Práctica N°1. Normas de Seguridad, Reconocimiento Material Laborario y Célula.

LABORATORIO MICROBIOLOGÍA
PRÁCTICA 1: MICROSCOPÍA, RECONOCIMIENTO DE MATERIAL

DE LABORATORIO Y NORMAS DE SEGURIDAD. RECONOCIMIENTO DE CÉLULAS.
Docente: Laura Milena Rivera García
MICROSCOPÍA, RECONOCIMIENTO DE MATERIAL DE LABORATORIO Y NORMAS

DE SEGURIDAD, RECONOCIMIENTO DE CÉLULAS.
Primera parte: NORMAS DE SEGURIDAD.
Objetivos:
- Reconocer la importancia del conocimiento de las normas de seguridad en el
laboratorio de Microbiología.
Reglas de laboratorio:
1. Durante las sesiones, siempre deberá usar bata de laboratorio bien dotada, que
deberá ponerse antes de ingresar al laboratorio y quitársela cada que se retire del
mismo.
2. No deberá sacar del laboratorio ningún equipo, medios o cultivos microbianos.
3. Evitar acumulación sobre la mesa de trabajo de objetos no relacionados con la
práctica de laboratorio. Colocar todos los objetos personales en locker.
4. Se prohíbe ingerir y/o almacenar cualquier tipo de alimento o bebida dentro del
laboratorio.
5. Se prohíbe fumar, aplicarse cosméticos o tocarse la cara con las manos o algún
otro objeto. Se deberá lavar meticulosamente las manos con jabón y agua antes
de salir del laboratorio, incluso cuando salga por breves periodos de tiempo.
6. Por seguridad no deberá pipetear oralmente ningún tipo de cultivos microbianos,
esta actividad deberá realizarse con las pipetas accionadas de forma mecánica o
automática, tratando de evitar la formación de aerosoles.
7. No se admitirán visitas que distraigan la atención y pongan en riesgo la seguridad
en el trabajo que realiza.
Procedimientos de laboratorio:
1. Antes y después de cada sesión de laboratorio deberán limpiar las mesas de
trabajo con el desinfectante que se proporciona para tal fin.
2. Cuando se utilice el mechero, este deberá colocarse alejado del microscopio y
otros equipos así como de elementos inflamables.
3. Asegúrese de que los materiales de desecho u otros contaminantes sean
colocados en recipientes específicos para ello, colocados en lugares apropiados.
4. Siempre deberá dejar limpios todos los equipos utilizados (balanzas analíticas,
microscopios, autoclave, potenciómetros, campanas de flujo laminar) y reportar
cualquier irregularidad antes y después de su uso.
5. En caso de producirse algún derrame o rotura de material que puedan ocasionar
una herida u otra urgencia, deberá notificarlo, mantener la calma y seguir el
procedimiento:
FACULTAD DE INGENIERÍA
Km 5 vía a la Tebaida Ciudadela del Saber la Santa María
riveragarlaura@miugca.edu.co
a. Colocar toallas de papel sobre el material derramado para evitar su
dispersión.
b. Poner abundante solución desinfectante.
c. Dejar transcurrir 15 minutos, limpiar con otras toallas y colocarlas en los
recipientes adecuados.
Material indispensable en cada sesión de laboratorio:

1. Bata de laboratorio limpia y en buen estado.
2. El protocolo de la práctica y la bitácora.
3. Un pedazo de tela sin pelusa, toalla o limpión, tijeras, encendedor, cinta de
enmascarar, marcador indeleble.
Segunda parte: RECONOCIMIENTO MATERIAL DE LABORATORIO:
Objetivos:
- Reconocer e identificar el material de laboratorio de uso común.
MATERIALES DE USO CORRIENTE EN EL LABORATORIO

Estos son los materiales que normalmente utilizará durante el desarrollo de muchas de las
actividades en los trabajos prácticos Mediante los esquemas, podrá familiarizarse con
ellos antes de utilizarlos.
Procedimiento:
Mostrar todo el material existente de vidrio, porcelana y metal del laboratorio, indicándoles
el uso adecuado de cada uno de ellos. Se les enseñaran las normas de seguridad que se
debe aplicar en él y el manejo adecuado de los reactivos, conocimiento y normas de
seguridad en las etiquetas de los mismos.
Tercera parte: MICROSCOPÍA.

Objetivos:
- Conocer y ejercitar el correcto manejo y mantenimiento del microscopio
compuesto
- Estudiar los principios ópticos y propiedades del microscopio compuesto
Marco teórico:
La invención de dos aparatos ópticos, el telescopio y el microscopio compuesto a
mediados y finales del siglo XVI y principios del XVII, contribuyó a modificar la concepción
que el hombre tenía del mundo.
El microscopio ha permitido al hombre aprender sobre la naturaleza del mundo en el cual

vive y a familiarizarse con cosas no visibles a nuestro poder de visión, lo que ha resultado
de gran beneficio en una diversidad de disciplinas y de aplicaciones.
PARTES DEL MICROSCOPIO (fig.1)

MECÁNICA: La base es la que da soporte al microscopio y es la que se une al brazo,
este sirve como asa para sujetar y transportar el aparato. El brazo se une al tubo que está
formado por dos partes una de las
cuales, su parte superior, lleva los
lentes oculares, la parte inferior lleva
el revolver que gira y tiene atornillado
los objetivos. La platina es una
superficie plana con un orifico en el
centro por donde pasa la luz, en la
platina se coloca la muestra a
observar y se sujeta con las pinzas.
Cerca de la base se encuentra el
tornillo micrométrico o de
movimientos lentos y el macrométrico
o de movimientos rápidos. Algunos
Figura 1. Partes del microscopio
microscopios tienen separados estos
óptico
tornillos.
ÓPTICA:
Los lentes oculares están en la parte superior del tubo y es por donde se observa la
muestra. Los lentes objetivos están atornillados en el revólver y son los que están cerca
de la muestra. . Es el elemento óptico más importante, puesto que es el que produce la
imagen aumentada del objeto, esta imagen, además, la observamos invertida (el objetivo
funciona como una cámara fotográfica) de ahí que, lo que observamos a la derecha de la
preparación se encuentre realmente a la izquierda y viceversa. Los aumentos de los
objetivos vienen indicados sobre los mismos y son, para este microscopio, 4X, 10X y
40X.100X .
LUMÍNICA: Está colocada por debajo de la platina y consta de un espejo (con una cara
cóncava y una plana) que recibe los rayos luminosos y los refleja hacia la preparación a
través del condensador, la cantidad de luz que llega a la preparación se regula abriendo o
cerrando el diafragma.
MANEJO DEL MICROSCOPIO

a) Encienda la lámpara
b) Coloque el objetivo de menor aumento: se mueve el espejo hasta que el campo visual
quede uniformemente iluminado.
c) Regule la intensidad de luz con el diafragma el cual debe estar completamente abierto
para la mayoría de las observaciones.
d) Colocación de la muestra: La muestra se debe colocar en una lámina portaobjetos y
sobre esta colocar el cubreobjetos La preparación se debe colocar sobre la platina de
modo que la muestra quede en el centro de la abertura, lo cual se logra moviendo la
lámina portaobjetos por medio de los tornillos que hacen funcionar el carro del
microscopio.
e) Enfoque : Por medio del tornillo macrométrico haga descender la platina hasta la
posición más baja. Luego observando por el ocular, comience a subir lentamente la
platina hasta que la muestra se haga visible, después con el tronillo micrométrico aclare la
imagen al máximo. A continuación se hace girar el revólver (SIEMPRE HACIA LA
DERECHA) para colocar el objetivo que sigue en magnitud de aumento. Acostúmbrese a
ver con los dos ojos abiertos para evitar fatiga ocular.
MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento
en posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no
sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto
con su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma
prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas
muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el
microscopio.
5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que
queda en el objetivo con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos
recomendable). En cualquier caso se pasará el papel por la lente en un solo sentido y con
suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con
una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza,
porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su
sujeción.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico,
micrométrico, platina, revólver y condensador).
7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la
mirada a la preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar
nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está
observando a través del ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella
algún líquido, secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño
humedecido en xilol.
9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la
práctica y, al acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los
mismos.
Cuarte parte: RECONOCIMIENTO DE CÉLULAS:
OBJETIVOS
 Verificar que las células, tanto vegetales como animales, poseen tamaños y
formas variables.
 Determinar las diferencias morfológicas fundamentales entre una célula animal y
una célula vegetales.
Marco teórico:
Si se examina, con la ayuda del microscopio, una porción delgada de cualquier parte del
cuerpo de una planta o de un animal, se observará que está constituida por una serie de
compartimientos, las células.
Todas las células son básicamente muy similares ya que presentan material genético,
muchas estructuras iguales y los mismos tipos de enzimas.
En las células vegetales se observa claramente una rígida pared celular que la rodea
toda, pero las células animales carecen de ella. La célula es la unidad fundamental de
todos los seres vivos. Su examen microscópico, muestra que las células varían
considerablemente en su forma, función y tamaño.
Como ejemplo de célula vegetal utilizaremos la cebolla de huevo. Las cebollas parecen
materiales muertos pero en realidad son bulbos formados por células vivas, de los cuales
pueden crecer hojas y raíces cuando la cebolla se siembra o cuando se almacena en un
sitio húmedo. Las células que están muertas son aquellas de las capas externas.
Como modelo de célula animal observaremos las de nuestro propio cuerpo, para esto
utilizaremos las que se encuentran en la parte interna de nuestras mejillas y que hacen
parte del tejido epitelial.
Procedimiento:
1. Observación de células eucarióticas:
Las células escamosas forman parte del epitelio del revestimiento interno de la mejilla.
Son células protectoras en el sentido de que ayudan a mantener la humedad de la
cavidad oral; por la naturaleza de su función no requieren un alto grado de especialización
y además son fácilmente removibles.
Elabore un montaje húmedo de sus propias células escamosas epiteliales como se

describe a continuación:
 Coloque una pequeña gota de solución salina en al centro de una lámina.

