LABORATORIO DE INMUNOLOGÍA GENERAL

Docente: M. A. C. María Ludivina de los Reyes Martínez

Reporte # 4
Determinación de Antiestreptolisinas

Elaboro: Román Esquivel Donjuan

Semestre y grupo: 4° “G”

Carrera: Químico Farmacéutico Biólogo

Fecha de entrega: 9 de marzo de 2023

 REPORTE DE RESULTADOS

SESION 4 ANTIESTREPTOLISINA

OBJETIVO:

Medir los anticuerpos contra estreptolisina “O” producida por el Estreptococo del grupo A.

FUNDAMENTO:

La estreptolisina O es una exoenzima inmunogénico tóxico producido por estreptococos β-

hemolíticos de los grupos A, C y G. La cuantificación de los anticuerpos ASO se utiliza para
el diagnóstico y tratamiento de enfermedades como las fiebres reumáticas, glomerulonefritis
aguda, y otras infecciones estreptocócicas. Las fiebres reumáticas es una enfermedad
inflamatoria que afecta al tejido conectivo de diversas zonas del cuerpo humano (piel,
corazón, articulaciones, etc.) y la glomerulonefritis aguda es una inflamación del riñón que
afecta principalmente a los glomérulos renales.

¿De qué se trata esta prueba?

Es una prueba para detectar la presencia de anticuerpos que el cuerpo produce al combatir
la bacteria estreptococo del grupo A. Estos anticuerpos combaten una sustancia producida
por la bacteria llamada Estreptolisina O. El estreptococo del grupo A puede causar amigdalitis
estreptocócica. También puede causar otras infecciones que pueden provocar otras
afecciones más graves. Estas incluyen la fiebre reumática, que suele presentarse en niños
de entre 5 y 15 años. La bacteria estreptococo también puede causar las siguientes
afecciones: - Glomerulonefritis estreptocócica, un trastorno de los riñones. - Escarlatina, una
infección que causa un sarpullido. - Impétigo, una infección de la piel. - Síndrome del choque
tóxico. - Celulitis y fascitis necrosante, una enfermedad que provoca la muerte de tejidos del
cuerpo.
DIAGRAMA DE FLUJO:

1.- Comenzamos la practica realizando una extracción sanguínea a una de nuestras

compañeras de equipo.

2.- Entonces agregamos la muestra de sangre en un tubo rojo y esperamos a que se

coagulara.

3.- Procedimos a preparar el material necesario para la prueba cualitativa, primero que todo
revisamos que viniera todo lo que se indicaba en el inserto (control positivo, control negativo,
reactivo ASO, solución Buffer y la placa para llevar a cabo las reacciones), también
aprovechamos a realizar el control de calidad correspondiente (revisando fechas de
caducidad y número de lote).
4.- Antes de realizar la correspondiente prueba cualitativa con la muestra del paciente se
procede a revisar los controles, agregamos una gota del control positivo en uno de los pocillos
previamente identificado y lo mismo con el control negativo en otro de los pocillos, seguido a
esto agregamos el reactivo ASO a cada uno de los pocillos, esto con la finalidad de
cerciorarnos que funcionara adecuadamente, es importante hacer mención sobre la correcta
mezcla del reactivo ASO y los controles utilizando distintos aplicadores para cada reacción,
por al menos 2 minutos.

5.- Si funcionó adecuadamente nuestro reactivo ASO, entonces procederemos a tomar una
gota de plasma de nuestra muestra con una pipeta pasteur, y la colocaremos en la placa,
enseguida tomaremos una gota del reactivo ASO y la colocaremos en el mismo pocillo con
un aplicador limpio mezclaremos bien por al menos 2 minutos, si observamos aglutinación
nuestra prueba cualitativa será positiva si no será negativa, entonces podremos reportar el
resultado en el caso explícito de ser negativa.

Aglutinación (+)
6.- En el caso de que la prueba haya sido positiva procederemos a realizar la prueba
cuantitativa, para esta prueba prepararemos 3 diluciones en 3 tubos de ensaye, identificados
como: 1:2, 1:4 y 1:8, en estos tres tubos agregaremos 100 μL de la solución Buffer en cada
uno de ellos con ayuda de la pipeta automática.
7.- En el tubo 1:2 agregaremos 100 μL de muestra y agitaremos muy bien, entonces de este
mismo tomaremos 100 μL y los pasaremos al tubo 1:4, volveremos a agitar muy bien, en
seguida tomamos 100 μL del tubo 1:4 y los pasamos al tubo 1:8, volvemos a agitar bien y
descartamos de este último 100 μL para que los tres tubos contengan la misma cantidad.

