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Diagnóstico de Canino
leptospirosis

Krystle L. Reagan, DVM, PhDa, *, Jane E. Sykes, BVSc(Hons), PhDb

PALABRAS CLAVE

Leptospirosis Diagnóstico Perro Enfermedad zoonótica

PUNTOS CLAVE

La leptospirosis es una importante enfermedad zoonótica que puede tener un buen pronóstico siempre que
se identifique precozmente y se trate adecuadamente.
Varias pruebas de diagnóstico están disponibles para los veterinarios, incluyendo serología y diagnóstico
molecular, cada una con sus propios beneficios y limitaciones.
Una combinación de pruebas de diagnóstico, incluida la reacción en cadena de la polimerasa, la prueba de
aglutinación microscópica y/o el diagnóstico rápido en el punto de atención, puede proporcionar al médico el
diagnóstico general más rápido y preciso.

INTRODUCCIÓN

La leptospirosis es una zoonosis emergente de distribución mundial causada por la bacteria

espiroqueta móvil del género Leptospira. Estas bacterias aeróbicas son organismos delgados
en forma de espiral con extremos ganchudos. Aunque hay más de 20 especies reconocidas
de Leptospira, los agentes causantes de la enfermedad en perros son principalmente de las
especies L. interrogans y L. kirschneri. Estas especies se clasifican además en más de 250
serovares de leptospiras patógenas según la serología del antígeno O de superficie. Los
serovares estrechamente relacionados se agrupan en serogrupos, de los cuales se han
establecido aproximadamente 20. Las leptospiras también se diferencian cada vez más en
genotipos con base en métodos moleculares, como el análisis de repeticiones en tándem de
número variable o la secuenciación del genoma.1,2
Los genotipos individuales de Leptospira se han adaptado para tener un huésped reservorio,
más comúnmente roedores, que se infectan y mantienen un estado de portador. Los
huéspedes reservorio albergan leptospiras en los túbulos renales y arrojan leptospiras en su
contaminación del medio ambiente. Los huéspedes incidentales se infectan por contacto con la orina.

Conflictos de intereses: el Dr. JE Sykes recibe honorarios y financiación para investigación de Boehringer
Ingelheim, Zoetis e IDEXX Laboratories.
Los autores no tienen nada que revelar.
a
Veterinary Medical Teaching Hospital, Universidad de California, 1 Shields Ave Davis, CA 95616, b EE.
UU.; Departamento de Medicina y Epidemiología, Universidad de California, 1 Shields Ave Davis,
CA 95616, EE. UU. * Autor de correspondencia.

Dirección de correo electrónico: kreagan@ucdavis.edu

Vet Clin Small Anim - (2019) --- https://

doi.org/10.1016/j.cvsm.2019.02.008 vetsmall.theclinics.com
0195-5616/19/ª 2019 Elsevier Inc. Todos los derechos reservados.
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2 Reagan y Sykes

de un huésped reservorio o de agua o suelo contaminados. Las infecciones de huéspedes incidentales,

como perros o personas, con leptospiras patógenas pueden conducir al síndrome clínico de leptospirosis.
Se sabe que los perros son huéspedes reservorios de L. interrogans sv Canicola; por lo tanto, puede
esperarse una excreción prolongada de leptospiras en la orina si no se instaura un tratamiento.3–6
Cada vez se reconoce más que los perros pueden excretar otras serovariedades o especies de
Leptospira en ausencia de signos clínicos, lo que genera preocupación por la transmisión zoonótica.3,
7–10
Aunque las leptospiras no se replican fuera del huésped y se inactivan fácilmente en condiciones
adversas, las serovariedades patogénicas pueden permanecer viables en el agua o el suelo durante
semanas.11 Una amplia variedad de mamíferos pueden infectarse con serovariedades patógenas de
Leptospira cuando se exponen a agua o suelo contaminados. La leptospirosis se describe tanto en
perros como en gatos; sin embargo, los gatos parecen más resistentes a la enfermedad.12,13
Determinar qué serotipos son la causa principal de la enfermedad en los perros es difícil porque la
mayoría de los estudios informan hallazgos serológicos que pueden no representar el serotipo
infectante.14 Anticuerpos contra los serovares Grippotyphosa, Bratislava, Canicola, Icterohae
morrhagiae , Autumnalis y Pomona se observan con frecuencia y se ha demostrado experimentalmente
que los serovares Cani cola, Pomona, Bratislava, Icterohaemorrhagiae y Grippotyphosa inducen la
enfermedad en perros. enfermedad en perros.

Las leptospiras pueden penetrar superficies mucosas intactas o abrasiones en la piel, lo que lleva a
una fase bacteriémica, que dura hasta 10 días.21 Las bacterias pueden entonces invadir el riñón y el
hígado, entre otros órganos, y las leptospiras se excretan en la orina. 17 Los anticuerpos IgM
antileptospira se detectan en la primera semana de la infección y aumentan rápidamente al comienzo
de la infección.22 Los anticuerpos IgG antileptospira aumentan hasta niveles detectables
aproximadamente 2 semanas después de la infección.22 Estos principios pueden ayudar a guiar al
veterinario sobre la prueba de diagnóstico y la muestra apropiadas. (s) para presentar en función del
momento del examen en relación con el inicio de la enfermedad.
El diagnóstico precoz de la leptospirosis en perros es ideal debido tanto a la naturaleza zoonótica de
la enfermedad como a la necesidad de iniciar una intervención adecuada en los perros infectados. Un
obstáculo importante para lograr un diagnóstico son los signos clínicos a menudo inespecíficos
asociados con la leptospirosis, que varían en gravedad desde la ausencia de signos clínicos hasta una
enfermedad que limita la vida. Los veterinarios deben sospechar leptospirosis en perros con factores de
riesgo significativos o signos clínicos consistentes y anomalías clinicopatológicas. Los factores de riesgo
que se han asociado con la leptospirosis incluyen la exposición al agua, el sexo masculino y los perros
de pastoreo o de trabajo en algunos estudios23,24. Otros estudios han encontrado una seroprevalencia
similar en perros de razas grandes y pequeñas de todos los grupos de edad y sexos, lo que indica que
todas las razas de perros están en riesgo de exposición.15,25 Un análisis de árbol potenciado por
aprendizaje automático basado en la ubicación investigó la probabilidad de que los perros dieran
positivo para leptospirosis en función de los títulos de MAT e identificó áreas de los Estados Unidos con mayor riesg
exposición. Aunque hubo una amplia variación geográfica en el riesgo pronosticado, pareció haber
asociaciones con factores ambientales, que incluyen áreas residenciales con casas en lotes grandes,
tierras boscosas de hoja caduca, aumento de las precipitaciones y temperatura.26 La leptospirosis en
perros puede manifestarse con signos de vasculitis, lesión renal y/o lesión hepática, que son variables
según la cepa infectante y la respuesta inmunitaria del huésped. Otras presentaciones clínicas
pueden incluir fiebre, hemorragia pulmonar, uveítis, miositis e insuficiencia reproductiva. Si se identifica
cualquiera de estos factores, se deben realizar pruebas de diagnóstico para la leptospirosis e iniciar el
tratamiento. Cuando la enfermedad se identifica a tiempo y se instaura el tratamiento adecuado, las
tasas de supervivencia se acercan al 80 %.27,28
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Diagnóstico de la leptospirosis canina 3

Varias pruebas diagnósticas están disponibles para la identificación de la leptospirosis en perros y

generalmente se clasifican en 2 grupos; los que detectan la bacteria directamente y
los que detectan anticuerpos dirigidos a la bacteria. El primer grupo incluye directos
visualización de las leptospiras mediante cultivo, microscopía de campo oscuro o detección de ADN bacteriano
mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Estas pruebas diagnósticas son las más
útil al principio del curso de la enfermedad y antes del uso de fármacos antimicrobianos cuando
el número de bacterias es más alto en la sangre y la orina. El segundo grupo son las pruebas.
están diseñados para detectar anticuerpos contra Leptospira, tradicionalmente utilizando la prueba de
aglutinación microscópica (MAT). Debido a que los títulos de MAT pueden ser bajos o negativos inicialmente,
Se recomiendan pruebas agudas y de convalecencia. En esta revisión, se analizan las pruebas diagnósticas
disponibles para la leptospirosis en perros, incluidas las recomendaciones para
momento de la recolección de especímenes y los especímenes óptimos para ser enviados al
laboratorio.

ANOMALÍAS CLÍNICOPATOLÓGICAS

Recuento completo de células sanguíneas (CBC), bioquímica sérica y anomalías en el análisis de orina
se han descrito en perros con leptospirosis, aunque ninguno de estos cambios proporciona un diagnóstico
definitivo. Los hallazgos bioquímicos séricos más comunes son aquellos
compatible con daño renal, incluyendo azotemia e hiperfosfatemia, y tiene
se ha informado en el 80% al 100% de los casos.27,29–31 Se observa un aumento de la actividad de las
enzimas hepáticas séricas en aproximadamente la mitad de los perros con leptospirosis, pero rara vez se observa.
en ausencia aparente de daño renal.27,29,31–33 Otros cambios bioquímicos que
se han informado incluyen hipoalbuminemia en hasta la mitad de los perros y anormalidades electrolíticas,
incluyendo hiponatremia e hipocloremia.33,34 En casos de oligoanuria,
los valores de potasio sérico pueden, paradójicamente, permanecer normales debido a la inhibición de
sodio-potasio-ATPasa por endotoxinas bacterianas.35,36 Creatinina quinasa elevada
ha sido reportada en el 43% de los casos de leptospirosis asociada a miositis.31 A
El CBC puede revelar trombocitopenia, que se ha informado en 20% a 50% de
perros con leptospirosis.27,29–31,34 Otras anormalidades reportadas incluyen anemia no regenerativa,
neutrofilia y/o linfopenia.34 Hallazgos de análisis de orina que han sido
observados incluyen hipostenuria o isotenuria, proteinuria y/o glucosuria.29,30,32,33

IMÁGENES

Se ha informado afectación pulmonar en perros con leptospirosis y anomalías en la radiografía torácica hasta
en el 70 % de los casos.33,37 Las anomalías radiográficas se pueden observar con o sin signos clínicos de
enfermedad respiratoria .
angustia. Más comúnmente, se observa un patrón intersticial de leve a moderado. En raras ocasiones, se
observa un patrón nodular intersticial a alveolar severo en asociación con lepstospiral.
síndrome de hemorragia pulmonar.29,31,37
La ecografía abdominal puede revelar cambios inespecíficos asociados con la lesión renal
en el 85% al 100% de los perros, incluyendo uno o más de los siguientes: aumento de la ecogenicidad
cortical, renomegalia, pielectasia leve, signo del borde medular o derrame perirrenal.38,39
Otros cambios ecográficos pueden incluir cambios hepáticos, incluyendo parénquima hipoecogénico,
hepatomegalia y evidencia de sedimento biliar.39

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO POR IDENTIFICACIÓN DIRECTA DE LEPTOSPIRAS

Microscopía de campo oscuro

La visualización directa de leptospiras en sangre y orina de perros infectados ha sido

descrito utilizando microscopía de campo oscuro.40,41 Debido al pequeño tamaño del individuo
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4 Reagan y Sykes

bacterias, la microscopía de luz convencional no permite la visualización del organismo. La microscopía de campo
oscuro se puede realizar en muestras de sangre u orina. Esta técnica requiere equipo especial y entrenamiento
para ser confiable; sin embargo, con entrenamiento
personal, un resultado positivo puede conducir a un diagnóstico rápido. La sensibilidad es baja debido a
varios factores, incluida la corta duración de la leptospiremia o antimicrobiano anterior
farmacoterapia.42 Pueden producirse resultados falsos positivos cuando los desechos se confunden con
espiroquetas.42 Debido a estas limitaciones, este método no se utiliza de forma rutinaria en la práctica clínica.
diagnóstico de leptospirosis.

