INMUNOLOGIA

DEL VIH - SIDA

Lic TM Yovel Ivan Bustamante Cuadros
Inmunologia y Serodiagnostico
(semana 8)

6NLA21
HISTORIA
 Orígenes: África Central.
1959 Primero casos notificados en África
(Zaire) y Europa.
 1 968 Norteamérica.
 1 981 CDC, publica el primer
reportaje sobre un tipo raro de
neumonía: "Pneumocistis Carinii”.
1982 Julio, se le da un nombre al
nuevo flagelo: AIDS.
HISTORIA
1983 Se observa en microscopio
electrónico y se aisla el virus: LAV. (Francia).
1984 Se anuncia descubrimiento de
HTVL 3, causante de SIDA (EE.UU).
*Meses después se demuestra que es el mismo.
1985 Descubren secuencia genética.
Primera prueba anticuerpos para SIDA en EE.UU.
 1986 Se identifica variante HIV – 2.
OMS: 1º de Diciembre.
 HISTORIA
1987 Se acepta
primer fármaco: AZT
1989 AZT
acompañada de otras
drogas.
 2 0 0 1 Muere 1º niño
con SIDA: Nkosi
Johnson.
 ANTECEDENTES HISTÓRICOS
• El descubrimiento de la infección por el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV).
1981

• El primer aislamiento del HIV se logró por Barré-Sinoussi y colaboradores en el Instituto Pasteur de París.
1983

• Se podía a través de pruebas analizar qué sangre contenía o no el VIH.

1985 • Se contabilizan casos en todo el mundo.

• Se crean diferentes organismos para tratar de contener la rápida propagación del SIDA.
• La Administración de Alimentos y Medicamentos estadounidense (FDA), autorizó el primer fármaco para tratar el SIDA.
1987

• Logra estar disponible la primera terapia triple antirretroviral.

1996
 DEFINICION
El SIDA (Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida) es la forma mas
grave de una infección provocada por el VIH.

El Virus de la Inmunodeficiencia Humana Enfermedades

(VIH) infecta las células del sistema oportunistas
inmunitario y las destruye o trastorna su
funcionamiento, lo que acarrea el
deterioro progresivo de dicho sistema y
acaba produciendo una deficiencia
inmunitaria.
Retrovirus!!!!
 Poseen un ciclo exclusivo de replicación, en el
cual la información genética se codifica en el
RNA en vez del DNA.
 L a información en forma de RNA se transcribe a
DNA en la célula hospedadora.
 Sometidos a una estimulación ambiental
selectiva pueden modificar rápidamente su
propio genoma por recombinación y mutación
Familia Retroviridae
 Tr e s subfamilias
 Oncovirinae.
-El mas importante en los seres humanos es el virus linfotrópico de
células T humanas (human T cell lynphotropic virus, HTLV) de tipo
I.
 Lentivirinae.
-El mas importante es el Virus de la inmunodeficiencia humana.
 Spumavirinae.
-Denominados asi por el aspecto anatomopatologico de las células
infectadas.
Virus VIH
Virus VIH
 G e n e s estructurales: gag, pol y env.
 p o l : Provee virus funciones enzimáticas y codificatres
enzimas:
 Proteasa (p10).
 Transcriptasa reversa (p66/p51).
 Integrasa (p32).
 e n v : Poliproteína (gp 160)
 Gp 120 (externa)
 Gp 41 (transmembrana)
 EPIDEMIOLOGÍA MUNDIAL
36,77 millones
de personas
que viven con
SIDA
Los enormes progresos en la lucha contra el
SIDA de los últimos 15 años han servido de
20,9 millones
inspiración para alcanzar un compromiso
de personas
mundial de poner fin a la epidemia para que viven con
VIH bajo
2030. tratamiento
1,8 millones
nuevas
infecciones por
VIH
EPIDEMIOLOGIA MUNDIAL
 La transmisión del VIH
Existen tres vas importantes:
1.-Transmisión sexual: Responsable de más de 75% de
VIH.
a) Inoculación directa en los vasos sanguíneos rotos portraumatismo
b) En las células dendríticas o células CD4+ en la mucosa.

(potenciadas por coexistencia de ETS asociadas con ulceración genital; sífilis,

chancro blando, herpes).
Formas de Contagio
 Transmisión Sexual:
 Semen y otros fluidos vaginales tienealta
concentración de VIH.
 Mucosas con heridas o excoriaciones.
 La transmisión del VIH
2.-Transmisión parenteral: Ocurre en tres grupos.
a) Drogadictos por vía intravenosa.

(transmite VIH por actividad

sexual)
 La transmisión del VIH
b) Hemofílicos que recibían concentrado del factorVIII.
En disminución:
*Factor VIII recombinante
*Detección en sangre y plasmadonados
*Criterios de pureza en el factorVIII
*Cribado de donantes sobre la base de la historia
Existe Riesgo 1 por 2,000,000 Detección del Ag p24 asociado conVIH
c) Receptores aleatorios de transfusiones sanguíneas.

-Patologia :Robbins -Medicina interna: Harrison

-Inmunologia: Janeway, Jr
 La transmisión del VIH
3.-La transmisión madre a hijo: Causa mas importanteen
SIDA pediátrico
1)En el útero por diseminación
transplacentaria.
 2)Durante el parto a través del canal delparto
infectado.
3)Tras el nacimiento, por la lactancia materna. EU
el intraparto y periparto son los modos mas habituales Tasa
Perinatal en EU era del 25% (relacionada con carga vírica
materna elevada, recuentos bajos T CD4+ y
corioamnionitis)

Terapéutica antirretrovírica ha disminuido las tasas en EU.

Transmisión maternofetal y del lactante

 L a probabilidad de transmisión del VIH desde una madre al

lactante o al feto en ausencia de tratamiento
antirretrovírico profiláctico para la madre durante el
embarazo, la dilatación y el parto y para el feto después del
nacimiento oscila entre el 15 y el 25% en los países
industrializados y entre el 25 y el 35 % en los países en
desarrollo.
Riesgo de adquirir la infección por VIH/SIDA

Riesgo por 10,000 exposiciones

Transfusión de sangre 9,000
Compartir jeringas 67
HSH (receptor) 50
Exposición percutanea 30
R. Heterosexual (mujer) 10
HSH (activo) 6.5
R. Heterosexual (hombre) 5
Sexo oral (receptor) 1
Sexo oral (activo) 0.5
 RIESGO DE SEROCONVERSION
POR TIPO DE EXPOSICION
Seroc./Expuest Riesgo/100 Exp.
Tipo exposición
Punción aguja lumen 2/365 0.55 (0.07-1.96)
lleno sangre
Herida instrum. cortante 1/341 0.29 (0.01-1.62)

Contaminación piel y 1/398 0.25 (0.01-1.40)

mucosas
Herida percutánea 9/3628 0.2 (0.1-0.5)

Lesión aguja con lumen 2/1269 0.16 (0.02-0.57)

Contaminación de mucosas 1/1007 0.1 (0.01-0.50)

Contacto con piel con daño 0/480 0 (0-0.77)

previo
Punción con aguja 0/840 0 (0-0.44)
parcialmente llena de
sangre
 La transmisión del VIH
•No puede transmitirse por contacto personal causal

•Prácticamente imposible por picaduras de insectos.

•Trabajadores sanitarios, existe un riesgo definido.

