Universidad Tecnológica de Pereira

Escuela de química
Laboratorio análisis instrumental (QI642)
11 octubre 2021
Integrantes:
Valentina Alzate Ospina Juan Alejandro Aguirre Gil
1088039125 1088353082
v.alzate@utp.edu.co j.aguirre1@utp.edu.co

FOTOMETRÍA UV-VISIBLE
Introducción

La Espectrofotometría es una de las técnicas experimentales más utilizadas para la

detección específica de moléculas. Se caracteriza por su precisión, sensibilidad y su
aplicabilidad a moléculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomoléculas, etc) y estado
de agregación (sólido, líquido, gas).

Cuando la luz (considerada como energía) es absorbida por una molécula se origina un
salto desde un estado energético basal o fundamental, E1, a un estado de mayor energía
(estado excitado), E2. Y sólo se absorberá la energía que permita el salto al estado excitado.
Cada molécula tiene una serie de estados excitados (o bandas) que la distingue del resto de
moléculas. Como consecuencia, la absorción que a distintas longitudes de onda presenta
una molécula, esto es, su espectro de absorción constituye una seña de identidad de esta.
Por último, la molécula en forma excitada libera la energía absorbida hasta el estado
energético fundamental. [1]

La fotometría se basa en el principio de la medición de la atenuación de un haz de luz

después de su paso a través de una muestra. El fundamento de la espectroscopía se debe a la
capacidad de las moléculas para absorber radiaciones, entre ellas las radiaciones dentro del
espectro UV-visible. Las longitudes de onda de las radiaciones que una molécula puede
absorber y la eficiencia con la que se absorben dependen de la estructura atómica y de las
condiciones del medio. Inicialmente se midieron aproximadamente 0,2 g tanto de la
muestra de concentración conocida de manganeso como de la muestra problema (clip), se
les realizó el tratamiento respectivo de forma simultánea, después de tener ambas
disoluciones preparadas se usa una poca cantidad de estas para preparar el blanco
fotométrico, tanto como a las disoluciones de las muestras como a los blancos se les mide
la absorbancia. Luego se partió de una solución de concentración conocida para preparar
los patrones necesarios para obtener la curva de calibración.

1
Materiales y métodos

Tratamiento simultáneo de la muestra y el estándar:

Para realizar el tratamiento de la muestra y el estándar de acero de contenido de Mn

conocido y certificado, se pesó exactamente una muestra de acero entre 0.20 a 0.25 g, se
transfirió está a un beaker de 250 mL, se llevó a la vitrina de gases y se le adicionaron 25
mL de ácido nítrico diluido (1:3), se cubrió el vaso con un vidrio de reloj y se hirvió
lentamente hasta que la mezcla se disolvió. Para compensar las pérdidas por evaporación,
se adiciona agua destilada y se hirvió durante 1 minuto. Se añadió 0.5 g de persulfato
amónico, y se hirvió durante 10 minutos más para oxidar los compuestos de carbono. Se
diluyó con 25 mL de agua destilada y se añadió 5 mL de ácido fosfórico concentrado y 0.2
gramos de peryodato potásico para asegurar la oxidación completa del Mn; se calentó a
ebullición hasta la aparición de un color púrpura persistente. Se dejó enfriar la disolución y
se transfirió cuantitativamente a un matraz aforado de 100 mL, diluyendo hasta el enrase
con agua destilada y agitando para homogeneizar. Para ajustar el cero de A, al medir la de
la muestra y la del estándar, se preparan los blancos fotométricos tomando 25 mL de la
disolución anterior en un beaker de 100 mL, y se añadieron varias gotas de ácido
clorhídrico concentrado, calentándose para reducir el permanganato y decolorar la solución.
Por último, se midió la absorbancia de cada muestra y del estándar.

Preparación de los patrones:

Primero se calculó los gramos de permanganato de potasio de peso molecular 158.04 g y

99% de pureza requeridos para preparar 250 mL de una solución, cuya concentración en
Mn sea de 100 mg/L o 100 ppm. Luego se preparó la solución, usando como solvente agua
destilada. Se calculó también, cuántos mL de la solución anterior se necesitaban para
preparar 25 mL de cada patrón de concentración de 2.0 – 5.0 – 10.0 – 15.0 y 20.0 mg/L
(ppm) en Mn, preparándose después los patrones, usando como solvente agua destilada

Finalmente, se calibró el instrumento y se midió la absorbancia de cada patrón a 526 nm

utilizando como blanco agua destilada.

Resultados

En la tabla 1 se muestran las absorbancias medidas de cada una de las muestras problemas.

PATRÓN ABSORBANCIA

muestra conocida (estándar) 0,362

muestra desconocida (clip) 0,749

2
 Tabla 1. Absorbancias de las muestras analizadas.

Para la medición de patrones se prepararon 5 patrones de diferentes concentraciones a los

cuales también se les midió la absorbancia, los valores obtenidos se muestran en la tabla 2.

PATRÓN [mg/L] ABSORBANCIA

2,5 0,387

5,0 0,896

10,0 1,410

15,0 2,056

20,0 2,501

Tabla 2. Absorbancias de las muestras patrón.

