El Microscopio

El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son

demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el
primero que se inventó es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico
que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del
objeto y que funciona por refracción.

El primer microscopio fue inventado, por una casualidad en experimentos con

lentes, lo que sucedió de similar manera pocos años después con el telescopio de
Hans Lippershey (1608). Entre 1590 y 1600, el óptico holandés Zacharías Janssen
(1580 - 1638) inventó un microscopio con una especie de tubo con lentes en sus
extremos, de 8 cm de largo soportado por tres delfines de bronce; pero se
obtenían imágenes borrosas a causa de las lentes de mala calidad. Estos
primeros microscopios aumentaban la imagen 200 veces.  Estos microscopios
ópticos no permiten agrandar la imagen más de 2000 veces. En la actualidad los
de efecto túnel los amplían 100 millones de veces.

A mediados del siglo xvii un holandés Anton van Leeuwenhoek, observó por
primera vez los glóbulos rojos y descubrió que el ser rey como tenía
espermatozoides. Durante su vida no reveló sus mercados secretos y a su muerte
26 de sus aparatos fueron cedidos a la Royal Society de Londres, en 1723.

A principios de los años 1930 se había alcanzado el límite teórico para los
microscopios ópticos, no consiguiendo éstos aumentos superiores a 500X o
1000X. Sin embargo, existía un deseo científico de observar los detalles de las
estructuras celulares (núcleo, mitocondria, etc.).
Partes Del Microscopio. – Existe gran variedad de microscopios, pero los
dividiremos en dos grupos, que son: los microscopios ópticos y microscopios
electrónicos.

El microscopio óptico está conformado por tres sistemas:

El sistema mecánico. - Constituido por una serie de piezas en las que van
instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque. El sistema
mecánico lo conforman:

 Brazo: es la parte donde se sujetan las pinzas, el carro, el tubo del

microscopio y el revólver. Además, sirve para trasladar el microscopio de un
lugar a otro.

 Base o pie: es una pieza que proporciona estabilidad y sirve de soporte a

todas las partes del microscopio.

 Platina: es una pieza metálica cuadrada que tiene en su centro una

abertura circular por la que pasará la luz del sistema de iluminación. Allí se
coloca el portaobjetos con la muestra a observar.

 Pinzas de sujeción: parte mecánica que sirve para sujetar la preparación.

La mayoría de los microscopios modernos tienen las pinzas adosadas a un
carro con dos tornillos que permiten un avance longitudinal y transversa de
la preparación.

 Tornillo macrométrico: permite hacer un movimiento rápido hacia arriba o

hacia abajo el tubo o la platina, y se utiliza para localizar la imagen a
observar.

 Tornillo micrométrico: parte mecánica de movimiento giratorio que nos

permite colocar en posición cualquiera de los objetivos que se encuentran
en él.

 Tubo: para mecánica que proporciona sostén a los oculares y objetivos.

 Revolver: es el sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos, y

que rota para poder utilizar uno u otro, alineándolos con el ocular.

El sistema óptico. - Que comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal

manera que producen el aumento de las imágenes que se observan a través de
ellas. El sistema óptico y conforman:

 Ocular: se localiza en la parte superior del tubo ocular y son las lentes que
captan y amplían la imagen formada en los objetivos. Los primeros
microscopios eran monoculares, es decir, que poseían una sola lente. Los
microscopios actuales poseen dos oculares, uno para cada ojo y se les
llama a binoculares.
  Objetivos: se encuentran incrustados en el revólver. Son unos pequeños
cilindros colocados en el revólver que proporcionan el poder de resolución
del microscopio y determinan la cantidad total de aumento. Existen 4 tipos
entre los que se encuentran:

1. La lupa (4X) que sirve para hacer observaciones a bajo aumento

2. El objetivo seco débil (10X) que se utiliza para localizar la imagen

que se va a observar.

3. El objetivo seco fuerte (40X) aumenta la imagen anterior. Para poder

observar se necesita primero acercar el objetivo al portaobjetos y
posteriormente enfocar el objetivo hasta que aparezca la imagen.