•Seroconversión del 0.3% tras punción accidental con aguja o

exposición de piel no intacta a sangre infectada.
Terapia antirretrovírica administrada 24 y 48 hrs.
reduce el riesgo de infección hasta 8 veces.
 N o se ha tenido conocimiento de ningún caso de
transmisión del VIH al realizar tatuajes o perforar
alguna parte del cuerpo, aunque se ha transmitido
el virus de la hepatitis B a través de algunas de
estas prácticas
 S e ha documentado un caso de transmisión del
VIH por acupuntura
 E l contacto casual con besos con la boca cerrada o
"beso social" no representa un riesgo de
transmisión del VIH.
¿Cómo se previene?
 U s a r preservativo o hacer que lousen.
 Prácticas sexuales prudentes.
 Evitar la penetración vaginal o anal.
 N o comparta sus agujas y jeringas con nadie.
 Abandonar las drogas o en su defecto su uso por vía
parenteral (inyectadas).
 N o recibir ninguna sesión de acupuntura ni realizarse
ningún tatuaje si las condiciones de esterilidad del
material empleado ofrece pocas garantías.
 N o donar sangre si en los tres meses anteriores se ha
estado expuesto a un comportamiento o situación de
riesgo.
 El uso constante y cuidadoso de los condones de látex o
poliuretano cuando se realiza el acto sexual -por vía
vaginal, anal u oral- puede reducir notablemente el riesgo
de contraer o transmitir enfermedades de transmisión
sexual, incluyendo el VIH.
 LINEA DEL TIEMPO EN SIDA

Inicio
formal Primera
Educación Relación Infección
Sexual Sexual VIH Diagnostico MUERTE

10 años 15 años 23 años 28 años 30 - 32 años

ETIOLOGIA
 Estructura del VIH
El núcleo esta rodeado por una proteína de matriz: p17
localizada por debajo de la cubierta del virión.
En la cubierta vírica hay dos glucoproteínas víricas: gp120
y gp41criticas para la infección de cels por el VIH.
El genoma de RNA del VIH-1 contiene los genes: gag,
pol y env, q codifican varias proteínas víricas.
gag y pol se traducen en precursores proteicos, los
cuales deben de ser escindidos por la proteasa vírica
para dar lugar a las proteínas maduras
 Estructura del VIH

El VIH contiene otros genes accesorios:

tat, rev, vif, nef, vpr y vpu.
Que regulan la síntesis y la organización de partículas
víricas infecciosas del y la patogenicidad del virus.
tat: Critico para la replicación del virus, produciendo
un aumento en 1.000 veces la trascripción de los genes
víricos.
 Funciones de otras proteínas accesorias
Estructura del VIH
PATOGENIA
El VIH puede infectar
diferentes tipos de
células, aunque su
objetivo suelen ser
células de la serie blanca
como linfocitos CD4,
macrófagos y linfocitos T
cooperadores (o helper).
Patogenia de la infección por VIH y del SIDA
Ciclo vital del VIH:

CD4  Receptor de alta afinidad para el VIH

*tropismo selectivo ante células T CD4+ y otras células CD4+.

Gp. 120 se liga a moléculas (correceptores) de la

superficie celular para penetrar la cel.
*CCR5 y CXCR4 (receptores de quimiocina)
 Entrada del virus a la célula
1. Fijación
2. Unión al correceptor
3. Fusión.

• FIJACIÓN:

El HIV-1 se fija a la molécula CD4 de la

superficie celular por medio de la
proteína gp120.
•Unión al correceptor :
gp120 sufre un cambio conformacional que le
permite unirse al correceptor de la
quimioquina (CCR5(Macrofago) o CXCR4(LT)).
Si no hay unión a CD4, Env no puede
interactuar con un correceptor y no se
produce la infección.
•Fusión:
La cubierta del VIH se fusiona con la membrana
celular mediante un cambio estructural en la
proteína gp41.
Patogenia de la infección por VIH y del SIDA
Ciclo vital del VIH:
Patogenia de la infección por VIH y del SIDA
Ciclo vital del VIH:
CICLO DE TRANSMISIÓN
Mecanismo de la inmunodeficiencia de las cel T en
la infección por VIH
El proceso de
replicación viral,
se lleva a cabo
en
aproximadamen
te 24 horas
PROGRESIÓN DE LA INFECCIÓN POR VIH