Cultivo bacteriano

El cultivo de leptospiras permite la detección de leptospiras, pero es técnicamente difícil. Las agujas de lepto
requieren medios de crecimiento especiales que contengan vitaminas B y ácidos grasos de cadena larga,
más comúnmente medio de Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris. Las culturas pueden ser
realizado en tejido fresco, sangre u orina. Se recomienda que la sangre sea enviada
en los primeros 10 días de signos y orina a partir de entonces. Los especímenes deben ser transportados en
medio de crecimiento especial a los laboratorios de referencia que ofrecen esta prueba diagnóstica.
Debido a que la fecha de la infección generalmente no se conoce, se deben enviar ambas muestras para aumentar
la sensibilidad de la prueba. Los tiempos de incubación del cultivo de hasta varios meses son
necesarios para identificar el crecimiento bacteriano, lo que hace que esta prueba sea menos útil para obtener un resultado clínico.
diagnóstico. Sin embargo, es una herramienta útil para identificar serovares infectantes y puede proporcionar
valiosa información epidemiológica. Aunque el cultivo de leptospiras es muy específico,
la sensibilidad es bastante baja, lo que puede estar relacionado con la bacteriemia de bajo nivel, la administración de
antibióticos antes de la recolección de muestras, o dificultades técnicas asociadas con la
ensayo.43–45

Biopsia de tejido

Las leptospiras se pueden identificar en secciones de tejido, como biopsias de riñón, cuando se tiñen
con tinciones de Giemsa o de plata.42 Para una identificación más definitiva, se han validado protocolos de
inmunohistoquímica e inmunofluorescencia.46 También se utilizan ensayos de hibridación fluorescente in situ para
la detección de ADN de leptospira en secciones de tejido.
disponible.47 Estas pruebas se realizan con mayor frecuencia en muestras de tejido obtenidas en
necropsia en lugar de como una prueba de diagnóstico antemortem y puede mejorar la comprensión de la patogenia
de la leptospirosis.

Reacción en cadena de la polimerasa

Las herramientas de diagnóstico molecular, como la PCR, están ampliamente disponibles a través de los
laboratorios de diagnóstico comerciales para el diagnóstico de la leptospirosis. Estas pruebas son capaces
para detectar ADN leptospiral antes del desarrollo de una respuesta serológica a la infección,
haciéndolos una valiosa herramienta de diagnóstico temprano en el curso de la enfermedad.10,45 Se han
desarrollado múltiples ensayos dirigidos a diferentes genes conservados dentro de patógenos
Serovar Leptospira genomas.3,4,48 Los ensayos de PCR cuantitativa o en tiempo real han
mejoran la sensibilidad del ensayo y son menos propensos a la contaminación en comparación con los ensayos de
PCR convencionales (punto final).49–51
Los ensayos disponibles comercialmente se dirigen a regiones conservadas de patógenos
leptospiras, por lo que no se puede determinar el serotipo infectante cuando se obtiene un resultado positivo.
obtenido. Aunque esto puede no tener un impacto en la gestión de casos individuales,
conocer el serovar infectante mejora la comprensión de la epidemiología
de leptospirosis en perros y tiene implicaciones para el diseño de vacunas. algo de molecular
Los ensayos utilizados en entornos de investigación han demostrado ser prometedores para diferenciar
entre serovares y genotipos; sin embargo, estos ensayos aún no son ampliamente
disponible.7,52
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Diagnóstico de la leptospirosis canina 5

La PCR en el entorno clínico se realiza con mayor frecuencia en muestras de sangre u orina, pero
también se pueden enviar muestras de tejido, como tejido renal o pulmonar, para PCR. Al igual que
con el cultivo, se recomienda enviar sangre completa para PCR dentro de los primeros 10 días de la
enfermedad y orina después de la primera semana de la enfermedad, correspondiente a las fases
bacteriémica y bacteriúrica de la enfermedad. Si se desconoce la cronología de la infección, se pueden
enviar ambas muestras para aumentar la sensibilidad. Se pueden encontrar resultados falsos negativos
si hay cargas bacterianas bajas como resultado de la fase de la enfermedad, la respuesta inmunitaria
o la administración de fármacos antimicrobianos. Los resultados positivos en un perro con signos
clínicos consistentes y cambios clinicopatológicos sugieren leptospirosis. La vacunación reciente
interfiere con la detección de leptospiras por PCR en tiempo real.53
En perros clínicamente sanos, los resultados positivos de la PCR podrían indicar un estado de
portador crónico. Las encuestas de perros aparentemente sanos han informado que el ADN de
leptospiras se puede detectar a diferentes velocidades, según la ubicación geográfica. Algunas áreas
tienen una baja prevalencia de resultados positivos de PCR en orina, incluidos 100 perros de refugio
de Indiana que no dieron positivo; 1,5% de los perros en Baviera, Alemania; y 4,4 % de los perros en
Nueva Caledonia.6,8,51 Otras áreas tienen tasas de informes de prevalencia mucho más altas: 11,3
% en Egipto, 10,5 % en Brasil y 26,6 % en Irán, en perros sin signos clínicos.9,54 ,55 Los resultados
positivos de PCR deben interpretarse a la luz de los signos clínicos, especialmente en áreas
hiperendémicas.3 Las pruebas disponibles comercialmente a través de laboratorios de referencia
varían y solo hay pocos datos disponibles sobre el rendimiento de estos ensayos. Un ensayo de
PCR realizado en sangre tuvo una sensibilidad del 86 % en los primeros 6 días de infección, pero
disminuyó significativamente después de 7 días de infección al 34 %. La especificidad del mismo
ensayo fue del 99%.56 Se justifican más estudios para determinar la sensibilidad clínica y la
especificidad de estos ensayos.

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO MEDIANTE ENSAYOS SEROLÓGICOS

Prueba de aglutinación microscópica

La serología en fase aguda y convaleciente mediante el MAT se ha utilizado tradicionalmente como

método de referencia para el diagnóstico serológico de la leptospirosis17 . Esta prueba, desarrollada
hace más de un siglo, utiliza diluciones seriadas de suero y las reacciona con cultivos vivos de
leptospiras42. se informa la dilución más alta para la cual se aglutina el 50% de las espiras de lepto,
según se determina mediante microscopía de campo oscuro.
El MAT se lleva a cabo utilizando un panel (normalmente de 6 a 8) de serotipos que se cree que
representan los serogrupos más comunes que infectan a los perros. El MAT ha sido bien validado en
pacientes caninos; sin embargo, puede haber una variación considerable en los resultados entre
diferentes laboratorios. En 1 estudio, se enviaron muestras convalecientes de perros naturalmente
infectados a 5 laboratorios de diagnóstico veterinario. Los resultados mostraron concordancia entre los
laboratorios en solo 3/11 muestras.57 Se recomienda que los veterinarios utilicen un laboratorio de
referencia que participe en un programa de control de calidad supervisado por la Sociedad Internacional
de Leptospirosis para garantizar resultados de MAT de alta calidad.17

Tanto las muestras agudas como las convalecientes (recolectadas 7 a 14 días después) deben
analizarse y un aumento de 4 veces en los títulos de anticuerpos para serovariedades individuales es
compatible con infección activa. Los resultados negativos de MAT no son infrecuentes durante la
primera semana de infección, y la sensibilidad de un solo MAT agudo es solo del 50%; sin embargo,
esto mejora al 100 % cuando se evalúan muestras pareadas, con una especificidad que oscila entre el
70 % y el 100 %.58,59 La respuesta serológica puede atenuarse mediante la administración de
fármacos antimicrobianos, pero las experiencias clínicas de los autores sugieren que, por lo general,
un 4 todavía se consigue un aumento de dos veces en el título.
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6 Reagan y Sykes

