SEMINARIO FISIOLOGÍA

DIURESIS
AH2 mesa 3 - 2018
 PRESENTACIÓN

Se realizaron dos actividades experimentales con el objetivo de

analizar muestras de orina en dos instancias, aplicando 2
diseños y maniobras experimentales diferentes.
 Anatomía general del riñón

Corte: distinción corteza y

médula (nefronas, vasos y
ner vios).
- Médula: pirámides hasta
uréter.
- Corteza: glomérulos (redes
capilares).

Unidad funcional: nefrona.

Función: regular aspectos de

los líquidos corporales (entre
ellos osmolalidad , volumen,
Líquidos corporales: líquido
equilibrio ácido-básico).
intracelular y líquido que baña
las células (medio interno:
líquido vascular e intersticial)
 Nefrona

Unidad funcional: nefrona

- Porción glomerular (filtración de

líquidos desde el plasma al túbulo).

- Porción tubular (modificación del

volumen filtrado y la composición
mediante reabsorción y/o secreción
de sustancias):
a. Túbulo contorneado proximal
b. Asa de Henle (ramas descendente
y ascendente; tipos de asas).
c. Túbulo contorneado distal
d. Túbulo colector
Barrera de filtración glomerular

Está en el glomérulo renal.

- Células endoteliales de los

capilares glomerulares
- Membrana basal
- Pedicelos .
 Producción de orina y diuresis

La producción de orina se da por el ultrafiltrado de plasma,
la secreción y reabsorción de sustancias.

Principales funciones del riñón a través de la producción de

orina:
1. Mantenimiento del volumen y composición de los líquidos
corporales
2. Eliminación de sustancias del metabolismo que en el caso
de acumularse producirían toxicidad y fallas

Diuresis (V): volumen de orina

excretado por unidad de
V = Vol (ml)/t (min)
tiempo.
 Concentración – dilución en el riñón
(Mecanismos para regular volumen y osmolalidad cuando el balance de NaCl y H2O
están alterados)
5

ADH:
ADH hormona peptídica liberada si aumenta 1% la
osmolalidad o disminuye 10% la volemia.
• Mecanismo de acción.
 Concentraciones y volumen

Concentración: soluto disuelto en solución
- Molaridad y molalidad.
- Osmoles o miliosmoles/L: expresa atracción por el agua
según número de partículas en las que se divide el soluto (1
osm = 1 mol x n° de par tículas)

To n i c i d a d : osmolalidad de la solución comparada con la

osmolalidad del plasma
 Clearance como método de estudio de la fisiología renal

Aclaramiento (clearance):
(clearance)
volumen de plasma del que Clx=Ux . V / Px
una sustancia X es depurada Donde:
completamente por unidad de Ux=concentración urinaria de x
Px=concentración plasmática de x
tiempo. V=diuresis

• Indicador de la función renal (detecta anormalidades en

etapas tempranas de una enfermedad y su monitoreo).

• Puede utilizarse para medir la velocidad de filtrado

glomerular (VFG) y determinar si una sustancia es
reabsorbida o secretada a lo largo de nefrona.
 Clearance osmolar y de agua libre

Clearance osmolar:
osmolar volumen de plasma que se libera de
sustancias osmóticamente activas en una unidad de tiempo.

Cosm = Uosm . V/Posm

Clearance de agua libre:

libre volumen de agua libre de solutos que
se elimina en la orina por unidad de tiempo (Es la cantidad de agua
libre de solutos osmóticamente activos, que debe añadirse o extraerse de la
orina para que sea isosmótica con respecto al plasma por unidad de tiempo).

CH2O = V - Cosm
Donde:
Uosm = osmolalidad de la orina
Posm = osmolalidad del plasma
 OBJETIVOS

Objetivo general: evidenciar el papel de la función renal en el

mantenimiento del equilibrio del medio interno.

Objetivos específicos:

1. Identificar las alteraciones presentes en 2 muestras de orina y

sus potenciales causas. Familiarizarse con el empleo de las
tirillas reactivas para el análisis de la orina y evaluar
ventajas/desventajas de esta herramienta.
 ACTIVIDAD
EXPERIMENTAL 1
 MATERIALES

ACTIVIDAD EXPERIMENTAL 1

Tiras reactivas para análisis de orina *1

Escala cromática correspondiente al tipo de tira reactiva usado

Tubos plásticos con tapa y forrados con papel aluminio

Cronómetro

Muestras de soluciones problema
 *1Tiras reactivas:
reactivas Escala cromática:
análisis químico de la referencia
orina, que abarca pH,
comparativa para la
presencia de proteínas,
muestra obtenida.
glucosa, cetonas,
hemoglobina, bilirrubina,
urobilinógeno, nitritos,
leucocitos y densidad.

Limitaciones: sustancias con coloración anormal en

la orina afectan la lectura, son fotosensibles, no dan
un valor preciso sino un rango.
METODOLOGÍA Y PROCEDIMIENTO ACT. 1
 Metodología y procedimiento

1. Sumergir la tira reactiva en la muestra problema

(temperatura ambiente) durante 1 segundo.

2. Eliminar el exceso de solución

3. Leer el resultado comparando cuidadosamente las

áreas reactivas con la escala cromática respetando
los tiempos de las tiras. Anotar resultados.