1- Fase: Infección
primaria o aguda

2- Fase: Asintomática o
de latencia

3- Fase: Sintomática o
SIDA
 MANIFESTACIONES CLINICAS
Recuento de células TCD4+
Mayor de 500 celulas/uL.
Entre 200 y 499 celulas/uL.
Entre 100 y 99 celulas/uL.
Entre 50 y 99 celulas/uL
Menor de 50 celulas/uL.
Complicaciones infecciosas Complicaciones no infecciosas
Síndrome retroviral agudo. Linfadenopatia persistente
Vaginitis candidasica. generalizada.
Sindrome de Guillain-Ban-e.
La tuberculosis
Tuberculosis pulmonar. Linfoma Hodgkin. se cobró la vida
Herpes zoster. Purpura trombocitopenica de 400 000
Sarcoma de Kaposi. idiopatica. personas
infectadas con
Neumonia por Pneumocystis jirovecii. Neuropatia periferica.
el VIH en 2016
Tuberculosis miliar Demencia asociada al HIV.
Cardiomiopatia.
Toxoplasmosis.
Criptococosis.
Criptosporidiosis cronica.
Infeccion diseminada por el complejo Linfoma primario del sistema
Mycobacterium avium. nervioso central.
 DIAGNÓSTICO
La infección por el HIV se puede diagnosticar mediante
pruebas virológicas o serológicas.

VIROLOGICAS: SEROLOGICAS:
-Aislamiento -ELISA
viral -Western Blot
-PCR
TRATAMIENTO Y CONTROL

▪ No hay cura para la infección por el

VIH
▪ Pero un buen tratamiento con
antirretrovíricos seguido al pie de la
letra aminora la evolución de la
infección hasta casi detenerla.
▪ Apoyo psicosocial
▪ Apoyo nutricional
El valor de CD4 es el recuento de linfocitos que tienen el marcador de CD4
Primer marcador : ARN-VIH. Paralelamente se puede
detectar el ADN proviral.a los pocos días de producida
la infeccion
Antígeno p24 aparece en suero a los 11-13 días. Dura
mes y medio. Se detecta con pruebas moleculares
Anticuerpos detectables a las 3-4 semanas post-
infección ( media: 22 días).pruebas de ELISA
Disminución de anticuerpos contra p24: progresión de
la enfermedad.
“Periodo de ventana”: 1 4 - 2 1 días
Anticuerpos de clase IgM: respuesta poco
consistente en adultos infectados.
Anticuerpos de clase IgM e IgA: estatus inmune
del recién nacido bajo sospecha de estar
infectado.
 EL DIAGNÓSTICO DE LA INFECCIÓN POR
HIV
“No existe ninguna manifestación clínica que sea
característica de la infección VIH o del SIDA y,
aunque la presencia de alguna de ellas puedan
sugerir en un contexto determinado la presencia
de la infección, no es posible establecer un
diagnóstico clínico de la enfermedad por lo que
éste solo se puede establecer de un modo
definitivo por técnicas de laboratorio” (1)

( 1) SIDA, 1996-2000, REVISIÓN, Septiembre 1998

• Es voluntario no se impone
• Es confidencial (se usan códigos para identificación
de muestras)
• Consejería pre y post test puede darse antes,
después de obtener la muestra o durante el tiempo
de espera.
• Obtención de consentimiento informado
• La entrega del resultado debe hacerse de forma
individual, por personal capacitado.
• Se debe realizar prueba confirmatoria si es reactiva.
• Canalizar a los casos positivos a los servicios de
atención integral
 Diagnóstico de infección por el VIH en adultos y
recién nacido

Tamizaje en donantes de sangre

Vigilancia epidemiológica

Investigación
 • Cultivo viral – aislamiento a partir de
MÉTODOS
cel linfocitarias
DIRECTOS • Antigenemia (P24) ELISA o p.r.
• Detección de acidos nucleicos: DNA
provírico o ARN vírico-PCR

• Detección de anticuerpos
específicos (pruebas de tamizaje
MÉTODOS y confirmatorias)
INDIRECTOS
• Investigación de la inmunidad
celular específica
 • ELISA, Aglutinación,
PRUEBAS DE InmunoDOT, Inmunofiltr ación,
TAMIZAJE
Inmunocromatografía

• IFI, Western Blot,

PRUEBAS RIPA,Inmunoensayo en línea,
CONFIRMATORIAS
etc.
 PRUEBAS DE ELISA

ELISA DE PRIMERA GENERACIÓN

• Método : Indirecto
• Antígeno: lisado de células infectadas con
virus- línea cel. Molvi 4 y H9
• Conjugado: anticuerpos policlonales
Tenia antígenos del CMH que generaba los falsos
positivos
Fase
sólida

Antígeno Anti-
Muestra del inmunoglobulina
paciente humana policlonal
conjugada
 ELISA DE SEGUNDA GENERACIÓN

• Método: Indirecto
• Antígeno:Péptidos recombinantes/sintéticos de
VIH-1 y VIH-2
• Conjugado: anticuerpos monoclonales
Fase
sólida

Antígeno Anti-
Muestra del inmunoglobulina
paciente humana monoclonal
conjugada
 ELISA DE TERCERA GENERACIÓN
• Método: Sándwich
• Antígeno :Proteínas
recombinantes y/o péptidos
sintéticos VIH 1 /2 y VIH 1
Grupo O
• Detecta : Anticuerpos
específicos IgG, IgM e IgA
• Sensibilidad 99.6-100 %.
• Especificidad 98.5-100%
 ELISA DE CUARTA GENERACIÓN
• Detección simultánea de antígeno y anticuerpo
• Péptidos recombinantes/sintéticos de VIH-1 y VIH-2
y VIH-1“O”, y anticuerpos para detectar el antígeno p24
• Sensibilidad: 98% a 99.87%.
• Especificidad: 98% a 100%.

Anti-p24 Anti-p24
monoclonal monoclonal
conjugada
peroxidasa
p24

Muestra del paciente

Antígeno
recombinante Anti-inmunoglobulina
humana monoclonal
conjugada peroxidasa
CARACTERÍSTICAS DE LAS GENERACIONES DE ELISAS
TIEMPO DE APARICIÓN DE MARCADORES
ESPECÍFICOS DE INFECCIÓN POR VIH
▪ Fallos en el principio técnico
▪ Fallos en el proceso de fabricación del equipo
diagnóstico
▪ Infección por tipos de VIH no detectables
▪ Inmunosupresión
▪ Periodo "ventana"
▪ Respuestas anómalas ante la infección VIH
▪ Terapia inmunosupresora prolongada
▪ Trasplante de médula ósea
▪ Disfunciones de linfocitos B
▪ Plasmaféresis, exanguineotrasfusión
▪ Neoplasias
▪ Errores de extracción o identificación
▪ Personas con Ac anti HLA-DR4, DQw3
▪ Enfermedades reumatoideas
▪ Polimiositis
▪ Lupus eritematoso
▪ Multitrasfundidos
▪ Trasplantados renales
▪ Multíparas
▪ Hemodializados
▪ Fracaso renal crónico
▪ Síndrome de Stevens-Johnson
▪ Administración previa de inmunoglobulinas
▪ Sueros postvacunales (gripe, hepatitis B)
▪ Infecciones agudas por virus DNA
▪ Enfermedad hepática alcohólica grave
▪ Cirrosis primaria biliar
▪ Colangitis esclerosante
▪ Pacientes con parasitosis
▪ Pacientes con discrasias sanguíneas congénitas
▪ Adicción a drogas por vía parenteral
 D.I.A INMUNOFILTRACIÓN

PRUEBAS
RÁPIDAS

I.C.F (SALIVA) INMUNOCROMATOGRAFIA

▪ Rapidez (< 30 minutos).
▪ Evaluar pocas muestras simultáneamente.
▪ Requerimiento mínimo de equipos y reactivos.
▪ No requiere capacitación especializada.
▪ Fácil interpretación del resultado.
▪ Conservación de pruebas a temperatura
ambiente.