8.- Agregamos 1 gota de cada dilución (1:2, 1:4 y 1:8) en sus respectivos pocillos ya
identificados en la placa, a cada uno de los pocillos les agregaremos 1 gota de reactivo ASO
y mezclamos muy bien con un aplicador limpio, en cada reacción por alrededor de dos
minutos para observar si hay aglutinación.
9.- En nuestro caso aglutino en el pocillo de la dilución 1:2 lo cual son 400 IU/mL, por último,
reportamos nuestro resultado.

OBSERVACIONES:

Es muy importante realizar un adecuado control de calidad, revisar que el reactivo ASO,
controles, buffer, etc. Que indica el inserto que contiene nuestra caja se encuentren en su
totalidad, cerciorarnos de las fechas de caducidad, disponer de diferentes números de lote,
hacer la prueba correspondiente con los controles (+) y (-), cuando se mezcle el reactivo con
los controles o muestra se debe hacer utilizando un aplicador limpio para cada reacción, por
un lapso de al menos 2 minutos. Al realizar las diluciones se debe de tener el especial cuidado
de agitar muy bien antes de pasar a las siguientes diluciones los 100 μL correspondientes.

RESULTADOS:

ID. Paciente: Rogelio Saldívar Linares Edad: 20 años Sexo: Masculino

 EXAMEN RESULTADO VALORES DE
REFERENIA

ANTIESTREPTOLISINAS Positivo 1:2= 0 – 200 Uds

400 IU/ml Todd
1:2 = 400 IU/ml
1:4 = 800 IU/ml
1:8 = 1,600
IU/ml

CONCLUSIONES:

Conozco el correcto control de calidad que se debe llevar a cabo durante la prueba de
antiestreptolisina, que es revisar que contenga todo el contenido indicado en el inserto
(reactivo ASO, control positivo, control negativo, soluciones Buffer y placa donde se realizaran
las reacciones), así como verificar con los controles negativo y positivo el adecuado
funcionamiento del reactivo ASO, estar atento a las fechas de caducidad, buscar mantener
reactivos de números de lotes distintos, mezclar adecuadamente por al menos 2 minutos y
agitar muy bien las diluciones antes de pasarlas al siguiente tubo de ensaye (1:2 a 1:4 y a
1:8).

Se debe realizar un ayuno de 8 a 10 hrs. Antes de realizarse esta prueba, así como 3 días
antes se debe dejar de consumir carnes y alcohol.

CUESTIONARIO:

Mencione la Importancia de la prueba de antiestreptolisina:

Para ayudar en el diagnóstico del médico, identificando la presencia de anticuerpos ASO por
ende la presencia de Estreptococos del grupo A y de ser así cuantificar a estos anticuerpos
para que el médico pueda dar un adecuado tratamiento.

Con que otro nombre se le conoce a la prueba de antiestreptolisinas:

ASO-ALSO

Que enfermedades están relacionadas con las antiestreptolisinas:

- Infección en garganta
- Escarlatina (celulitis)
- Fiebre reumática
- Glomerulonefritis

En niños

- Otitis
- Amigdalitis

BIBLIOGRAFIA:

1.- UC San Diego Health. Título de antiestreptolisina O de estreptococos (en sangre)

[Internet]. EUA: Chad Haldeman-Englert MD; Desconocido [Revisado 9 de enero de 2022;
consultado 25 de febrero de 2023]. Disponible en:
https://myhealth.ucsd.edu/Spanish/RelatedItems/167,strep_aso_titer_blood_ES

2.- E. Rojo, R. Isela. Determinacion de titulos sericos de antiestreptolisina O y factor

reumatoide, en pacientes con infeccion faringea por Streptococcus pyogenes, grupo A
[Internet. Mexico: C. Jimenez, G. Hernandez, M. de Lourdes; 1992 [Consutado 25 de febrero
de 2023]. Disponible en: https://ru.dgb.unam.mx/handle/DGB_UNAM/TES01000187957
Firma del docente: Fecha: Calificación: