
150 ml.
Observación del fenómeno de
fluorescencia. Para comprobar que los
pigmentos que se extrajeron son de color
verde, se colocó el vaso de precipitado que
contenía el líquido y se posicionó contra luz.
Se colocó el vaso de precipitado en contra la
luz y esta vez no se posiciono de manera
recta, esto se hizo para observar lo que se le
llama fluorescencia.
Solubilidad diferencial de los pigmentos.
Se nombró a dos tubos de ensayo de 16x150
mm con las letras “a” y “b”, a los tubos se le
agregaron 6 ml de los pigmentos contenidos
en el vaso precipitado, se agregaron a ambos
tubos 3 ml de éter etílico y se agito por 30
segundos.
Al tubo “a” se le agregó 3 ml de agua
destilada, se agito y se dejó en reposo por 10
minutos.
En el tubo “b” se agregó 1.5 ml de la solución
NaOH al 20% p/v y se agitó, al igual que en
el tubo “a”, se dejó en reposo por 10 minutos.
Separación de los pigmentos por
cromatografía. En una caja Petri se vertió un
poco de la solución que contiene los
pigmentos hasta que se alcanzaron 2 mm de
altura.
Se colocó de manera vertical una tira de papel https://www.researchgate.net/publicat
filtro dentro de la caja Petri con cuidado de ion/357576119_Extraccion_y_determ
que no tocará las paredes de la caja. inacion_de_pigmentos_fotosinteticos
Se esperaron 10 minutos mientras se _de_vegetales [accessed Oct 20
realizaba la separación cromatografía de los 2022].
pigmentos. - Masoudi-Sadaghiani F, Babak AM,
Zardoshti MR, Hassan RSM,
Separación de clorofila y carotenoides. Se Tavakoli A (2011)Response of
agregaron 5 ml de la solución de pigmentos proline, soluble sugars,
en un tubo de ensayo y se le añadieron 3 ml photosynthetic pigments and
de n-hexano y se mezcló los componentes y antioxidantenzymes in potato
finalmente se dejó en reposo por 5 minutos. (Solanum tuberosum L.) to different
irrigation regimes ingreenhouse
Extracción de carotenoides de zanahoria. condition. Australian Journal of Crop
En esta parte de la práctica se dividió en dos Science 5: 55-60.
partes (a y b). (8) (PDF) Extracción y
Extracción sólido-líquido. Se lavó y se peló determinación de pigmentos
una zanhoria y se picó hasta que se obtuvo un fotosintéticos de vegetales. Available
peso de 10 g, se colocó en un mortero con 50 from:
ml de etanol y se trituró por 10 minutos. https://www.researchgate.net/publicat
Se filtró la solución que se obtuvo de la ion/357576119_Extraccion_y_determ
trituración sobre un embudo, se recolectó el inacion_de_pigmentos_fotosinteticos
filtrado en un vaso de precipitado de 150 ml. _de_vegetales [accessed Oct 20
2022].
Extracción líquido-líquido. Se etiquetaron - Meringer, M. (2020, 20 agosto).
dos tubos “a” y “b” y se le agregaron 5 ml de Extracción y separación de
la solución que se obtuvo en el paso anterior, pigmentos vegetales.
también se le añadieron 5 ml de agua XXIXOLIMPÍADA ARGENTINA
destilada y se agito por 30 segundos. DE BIOLOGÍA-2020. Recuperado 9
Se dejó reposar por 1 minuto y se agregó 5 ml de noviembre de2021,
de hexano y se agito por 30 segundos. dehttps://www.oab.org.ar/Downloads
Después de haberlo agitado, se esperó a que /TpExtraccionySeparacionPigmentos
fuera visible la separación de las fases Vegetales.pdf
imnisibles
- (8) (PDF) Extracción y
Resultados y discusión. determinación de pigmentos
fotosintéticos de vegetales. Available
Conclusión. from:
https://www.researchgate.net/publicat
Referencias. ion/357576119_Extraccion_y_determ
- Calatayud A, Barreno E (2004) inacion_de_pigmentos_fotosinteticos
Response to ozone in two lettuce _de_vegetales [accessed Oct 20
varieties on chlorophyll 2022].
afluorescence, photosynthetic - Innoplant. (2021). La importancia del
pigments and lipid peroxidation. estudio de los pigmentos
Plant Physiology andBiochemistry fotosintéticos. 19/10/2022, de
42: 549-555 Innoplant Sitio web:
(8) (PDF) Extracción y https://innoplant.es/2021/09/27/la-
determinación de pigmentos importancia-del-estudio-de-los-
fotosintéticos de vegetales. Available pigmentos-fotosinteticos/
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- Tato, L. (2002). Extracción y
separación de pigmentos
fotosintéticos . 20/10/2022, de IESO
“Azagra” Sitio web:
http://dpto.educacion.navarra.es/planl
ectura/materialesdidacticos_files/
CCNN-Pigmentos
%20fotosinteticos.pdf