4. El objetivo de inmersión (100X) es un lente especial para observar

imágenes tan pequeñas como las bacterias. Y se requiere de un
aceite de inmersión para lograr una buena observación.

El sistema de iluminación. - Que comprende a las partes del microscopio que

reflejan, transmiten y regulan la cantidad de luz necesaria para efectuar la
observación. Sistema de iluminación lo conforman:

 Condensador: es una lente de gran abertura que permite dirigir o

condensar la mayor parte de los rayos luminosos en la preparación.

 Diafragma: existe un diafragma en el condensador que elimina el exceso

de luminosidad para tener una buena iluminación del objeto a observar.

Tipos De Microscopios

Microscopio Simple. - El microscopio simple es simplemente un microscopio

formado por una sola lente de aumento que se conoce comúnmente como lupa.
Los microscopios simples o lupas están formados por una sola lente
convergente que permite alcanzar aumentos de hasta aproximadamente un factor
de 10.

 Microscopio Compuesto. - Un microscopio compuesto es un microscopio óptico

que tiene más de una lente de objetivo. Los microscopios compuestos se utilizan
especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en láminas tan
finas que se transparentan. Se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de
objetos y organismos no visibles a simple vista.

 Microscopio De Luz Ultravioleta. - La imagen en el microscopio de luz

ultravioleta depende de la absorción de esa luz por las moléculas de la muestra.
La lente, que habitualmente es de vidrio es sustituida por lentes de cuarzo y la
iluminación se produce por unas lámparas de mercurio. No usa filtros y se observa
en placas fotográficas. La variedad de fluorescencia, si usa filtros, y la observación
es directa.
Microscopio De Fluorescencia. - Un microscopio de fluorescencia no es más
que es un microscopio óptico convencional al que se le adapta un accesorio
complementario de iluminación, denominado "fluorescencia".
En Bioindicación te hablaremos de este accesorio de fluorescencia
que utiliza los mismos objetivos de aumento para formar la imagen. Con este
accesorio incorporado podremos realizar una observación óptica
convencional y además una observación de contraste con fluorescencia.

Microscopio Petrográfico. - El microscopio petrográfico o de polarización se

utiliza para identificar y estimar cuantitativamente los componentes minerales de
las rocas ígneas y las rocas metamórficas.

Microscopio De Campo Oscuro. - Microscopio (dispositivo usado para agrandar

objetos pequeños) en el que los objetos se iluminan en un ángulo muy bajo desde
el costado para que el fondo aparezca oscuro y los objetos se vean con más
claridad contra ese fondo oscuro.

Microscopio De Contraste De Fases. - La microscopia de contraste de fases es

una técnica óptica que explota los cambios en el índice de refracción para producir
imágenes de alto contraste de especímenes transparentes.
Microscopio De Luz Polarizada. - Los microscopios de luz polarizada usa
polarizadores, es decir filtros que dejan pasar solamente las ondas de luz que
estén vibrando en un plano específico, para investigar las muestras ópticas de
algunas muestras o especímenes, aunque la técnica se ha utilizado
predominantemente en estudios de geología, también tiene aplicaciones
biológicas, pues algunas células contienen materiales que pueden rotar el plano
de luz polarizada.

Microscopio Confocal. - La microscopia confocal es una técnica que elimina la

luz fuera de foco en los especímenes y permite obtener imágenes 3D de
especímenes gruesos.

Microscopio Electrónico. - El microscopio electrónico es un instrumento de gran

utilidad en la investigación científica gracias a su gran poder de aumento.
Mediante este tipo de microscopio es posible aumentar imágenes de muestras
hasta niveles muy superiores a los del microscopio óptico. Microscopio
Electrónico De Transmisión. - Es un microscopio que utiliza un haz
de electrones para visualizar un objeto, debido a que la potencia amplificadora de
un microscopio óptico está limitada por la longitud de onda de la luz visible. Lo
característico de este microscopio es el uso de una muestra ultrafina y que la
imagen se obtenga de los electrones que atraviesan la muestra.
Los microscopios electrónicos de transmisión pueden disminuir un objeto hasta
un millón de veces.

