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MICROSCOPIO

Segunda visita
Dra. Fany Rivera
ORIGEN DEL MICROSCOPIO
La historia del microscopio empieza con la invención del microscopio
compuesto, es decir, con la idea de combinar más de una lente para
observar objetos de forma aumentada.
La lente más antigua que se ha
conservado es la lente de Nimrud,
fabricada en el imperio asirio
alrededor del año 750 a. C.
• En Italia con la invención de los lentes
• Microscopio compuesto en el año de 1590
• Galileo Galilei en 1609

6x hasta
9x
• Las observaciones microscópicas
por Robert Hooke (micrografía)
50x
Robert Hooke fue introducir la palabra
célula para describir las estructuras
que observó en una muestra de
corcho.
ANTONIE VAN LEEUWENHOEK
Fabricaba microscopios simples, es
decir, de una sola lente.
Algunas de las observaciones más
importantes que documentó incluyen
las fibras musculares, distintos tipos de
bacterias y los glóbulos rojos.
MICROSCOPIOS SEGÚN EL
NUMERO DE OCULAR
• Monocular: es cuando el microscopio solo posee un ocular, con
lo cual solo nos permite ver la imagen en 2 dimensiones.
• Binocular: es la mejora del anterior en el cual se utilizan dos
oculares, en los cuales llegan imágenes levemente diferentes,
casi imperceptible a simple vista. Esto provoca que el cerebro
humano procese la imagen y crea la imagen 3D de la muestra.
• Trinocular: Con la aparición de las cámaras aparece el
microscopio Trinocular, en el sistema binocular posee una
tercera entrada para una cámara, esto es ideal para docencia
con el fin de mostrar la imagen visualizada por el operador
EL MICROSCOPIO Y SUS PARTES
SISTEMA ÓPTICO
• OCULAR: Es la parte del microscopio a la
que se acercan los ojos para observar la
preparación. El microscopio óptico puede
constar de uno, dos, tres e incluso cuatro
oculares. Captan y amplían la imagen
proporcionada por los objetivos.

Los oculares de tipo binocular están unidos a


un mecanismo que permite ajustarlos a la
distancia Inter pupilar. Hay que tener en
cuenta que cada observador posee una
distancia Inter pupilar distinta.
SISTEMA OPTICO
OBJETIVOS: Son tubos que contienen en su interior un
sistema de lentes de diferentes aumentos. Están
situados en el revólver porta-objetivos, que facilita la
elección del objetivo a utilizar para visualizar la
preparación.
Existen dos tipos de objetivos:
• Objetivos secos: La preparación y el objetivo están
separados por el aire, ya que no se necesita
interponer ninguna sustancia entre ellos.
• Objetivos de inmersión: Entre la preparación y el
objetivo se interpone el aceite de inmersión, con un
índice de refracción próximo al del vidrio.
SISTEMA ÓPTICO
• CONDENSADOR: Lente que
concentra los rayos luminosos
sobre la preparación.
• DIAFRAGMA: Regula la cantidad
de luz que entra en el
condensador.
• LAMPARA: Emite los rayos
luminosos hacia el condensador.
SISTEMA OPTICO
TORNILLOS DE DESPLAZAMIENTO: Estos tornillos desplazan la platina hacia
arriba y hacia abajo permitiendo el enfoque del objeto a observar en la
preparación.