 Con el extremo delgado de un palillo raspe suavemente el interior de su mejilla,
de abajo hacia arriba.
 Ponga el producto del raspado en la gota de la solución salina y esparza
suavemente. Fije la muestra.
 Coloree con una gota de azul de metileno.
 Cúbrala con la laminilla.
Observe la preparación al microscopio a pequeño aumento (10X) y posteriormente con el

objetivo de 100x (usar aceite de inmersión), localice las bacterias que aparecen como
pequeñas estructuras puntiformes y las células epiteliales. Elabore un esquema con el
objetivo de mayor aumento y resalte la presencia de la membrana celular, núcleo y
citoplasma.
En esta presentación también observara células procariotas que se encuentran

normalmente en la cavidad bucal como son las bacterias, distinga entre formas redondas
(cocos) y alargadas (bacilos).
2. Observación de células vegetales:
Cara interna de una hoja de bulbo de cebolla: Tome un de los trocitos y con las pinzas
levante cuidadosamente la capa más externa, que es la epidermis, extiéndala, sin
invertirla en una lámina portaobjetos. Coloque una gota de Lugol cúbrala con la laminilla.
Observe las preparaciones inicialmente en pequeño aumento, no será fácil notar el

núcleo, las propiedades ópticas de los organelos son similares, por lo tanto se hace difícil
distinguirlos unos de otros. Sin embargo, las propiedades químicas son diferentes, su
afinidad por determinados colorantes varia; así, si usted al observar la preparación
coloreada con Lugol podrá diferenciar estructuras tales como núcleo y citoplasma.
Pulpa de tomate:
Tome una muestra de tomate. Obtenga un trozo de pulpa de unos 2mm de espesor,
deposítelo en el centro de un portaobjetos. Adicione una gota de tionina, colocar encima
la laminilla cubreobjetos y comprimir suavemente. Observar en los aumentos e identificar
cromoplastos.
Papa:
Haga un corte fino de una papa con ayuda de una cuchilla de afeitar. En una caja de petri
con agua, enjuague el corte para eliminar el exceso de almidón contenido en los tejidos
internos. Realice un montaje húmedo. Observe el aspecto de las células a menor
aumento. Añada, por el borde de la laminilla, una gota de Lugol y visualice las células a
mayor aumento, con su pared celular y gránulos de almidón o amiloplastos.
Materiales:
Haga una lista de todos los materiales usados en esta práctica.
Contenido que debe tener el informe:

El informe debe contener:
- Título.
- Resumen.
- Palabras clave.
- Introducción.
- Materiales y métodos.
- Resultados y análisis de resultados.
- Bibliografía.
Bibliografía a consultar o de apoyo:
- Michael T. Madigan; John M. Martinko; Jack Parker (2015): Brock Biología de los
Microorganismos , Ed.Pearson Prentice Hall
- Brown C.M.. Campbell I., Priest F.G. (1998). Introducción a la biotecnología”. Ed Acribia
- Smith J.E., (1996): Biotechnology (3ª edición). Cambridge: Cambridge University Press

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PRÁCTICA 1: MICROSCOPÍA, RECONOCIMIENTO DE MATERIAL

MICROSCOPÍA, RECONOCIMIENTO DE MATERIAL DE LABORATORIO Y NORMAS

Primera parte: NORMAS DE SEGURIDAD.

Material indispensable en cada sesión de laboratorio:

Segunda parte: RECONOCIMIENTO MATERIAL DE LABORATORIO:

MATERIALES DE USO CORRIENTE EN EL LABORATORIO

Tercera parte: MICROSCOPÍA.

El microscopio ha permitido al hombre aprender sobre la naturaleza del mundo en el cual

PARTES DEL MICROSCOPIO (fig.1)

MANEJO DEL MICROSCOPIO

Cuarte parte: RECONOCIMIENTO DE CÉLULAS:

Elabore un montaje húmedo de sus propias células escamosas epiteliales como se

 Coloque una pequeña gota de solución salina en al centro de una lámina.

Observe la preparación al microscopio a pequeño aumento (10X) y posteriormente con el

En esta presentación también observara células procariotas que se encuentran

2. Observación de células vegetales:

Observe las preparaciones inicialmente en pequeño aumento, no será fácil notar el

Contenido que debe tener el informe:

Bibliografía a consultar o de apoyo:

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