Microscopio Electrónico De Barrido. -  es aquel que utiliza un haz de electrones

en lugar de un haz de luz para formar una imagen. Tiene una gran profundidad de
campo, la cual permite que se enfoque a la vez una gran parte de la muestra.
También produce imágenes de alta resolución, que significa que características
espacialmente cercanas en la muestra pueden ser examinadas a una alta
magnificación.

Microscopio De Iones En Campo. -El microscopio de iones en campo es una

variedad de microscopio que puede ser usado para visualizar la ordenación de los
átomos que forman la superficie de la punta afilada de una aguja de metal. Fue la
primera técnica con la que se consiguió resolver espacialmente átomos
individuales.

Microscopio De Sonda De Barrido. - Este microscopio electrónico utiliza una

sonda que recorre la superficie del objeto a estudiar. Su uso en investigaciones
científicas es el de regular la imagen mediante un barrido de electrones haciendo
que la imagen aumente (10.000.000 nm).

Microscopio De Efecto De Túnel. - El microscopio de efecto túnel es un

poderoso instrumento que permite visualizar superficies a escala del átomo.

Microscopio De Fuerza Atómica. - El Microscopio de fuerza atómica es un

instrumento mecano-óptico capaz de detectar fuerzas del orden de los
piconewtons. Al rastrear una muestra, es capaz de registrar continuamente su
topografía mediante una sonda o punta afilada de forma piramidal o cónica.

Uso y manejo del microscopio. – Para un manejo adecuado del microscopio

conviene seguir los siguientes pasos:

1. Si el microscopio se encuentra localizado en la mesa de trabajo del alumno,

lo primero será quitar la funda protectora. Si el alumno debe portearlo desde el
lugar de reserva hasta la mesa de trabajo, el microscopio debe cogerse, con
firmeza, desde su brazo o columna.
2. Se enciende/enchufa el microscopio a la corriente eléctrica y se regula al
máximo la intensidad de luz.
3. Con la ayuda del tornillo macrométrico, se baja la platina hasta el tope fin
de giro.
4. El objetivo de menor aumento (4x), caracterizado por su pequeño tamaño y
una línea roja, debe localizarse perpendicular a la platina. Por lo tanto, se gira
el revólver hasta localizarlo en esta posición.
5. Se coloca el portaobjetos en la platina, se fija con las pinzas y se localiza la
muestra sobre el orificio de entrada de luz.
6. A continuación, se procederá con el enfoque de la muestra. Para ello,
observando la preparación a través de la lente ocular, y girando el tornillo
macrométrico lentamente, debemos percibir correctamente la preparación a
bajo aumento. Este paso es el más importante del proceso, generando la
máxima expectación en el discente, por lo que se recomienda al docente revise
todos los enfoques generados en los microscopios que haya en ese momento
en el aula.
7. Los sistemas ópticos actuales disponen de lentes parafocales; es decir, el
cambio de lente tras el giro del revólver no implica modificación del enfoque de
la preparación. De este modo, podemos pasar a 10x y 40x, modificando
brevemente el enfoque con el giro del tornillo micrométrico.
8. Si se dispone de objetivo de inmersión 100x, previo a observar a través del
mismo, se adicionará una gota de aceite de inmersión sobre el portaobjetos
para, finalmente, modificar el enfoque con el micrométrico. Se recomienda en
este caso pasar directamente del lente objetivo 4x a la lente 100x, evitándose
que el resto de lentes pudieran tocar el aceite de inmersión. La lente que suele
sufrir mucho el uso de este reactivo debe limpiarse al finalizar la experiencia,
evitándose que los restos de aceite pudieran dañar o quedar incrustados en el
objetivo. Se recomienda la limpieza mediante el frote de la lente con una gasa
suave que porta unas gotas de xileno.
9. Para sustraer el portaobjetos tras el análisis de la preparación, se cambiará
con ayuda del revólver al objetivo de 4x y bajará la platina con ayuda
del tornillo macrométrico.
10. Como anotación final del proceso de observación de la preparación
biológica, se recomienda el uso del diafragma para modificar la entrada de luz,
con el consiguiente aumento del contraste de la muestra.