La interpretación de títulos positivos debe tener en cuenta la exposición previa y el estado de vacunación. La
vigilancia serológica muestra tasas positivas variables en perros, con hasta
la mitad con resultados MAT positivos (1:100) en regiones endémicas.55,60,61 Títulos de anticuerpos de
mayor o igual a 1:400 a los serogrupos no vacunales estuvieron presentes en 3.5% (7/200)
de perros sanos que vivían en Alemania.8 Además, en una población de perros sanos no vacunados en los
Estados Unidos, se encontraron títulos de MAT mayores o iguales a 1:400.
se observó en el 21 % (61/291), y 2 perros tenían títulos mayores o iguales a 1:6400.14 La vacunación puede
inducir MAT positivos tanto para los serogrupos vacunales como para los no vacunales.60
Los títulos de anticuerpos generalmente disminuyen 4 meses después de la vacunación; sin embargo, tienen
detectado hasta 1 año después de la vacunación.60,62 Aunque la mayoría de los perros solo desarrollan
una elevación modesta en los títulos de MAT después de la vacunación, títulos mayores o iguales a
1:600 después de la vacunación.62 Estos estudios tomados en conjunto indican que aunque un solo título alto
de MAT puede ser sugestivo de leptospirosis cuando
signos clínicos consistentes están presentes, el diagnóstico no puede ser confirmado sin una
muestra convaleciente.
Los resultados de MAT se informan como títulos contra cada serovariedad analizada. el anticuerpo
respuesta a cada serovar no predice el serovar infectante, porque serologic
se producen reacciones cruzadas entre los serovares. A menudo se observa una elevación paradójica en los
títulos de un serogrupo no infeccioso debido a la amplia reactividad cruzada de los anticuerpos en la fase aguda.
etapas de la infección, que luego se vuelve más específica para el serogrupo a medida que avanza la
infección.14 La mayoría de los paneles MAT disponibles en el mercado contienen solo de 6 a 8 serovares que
representan los serogrupos más comúnmente encontrados en una región; sin embargo, el
La Organización Mundial de la Salud recomienda un panel que contiene 19 serovariedades patogénicas
ser usado. El uso de paneles limitados disminuye los requisitos técnicos, pero puede reducir la sensibilidad si el
serotipo infectante no está en el panel.

Ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas

Se han desarrollado varios ELISA para detectar anticuerpos específicos en perros

con leptospirosis, pero hasta hace poco estas pruebas no estaban ampliamente disponibles. Tradicional
Los ELISA son pruebas de diagnóstico rápido que tienen el beneficio adicional de no requerir la
Cultivos vivos de Leptospira necesarios para el MAT. Sin embargo, requieren especialistas
capacitación y equipo para realizar y ejecutar diagnósticos veterinarios comerciales
laboratorios.
Se han diseñado ensayos para detectar IgM, IgG o ambos tipos de anticuerpos en perros.63–68
La IgG se produce en grandes cantidades solo después de aproximadamente 1 semana a 3 semanas de
infección. Los ensayos que detectan IgM pueden identificar una respuesta de anticuerpos durante la primera semana de
infección cuando el MAT tiene baja sensibilidad.58,67
Se han diseñado ELISA que detectan anticuerpos contra la célula bacteriana completa
y a proteínas antigénicas recombinantes individuales de la superficie bacteriana para aumentar
especificidad La proteína LipL32 ha sido de particular interés porque se expresa
solo por leptospiras patógenas y se conserva en todos los serogrupos.69,70
El desempeño de los ELISA tradicionales ha sido variable y, debido a la menor sensibilidad general en
comparación con el MAT, su uso no se ha recomendado previamente. Pruebas
que se puede realizar rápidamente con alta sensibilidad al principio de la infección puede ser útil,
sin embargo, antes de recibir los resultados de los ensayos MAT o PCR.