• Tornillo Macrométrico: Es el tornillo de


avance rápido. Desplaza la platina
hacia arriba o hacia abajo, separando
o acercando rápidamente la
preparación al objetivo.
• Tornillo Micrométrico: Es el tornillo de
ajuste fino. Desplaza muy lentamente
la platina, acercando o separando la
preparación al objetivo, hacia arriba o
hacia abajo. Es el tornillo que nos
permite enfocar con precisión.
SISTEMA MECANICO
• Pie o Soporte del microscopio: Sirve
de base al microscopio y su función
es dar estabilidad al aparato. Debe
tener la rigidez y el peso suficiente
para soportar al microscopio. Un
microscopio óptico es un elemento
pesado y muy delicado, y el pie
debe ser lo suficientemente resistente
y consistente para soportar todo su
conjunto.
SISTEMA MECANICO
• BRAZO DEL MICROSCOPIO: Es un
elemento de unión entre el
pie/base/soporte del microscopio y la
parte superior del mismo. En la parte
superior se encuentra el tubo que da
soporte al porta-oculares y al revólver
porta-objetivos. Es un elemento que,
como nexo de unión, debe tener
buena rigidez y ser resistente, sobre
todo teniendo en cuenta que es el
elemento de agarre del microscopio
para transportarlo.
SISTEMA MECANICO
• Platina: Placa horizontal que sirve
de soporte para la preparación.
Contiene un orificio en el centro
que permite el paso de la luz
procedente del condensador
hasta la preparación. Esta placa
nace del brazo y sirve de soporte
para la preparación.
SISTEMA MECANICO
• Revólver porta-objetivos:
Elemento giratorio que
contiene los objetivos y que
permite disponer, al girar, del
objetivo deseado.
SISTEMA MECANICO
•Porta-oculares: Es el
extremo superior del
tubo que soporta los
oculares y los objetivos.
Sobre él se disponen los
oculares del
microscopio.
SISTEMA MECANICO
• Carro: Dispositivo que permite
desplazar la preparación o la
muestra por la platina.
Incorpora dos escalas tipo
nonius, una longitudinal y otra
transversal que permitan
establecer la posición exacta
de cualquier zona de la
preparación.
TIPOS DE MICROSCOPIOS
• Microscopio óptico:
Es un tipo de microscopio que
utiliza una combinación de lentes
dentro de un tubo para maximizar
la imagen de pequeños objetos.
Los microscopios ópticos son
antiguos y simples de utilizar y
fabricar.
MICROSCOPIO COMPUESTO
Es la evolución del anterior,
consiste en un tubo y sus lentes
se encuentran en el objetivo y
ocular que estos a su vez son un
grupo de lentes sobrepuestas,
formando la imagen. Además
poseen un cabezal giratorio el
cual permite el cambio de
varios tipos de objetivos con el
fin de lograr una mejor imagen
y aumento.
MICROSCOPIO INVERTIDO
• Esto microscopios tienen una
configuración totalmente opuesta a la
del microscopio vertical. La muestra es
iluminada desde la parte superior y los
elementos ópticos se encuentran
debajo la platina. Con este tipo de
microscopio es posible observar
muestras colocadas en el fondo de un
recipiente. Esto es muy útil para
mantenerlas hidratadas y poder así
observar muestras vivas y procesos
biológicos que duran días.
MICROSCOPIO DIGITAL
• Es similar al compuesto pero tiene una
cámara CCD adjunta y está
conectada a un LCD, o a una
pantalla de computadora. Un
microscopio digital usualmente no
tiene ocular para ver los objetos
directamente. El tipo trinocular de los
microscopios digitales posee oculares
además de la posibilidad de montar
una cámara, que será un microscopio
USB.
MICROSCOPIOS DE FLUORESCENCIA
O FOSFORESCENCIA
son aquellos que utilizan la fluorescencia o
fosforescencia para generar una imagen
de la muestra, lo cual nos permite observar
sustancias que emiten luz propia o cuando
se aplica un reactivo o tinción especifico
que permite esta iluminación. Para ello la
muestra es habitualmente iluminada con
una lámpara xenón o con una lámpara de
vapor de mercurio. Estos microscopios
incorporan además filtros de luz para aislar
la luz correspondiente a la muestra.
MICROSCOPIO DE LUZ
POLARIZADA
Es conocido como microscopio
petrográfico. Este microscopio es
en realidad un tipo de microscopio
óptico al que se la han añadido
dos polarizadores. Esto significa que
la onda de luz utilizada para
observar la muestra tiene una
dirección de oscilación concreta.
Este tipo de microscopio es muy útil
para observar estructuras cristalinas
de rocas y minerales.
MICROSCOPIO ESTEREOSCOPIO
Este permite observar la muestra
de forma tridimensional. Estos
microscopios están equipados
siempre con dos oculares. La
imagen de la muestra que llega
a cada ocular es ligeramente
distinta de modo que cuando se
combinan se consigue el efecto
Los microscopios estereoscópicos 3D. Este efecto no podría
son muy utilizados en aplicaciones conseguirse si la muestra se
donde debe manipularse la observara con un solo ocular. Por
eso siempre son binocular o
muestra mientras se observa. Por trinocular.
ejemplo para el montaje de
circuitos o relojes.
MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE
FASES:
En este tipo de microscopio, utiliza el
efecto del viaje distintas velocidades de
la luz dependiendo del medio de
propagación. Esta propiedad es utilizada
ya que la luz atraviesa la muestra con
distintas velocidades en distintas
secciones. Este efecto es amplificado
para generar la imagen de la muestra.
Mediante esta técnica no hace falta
utilizar tintes y, por lo tanto, pueden
observarse células vivas.
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO:
Es una técnica de microscopía capaz de
producir imágenes de alta resolución de la
superficie de una muestra, utilizando las
interacciones electrón-materia. Utiliza un
haz de electrones en lugar de un haz de luz
para formar una imagen. El haz de
electrones es disparado por un cañón en el
sistema y barre la superficie de la muestra,
en respuesta esta última emite partículas
que son detectadas por una serie de
sensores que son un grupo de
electro-imanes que miden la intensidad de
electrones devueltos, esto permite generar
una imagen 3D de la muestra.
MANEJO DEL MICROSCOPIO
ÓPTICO
Ajustar el asiento a una altura que permita observar a través de los
oculares sin esfuerzo
La ergonomía en el laboratorio es importante para evitar la fatiga.
Hacer una pausa para la vista. Se recomienda una pausa cada 20
minutos mirar a unos 6 metros de distancia durante 20 segundos.
Mantener las lentes de alcance limpias y la luz a una intensidad
adecuada.
Ajustar la altura de la silla para mantener una postura correcta y
para que los hombros y el cuello se encuentren en una posición
neutra.
Situar el microscopio lo más cerca y alto posible para mantener la
cabeza en una posición vertical o utilizar aparatos de diseño
ergonómico
• Enchufar el microscopio óptico a la red eléctrica y encender el
sistema de iluminación.
• Ajustar los oculares a la distancia Inter pupilar.
• Elección del objetivo. Para un correcto enfoque de la
preparación, es aconsejable empezar con objetivos más
pequeños, enfocar con ellos y luego elegir el objetivo necesario.
Adecuar condensador (si es móvil) y
diafragma a las necesidades de la
preparación. Si es una preparación en
fresco las necesidades serán muy
distintas a si es una preparación para el
uso del objetivo de inmersión
• Colocar la preparación en la platina, centrándola en la zona a observar.
• Si se va a hacer uso del objetivo de inmersión, hay que colocar una gotita
de aceite de inmersión en la preparación. Ésta debe estar previamente
teñida y/o fijada.