A partir de los datos presentados en la tabla 2 se genera la curva de calibración (gráfica 1) y

mediante la ecuación de la recta obtenida se despeja el valor de ‘x’ para calcular las
concentraciones de Mg en las muestras problema. los datos se muestran en la tabla 3.

Gráfica 1. Curva de calibración

A continuación se muestra como se calcula la concentración de manganeso para la muestra

conocida, de igual forma se realiza el cálculo para la muestra desconocida.
𝑦−0,2063
𝑦 = 0, 1185𝑥 + 0, 2063 → 𝑥 = 0,1185

3
 0,362−0,2063
𝑥= 0,1185
= 1, 314 𝑝𝑚𝑚 𝑀𝑛

Muestra Concentración [ppm]

Estándar 1,314
Desconocida 4,580

Análisis de resultados

Para la determinación del contenido de manganeso en muestras de acero, se realiza el

tratamiento correspondiente, como se muestra en los materiales y métodos, donde por las
pequeñas cantidades de manganeso en los aceros, el mejor método es la determinación
calorimétrica basado en el color púrpura característico del ion permanganato, ya que este
produce resultados precisos (reacción 1), Siguiente a esto, el óxido nítrico producido debe
eliminarse, ya que reacciona con el peryodato e inhibiría así la oxidación del Mn+2 a
permanganato (reacción 2), el peroxidisulfato también se oxida y elimina carbono u otra
materia orgánica (reacción 3). Finalmente se presenta la relación molar presente en KMnO4
y Mn (reacción 4). [3]

3 𝑀𝑛 + 2 𝑁𝑂3− + 8𝐻+ → 3𝑀𝑛+2 + 2𝑁𝑂 + 4𝐻2𝑂 (1)

2 𝑁𝑂 + 3𝑆2𝑂8−2 + 4𝐻2𝑂 → 2𝑁𝑂3− + 6𝑆𝑂4−2 + 8𝐻+ (2)

2 𝑀𝑛+2 + 5 𝐼𝑂4− + 3𝐻2𝑂 → 2𝑀𝑛𝑂4− + 5𝐼𝑂3− + 6𝐻+ (3)

𝑀𝑛𝑂4−+8𝐻++5𝑒−→𝑀𝑛2++4𝐻2𝑂 (4)

En el proceso de fabricación del acero, la adición de manganeso elimina las impurezas

como el azufre y el oxígeno, al mismo tiempo optimiza las propiedades físicas del acero al
mejorar su resistencia, dureza; las principales características que aporta son la fijación del
contenido de azufre, actúa como agente de endurecimiento y como agente reductor.
También, el manganeso se oxida fácilmente y exhibe propiedades magnéticas frente a
campos magnéticos externos.

En el análisis de manganeso en acero, otros metales como la plata, cobre, cobalto, níquel,
cromo, entre otros, pueden interferir para obtener un mejor resultado de esta determinación.
[4]

4
Para la implementación de esta técnica es necesario tener presentes los principales
parámetros que afectan la medición para así poder obtener resultados mucho más
confiables, poder realizar una correcta medición y realizar un buen manejo de los equipos
para no acortar su vida útil.

Conclusiones

1. El análisis de fotometría a muestras coloreadas es muy importante, ya que así se

puede conocer una muestra no conocida, ya que, por medio del espectro y curva de
calibración, se pueden comparar con los valores reales de diferentes muestras y
concluir con cual se está trabajando.
2. Para la determinación de manganeso en muestras de acero, la aplicación de
fotometría es la más utilizada, ya que con esta se obtienen porcentajes más exactos
con respecto a los datos en la literatura del promedio de contenido de manganeso en
toda variedad de muestras de acero ya que son cantidades muy pequeñas, esto,
teniendo en cuenta que se está trabajando con un equipo con una buena sensibilidad.
3. La fotometría es una técnica muy utilizada para determinar las concentraciones de
sustancias a partir de las absorbancias de sus patrones además se observó una buena
linealidad del método de medición.
4. Con la fotometría es posible determinar la concentración de una muestra
desconocida a partir de una serie de patrones de diferentes concentraciones de la
misma especie y realizando la respectiva comparación de estos.
5. Es necesario conocer la longitud de onda a la que la sustancia de estudio presenta su
máximo de absorción, esto también brinda una idea de cual es la sustancia con la
que se está trabajando ya que los máximos son específicos para cada especie.

Referencias
[1] Nieves D. J, Antonio B. R, Emilio F. R, Aurora G. C, Jesús J. N, José P, Fermín T. M, Isaac T. F.
“Espectrofometría: Espectros de absorción y cuantificación colorimétrica de biomoléculas”
Departamento de Bioquímica y Biología Molecular, Campus Universitario de Rabanales.

[2] Universidad Pablo de Olavide “Fundamentos de química. práctica 4, espectrofotometría”

[Online] Disponible en: https://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/quim
biotec/FQpractica4.pdf. Acceso 15 Oct. 2020.

[3] Libretexts. “Determinación del contenido de manganeso del acero” Chemistry LibreTexts, 2020,
[online]Disponibleen:https://chem.libretexts.org/Ancillary_Materials/Laboratory_Experiments/Wet_L
ab_Experiments/Analytical_Chemistry_Labs/Determination_of_the_Mn_Content_of_Steel