Ensayos de diagnóstico en el punto de atención

Recientemente se han realizado ensayos serológicos de flujo lateral en el punto de atención (al lado de la jaula).
disponible comercialmente para la detección de anticuerpos específicos de Leptospira en perros.63,65
Estas pruebas de diagnóstico están diseñadas para realizarse en la clínica y proporcionar resultados rápidos.
al practicante.
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Diagnóstico de la leptospirosis canina 7

SNAP Lepto (IDEXX Laboratories, Westbrook, ME, EUA) es un ELISA de punto de

atención que detecta anticuerpos contra LipL32, una proteína de membrana abundante de
Lepto spira. Cuando se comparó el desempeño de este ensayo con MAT en perros que
tenían suero enviado a un laboratorio de referencia para el diagnóstico de leptospirosis, hubo
acuerdo entre los 2 en el 83,2% de los casos clínicos cuando los títulos de MAT fueron
mayores o iguales a 1:800.65 Cuando se usó para probar anticuerpos en perros sin sospecha
de leptospirosis, la especificidad fue del 96 % en comparación con MAT.65 En un entorno
clínico, el SNAP Lepto fue positivo en 15/22 (68 %) de los casos que finalmente se confirmó
que tenían leptospirosis e identificó incorrectamente a 20/131 (15 %) como positivos cuando
finalmente se les diagnosticó otras causas de la enfermedad.68 Se detectaron anticuerpos
resultantes de la vacunación contra Leptospira con SNAP Lepto en 5/21 (24 %) de los perros
52 semanas después de la vacunación y hasta 1 año después de la vacunación.65
El Witness Lepto (Zoetis, Parsippany-Troy Hills, NJ, EUA) es un ensayo de flujo lateral que
detecta anticuerpos IgM utilizando extractos de células completas de L kirschneri sv Grippoty phosa
y L interrogans sv Bratislava.63,64 Cuando se evalúa en un grupo de perros sospechosos de tener
leptospirosis en Francia, la sensibilidad fue del 98 % y la especificidad del 93,5 % en comparación
con el diagnóstico a través de MAT.63 Un estudio adicional de casos clínicos agudos en Alemania
encontró que Witness Lepto tenía una sensibilidad del 75 % mientras que un único MAT agudo
tenía una sensibilidad del 24 % en perros a los que finalmente se les diagnosticó leptospirosis
sobre la base de un aumento de 4 veces o más en el título de MAT o un resultado de PCR
positivo.64 Se notificó una reacción cruzada con anticuerpos producidos en respuesta a la
vacunación en 6/25 (24 %) perros vacunados no infectados 12 semanas después de la vacunación.64
Dos informes han comparado el rendimiento de los ensayos de punto de atención SNAP
Lepto y Witness Lepto. En un estudio de 89 perros sospechosos de tener leptospirosis en
Italia, se compararon Witness Lepto, SNAP Lepto y un solo MAT agudo. El diagnóstico de
leptospirosis se basó en un título único de MAT mayor o igual a 1:800 o un aumento de 4
veces en los títulos entre MAT agudo y convaleciente. La sensibilidad para el Testigo Lepto
fue del 78,9 % y para el SNAP Lepto fue del 86,5 %, mientras que un único MAT agudo fue
del 70,3 % en comparación con el diagnóstico final. Los valores de especificidad fueron 100
%, 97,6 % y 75 % para el MAT agudo simple, Witness Lepto y SNAP Lepto, respectivamente.71
esta población. En otro estudio de perros que fueron infectados experimentalmente con
Leptospira, la prueba Witness Lepto detectó anticuerpos en todos los perros el día 10, MAT
detectó anticuerpos en todos los perros el día 14 y SNAP Lepto detectó anticuerpos en solo
3/32 perros en 2 semanas después de la infección.72 Las diferencias en los resultados entre
estos 2 estudios podrían estar relacionadas con las diferencias en el momento de la muestra
después de la infección o las diferencias en la infección de los serovares.

Se han desarrollado otras pruebas ELISA rápidas comercialmente disponibles para la

medicina humana y se han probado en poblaciones caninas con resultados prometedores . .