Preparar el enfoque. Sin mirar a través de los


oculares, desplazaremos la platina con el
tornillo macrométrico a la posición más
cercana posible del objetivo. Si usamos
objetivos secos no contactaremos con ellos,
en cambio, si usamos el objetivo de inmersión
tendremos que contactar ligeramente
entrando en contacto directo con el aceite
de inmersión.
• Enfocar la preparación mirando por los
oculares. Para ello nos serviremos de los
tornillos macrométrico y micrométrico.
Primeros usaremos el macro para localizar la
posición de enfoque, visualizando la imagen
de la preparación. Y finalmente usaremos el
micro para hacer el ajuste fino del enfoque y
poder visualizar correctamente la muestra.
• Observación de las distintas partes de la
preparación moviendo ésta sobre la platina
ayudándonos de los tornillos del carro.
MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO
ÓPTICO
• Finalmente, se realizarán las operaciones de mantenimiento pertinentes
antes de guardar el microscopio óptico tras su uso.
• Limpiar las lentes con una dilución de alcohol- éter, especialmente si se ha
utilizado aceite de inmersión, o limpiarlo con papel lente.
• Bajar la platina y disminuir la intensidad lumínica antes de apagarlo.
• Desenchufar el microscopio y enrollar el cable alrededor de los oculares.
• Cubrir el microscopio óptico para que no se adhieran a el partículas de
polvo
• Moverlo con delicadeza y depositarlo en lugar seguro, con suavidad, para
evitar que se descalibren sus componentes, ya que se trata de un aparato
de mucha precisión.

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