▪ Muestras: suero, plasma, sangre entera, saliva,

orina, etc.
• Mejorar la oportunidad en el diagnóstico en los
grupos con mayor vulnerabilidad,
• Fortalecer la prevención y control del VIH/SIDA,
aumentando la efectividad del acceso al
tratamiento, y con ello evitar nuevas infecciones.
• Acceso oportuno a la prueba de detección;
utilizarlas como herramienta para informar y
sensibilizar.
• Facilitar su aplicación en poblaciones como:,
Hombres que tienen, sexo con otros Hombres,
(HSH) trabajadoras y/o trabajadores del sexo
comercial (TSC), usuaria o usuario de drogas
inyectables (UDIS), personas privadas de su
libertad y en personas con padecimientos
asociados como tuberculosis ,hepatitis B y C.
• Desarrollar intervenciones de prevención
específicas.
 ¿Qué se espera al ofrecer Pruebas Rápidas de
detección de VIH?

• Ofrecer a todas las mujeres la oportunidad de

conocer su estado serológico.
• En los casos positivos recibir oportunamente el
tratamiento antirretroviral para prevenir la
transmisión perinatal.
• Evitar el nacimiento de niños infectados con
VIH/SIDA.
EVOLUCIÓN DE LAS PRUEBAS RÁPIDAS

ICF 3ra Gen

ICF 4ta Gen

 INMUNOCROMAT
OGRAFIA DE 3ra
Gen
Inmunoensayo de flujo lateral
en cassette para la detección y
diferenciación simultánea de
anticuerpos de HIV-1 e HIV-2
(IgG, IgM, IgA) en suero
humano, plasma o sangre
completa.

NEGATIVO POSITIVO
 INMUNOCROMATOGRAFIA DE 4ta Gen

Inmunoensayo de flujo lateral

en cassette para la detección
cualitativa de anticuerpos
(IgG, IgM, IgA) anti-HIV-1
(incluyendo O) y anti HIV-2 y
antígeno p24 de HIV-1 en
suero, plasma o sangre
completa.

NEGATIVO POSITIVO
Western blot
Inmunoensayos en línea
Inmunofluorescencia indirecta (IFI)
Radioinmunoprecipitación (RIPA)
Pruebas de detección de Ag. circulantes
Síntesis de anticuerpos “in vitro”
Cultivo viral
Detección de ácidos nucleicos virales
 WESTERN BLOT

Western
blot
PRUEBA DE WESTERN BLOT SECUENCIADA EN UN PACIENTE CON VIH
ORGANIZACIÓN CRITERIO
ASTPHLD Dos cualesquiera: p24, gp41, gp120/gp160
CDC

USFDA p24, p31y gp41 ó gp120/gp160

Cruz Roja Por lo menos 3 bandas, 1 de cada grupo

Norteamericana producto de genes: GAG, POL y ENV
CRSS Por lo menos 2 bandas:
P24 ó p31; gp41 ó gp120/gp160
OMS Por lo menos dos bandas de la
envoltura
Prueba de confirmación de
infección por el VIH.
Sustrato: células infectadas (H9) pegadas en la
placa
Control: células no infectadas
Tanto el sustrato como el control están pegadas en
la lamina en una proporción de 50 – 50%
Conjugado: Isotiosanato de fluoroceina POSITIVO
Lectura: fluorescencia citoplasmática.
POSITIO: MENOR IGUAL AL 50%
DE FLUORECENSIA
Requiere personal con experiencia.
Infraestructura: Requiere de microscopio de
fluorescencia.
INESPECÍFICO
 Detección de antígeno
p24 soluble mediante
pruebas de ELISA.
En sobrenadantes de cultivos es
mas sensible que la prueba de
trancriptasa reversa (50-
100 pg/mL).
Positividad: antigenemia 50-
60% SIDA
10% Asintomáticos
LA SENSIBILIDAD DEPENDE
DEL ESTADIO CLINICO
 Algoritmo Convencional para el diagnóstico
serológico de la infección por VIH
No Reactivo
informar Técnicas de Tamizaje Laboratorio Periférico
Banco de Sangre
Reactivo

No Reactivo 2 Técnicas de Tamizaje Laboratorio de Referencia

(-/-) Distinta Configuración antigénica
informar

Reactivo Discordante
(+/+) (+/-)

WESTERN BLOT

INFORMAR Positivo * Indeterminado Negativo

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en 30 días