ESTRATEGIA DE DIAGNÓSTICO

Ninguna prueba diagnóstica descrita en este artículo es adecuada en todos los entornos clínicos;
cada uno tiene sus propias ventajas y limitaciones; por lo tanto, se ha sugerido el uso de una
combinación de pruebas. Los médicos deben considerar el momento en que se sospecha la
infección al recolectar muestras, para optimizar el rendimiento de la prueba de diagnóstico. En un
entorno clínico, el momento exacto de la infección no suele conocerse, por lo que puede estar
justificado el uso de múltiples pruebas en paralelo o en serie para garantizar un diagnóstico rápido
y preciso. En 1 estudio, una combinación de PCR y MAT aguda y convaleciente mejoró significativamente
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8 Reagan y Sykes

sensibilidad.7 Recomendaciones de consenso para el diagnóstico de leptospirosis en perros

con signos clínicos apropiados incluyen PCR de sangre y orina antes de la administración de la terapia con antibióticos
y títulos de MAT emparejados.17,73 Pruebas de diagnóstico en jaula
se puede utilizar para proporcionar información valiosa mientras se esperan los resultados de PCR o
títulos de MAT.

PRUEBAS DE DIAGNÓSTICO DEL FUTURO

Muchos esfuerzos de investigación se han centrado en el desarrollo de la próxima generación

de herramientas diagnósticas para la leptospirosis que son rápidas y precisas, son positivas en el
las primeras etapas de la enfermedad, diferenciar entre infección natural y vacunación, puede
identificar hasta el nivel de serovariedad y no suponer una carga técnica. Resultados prometedores
se han obtenido utilizando ensayos de PCR isotérmicos, que eliminan los termocicladores especiales necesarios para
realizar la PCR. Estos métodos se pueden completar en tan solo
1 hora, lo que los convierte en herramientas valiosas para las pruebas de diagnóstico en el punto de atención.74 Una de esas pruebas
está disponible comercialmente para perros, PCRun Canine Pathogenic Leptospira Molecular
Kit de detección (Biogal – Galed Labs, Kibbutz Galed, Israel). Los resultados preliminares muestran
este ensayo se correlaciona estrechamente con los ensayos de PCR en tiempo real en un laboratorio de diagnóstico
tanto para muestras de sangre como de orina.75 Otros ensayos que se han investigado en
humanos incluyen ensayos de aglutinación de microcápsulas, que tienen una sensibilidad similar a
el MAT para algunas serovariedades, pero no puede detectar anticuerpos contra una gama más amplia de
serovariedades.76 También se utilizan varios ensayos de aglutinación en tarjeta de látex y ensayos de flujo lateral.
disponible comercialmente.74 Los diagnósticos que utilizan la orina como sustrato son atractivos para los pequeños
practicantes de animales, porque la orina típicamente es fácil de obtener de los perros. Un punto-ELISA
que detecta la proteína Leptospira en la orina de personas con leptospirosis se encontró sensible y confiable.77 Estos
ensayos han mostrado cierta promesa en la medicina humana, pero
aún no se han validado para su uso en perros y gatos.

RESUMEN

Un diagnóstico de leptospirosis puede ser desafiante y depende de la etapa de la enfermedad y de factores como la
vacunación reciente, la prevalencia de exposición subclínica y la diseminación dentro de diferentes regiones
geográficas. Las pruebas diagnósticas
revisadas en este artículo tienen características que son ventajosas en algunas situaciones pero no en otras. El uso
de una combinación de pruebas de diagnóstico puede aumentar las posibilidades de obtener un diagnóstico rápido y
preciso. Se necesita investigación para desarrollar
ensayos de diagnóstico rápidos y sensibles que pueden identificar los serovares infecciosos con precisión para
ayudar a guiar a los profesionales y proporcionar información epidemiológica valiosa que puede ser
se utilizan para diseñar vacunas, que generalmente se supone que proporcionan
proteccion.

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