Prueba de ASTO

Es la prueba de detección de anticuerpos de tipo de IgM e IgA frente al antígeno

llamado Streptolisina O, producido por un coco grampositivo llamado Streptococcus
pyogenes. El anticuerpo antiestreptolisina O se encuentra presente en casi todas las
personas en títulos bajos, debido a que las infecciones estreptocócicas son comunes.
Sin embargo un título alto o creciente de antiestreptolisina O, indica una infección
reciente producida por este estreptococo beta hemolítico de grupo A

Enfermedades causadas por el Streptococcus pyogenes

Causa
Por el mismo germen
Por las toxinas del germen
Por reacción de autoinmunidad
Enfermedad
Infecciones respiratorias: Faringitis, otitis,
sinusitis, neumonías. Infecciones
cutáneas: piodermitis, erisipela, impétigo.
Otras infecciones: artritis, osteomielitis,
pielonefritis, sepsis
Escarlatina
Fiebre reumática (cepas faríngeas)
Glomerulonefritis postestreptocócica
(cepas cutáneas)
PASOS PARA LA REALIZACIÓN DE LA PRUEBA DE ASTO (técnica
de aglutinacion por latex)
- Material:
1. Placas de vidrio de color negro
2. Muestra del paciente (suero plasmático)
3. Control negativo o solución fisiológica
4. Control positivo o suero con anticuerpos conocidos
5. Varillas descartables
6. Reactivo de látex que contiene Estreptolisina O

Llevar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente. Agitar el Reactivo de látex

antes de usar, vaciando previamente la pipeta del gotero.

- Procedimiento

Técnica cualitativa
I- La primera prueba debe realizarse siempre con un control positivo y un
control negativo para verificar la confiabilidad del reactivo. Para ello, se
utiliza una placa de vidrio negro con tres círculos, y se coloca una gota de 50
ul de control +, muestra del paciente y control -, en los círculos 1, 2 y 3
respectivamente. Se coloca una gota de reactivo en cada uno de los
círculos, se mezcla con una varilla descartable cada círculo, hasta obtener
una suspensión uniforme en la superficie delimitada de la placa, se hace
rotar la placa de vidrio por 2 minutos y se observa.
II- Para las futuras pruebas, se utiliza solo un círculo de la placa de vidrio, y se
coloca: Reactivo latex 1 gota (50 ul) y Muestra 1 gota (50 ul). Mezclar con
varilla descartable (uno para cada muestra) hasta obtener una suspensión
 uniforme en la superficie delimitada de la placa. Inmediatamente,
balancear suavemente la placa y observar macroscópicamente el resultado
dentro de los 2 minutos.

Interpretación
Se considera positiva la prueba cuando se observa la presencia de floculos o
grumos blancos (aglutinación), que indican que ha habido reacción antígeno
anticuerpo entre los anticuerpos antiestreptolisina O de la muestra y la
estreptolisina O del reactivo latex.

Se considera negativa la prueba ante la ausencia de aglutinación que indica que no

ha habido reacción antígeno anticuerpo

Prueba positiva Prueba negativa

Técnica cuantitativa
I- Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas, para
ello: utilizar una placa de vidrio de color negro con 3 círculos, colocar 50 ul
de solución fisiológica en cada uno de los círculos. Agregar 50 ul de suero
del paciente al círculo No 1 y mezclar aspirando y expulsando 8 veces con
una pipeta descartable. Transferir 50 ul de esta dilución al tubo No 2 y
mezclar, transferir 50 ul de esta dilución al tuvo No 3, mezclar y sacar 50 ul
de la mezcla y reservar, pues no se conoce si se continuará así las
diluciones, dependiendo de los resultados obtenidos. Las diluciones así
obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, etc. Colocar ahora el reactivo látex
en cada uno de los círculos, mezclar con una varilla descartable desde el
círculo de mayor dilución al de menor dilución. Rotar la placa de vidrio
durante 2 minutos y observar
 Interpretación

Se observa si hay aglutinación en cada uno de los círculos y se da un valor a cada

círculo, como sigue:

1. Prueba cualitativa es igual a 200 UI/ml, sirve como constante para obtener los
valores en la prueba cuantitativa, ya que se multiplica 200 x el denominador de
la dilución, así:
2. 1º círculo: dilución ½ es igual a 400 UI/ml
3. 2º círculo: dilución ¼ es igual a 800 UI/ml
4. 3º circulo: dilución 1/8 es igual a 1600 UI/ml
5. Se puede seguir obteniendo más resultados según sea necesario

Los valores obtenidos en la prueba deben compararse con los valores normales de la
prueba en nuestra población:

- Niños: 250+/- 50 UI/ml

- Adultos: 200 +/-50 UI/ml

Los valores varían de acuerdo al tipo de población y también de acuerdo a la edad.

Ventajas y desventajas de la prueba de ASTO por látex

Es una prueba fácil, y no necesita de personal entrenado para su realización. Es
económica y accesible para todos. Es rápida y de interpretación cuantitativa, además
que permite el diagnóstico presuntivo de una infección estreptocócica cuando la
clínica del paciente lo sugiere.

Sin embargo, puede dar falsos negativos, ya que no es una prueba sensible, y no
detecta niveles bajos de anticuerpos. Probablemente este problema, pueda mejorarse
utilizando otro tipo de técnica para la determinación de estos anticuerpos (ELISA,
hemoaglutinación). Puede dar falsos negativos también cuando el paciente se
encuentra al inicio de su enfermedad, puesto que los anticuerpos tardan en aparecer,
o cuando ha recurrido a un tratamiento antibiótico previo a la prueba.

Por otro lado, no es una prueba específica, es posible encontrar también falsos
positivos, ya que da margen a reacciones cruzadas con otras infeccios. Además, los
anticuerpos IgM , suelen permanecer hasta 6 meses en el plasma del paciente, por lo
que un paciente asintomático podría tener una prueba de ASTO positiva, si ha tenido
una infección estreptocócica en este margen de tiempo. Requiere confirmación con un
cultivo bacteriano.