4. Plantear y discutir los posibles mecanismos

involucrados en la génesis de los resultados
encontrados y/o la localización renal del posible
daño.
 RESULTADOS
ACTIVIDAD
EXPERIMENTAL 1
 ACTIVIDAD EXPERIMENTAL 1

Valor normal Solución 1 Solución 2

Leucocitos negativo negativo negativo

Nitritos negativo negativo negativo
<16µmol/l o
SOL. Urobilinogeno 1.0mg/dl normal normal
2 <0.3g/l o
Proteínas 30mg/dl normal 30mg/dl
pH 4.5 – 8.0 6.0 6.0
<100µg/l o
Sangre 0.010mg/dl normal normal
Densidad
SOL.
Específica 1.001-1.035 normal normal
1 Cetonas negativo negativo negativo
Bilirrubina negativo negativo negativvo
<1.67mmol/l o
Glucosa 30mg/dl 2000 mg/dl normal
 DISCUSIÓN DE
RESULTADOS
ACTIVIDAD
EXPERIMENTAL 1
 ACTIVIDAD EXPERIMENTAL 1

solución 1. Glucosuria: presencia de glucosa en

la orina. Posible causa: saturación de
transportadores de glucosa ( valor umbral
renal de glucosa 200 mg/dL).

solución 2. Proteinuria: presencia de proteínas

(albúmina) en la orina. Posible causa:
- fallas en la barrera de filtración glomerular
(desaparición de las cargas negativas de la
b a r r e r a d e f i l t r a c i ó n ).
 ACTIVIDAD
EXPERIMENTAL 2
 OBJETIVOS

Objetivos específicos:
2. Evidenciar el papel de la función renal en el mantenimiento del
equilibrio del medio interno ante las siguientes situaciones
experimentales:

a) ingesta de una solución isotónica ( NaCl 0,9 %).

b) ingesta de una solución hipotónica ( agua).

c) restricción hídrica breve.

 HIPÓTESIS

Considerando que el riñón par ticipa en el mantenimiento del

equilibro del medio interno, debería responder a:

- La ingesta de una solución isotónica (NaCl 0,9%) generando

una diuresis aumentada, un CH 2 O igual a 0, y mantenimiento
de los niveles de osmolalidad urinaria.

- La ingesta de una solución hipotónica (agua) aumentando la

diuresis, CH2O positivo y osmolalidad urinaria disminuida
respecto a la inicial.

- La restricción hídrica generando una reducción de la

diuresis, un CH 2 O negativo y osmolalidad urinaria
aumentada respecto de la inicial.
METODOLOGÍA Y PROCEDIMIENTO ACT. 2

Metodología

Partiendo de muestras de orina, tomadas como

control, se midieron cambios en el volumen y
densidad de la orina en intervalos regulares (30
minutos) en tres casos diferentes.

- Se realizó un plan experimental.

 Procedimiento

Antes del práctico

1. Seleccionar tres voluntarios. A cada uno de ellos se le otorgó
una solución específica:
- Solución hipotónica
- Solución isotónica
- Ninguna solución (restricción de ingesta de agua)

2.Los sujetos de experimentación no ingirieron nada por dos

horas antes de realizar el experimento. A su vez las ingestas
previas fueron limitadas a 250 ml.

3. Anotar la última hora de micción (aprox. 1 hora antes de

práctico).
 MATERIALES

ACTIVIDAD EXPERIMENTAL 2

Balanza

Muestras de orina

Guantes

Recipientes limpios

Soluciones

Embudo

Probetas

Densímetro* 2

Tubos de ensayo

Termómetro

Marcador permanente
* 2 Den
De n sím
sí m e t r o : se calibra con agua destilada en un tubo de
ensayo con un volumen que alcance un valor de 1000 en el
densímetro. Se saca el densímetro y se marca el menisco formado
por el líquido con marcador permanente.
- En caso de aumentar la temperatura de la muestra
(respecto de la del agua), se suma 1 cifra cada 3°C.
- En caso de tener que diluir la orina con agua para alcanzar
el volumen indicado con el marcador permanente,
calcular el factor de dilución para corregir el valor de
densidad: FD = (Vorina+Vagua)/Vorina
Durante el prá
práctico:
ctico:

1. Orinar nuevamente recolectando todo el

volumen de la micción y anotando la hora.
Estos valores se toman como muestra
control.

2. Pesar a los sujetos de experimentación.

3. Se determina el volumen a ingerir en las

diferentes situaciones
 Peso Ingesta (vol)
(10 ml/kg peso)
Sujeto (kg) Solución

Hipotónico 91,5 915 ml H2O

Isotónico 58,6 586 ml NaCl 0,9%

Restricción 89,1 ----------- --------------

4- Análisis de las muestras previas con su respectivo
registro de:
- Densidad
- Volumen
- Temperatura.

5- Orinar cada 30 min durante 1,5 horas y registrar el

volumen de la micción, densidad y temperatura.
 Nº Muestra Hora Volumen de Denidad (g/l) Temp
emperatura
orina (ml) (ºC)

0 (micción
aprox 1 hora
------------------- ----------------------- -----------------------
antes)
1 (0 min)

2 (30min)

3 (60min)

4 (90 min)
 Cálculos :

Nº Muestra Hora Volumen de Densidad Temperatura

orina (ml) (g/l) (ºC)

0 (tiempo menos 11:59 ----------------- ------------------- -------------------

60 min)
1 (tiempo 0) 13:15 214 ml 1005 g/l 25 ºC

Densidad corregida por temperatura: 1006 g/l

V= 2,82 ml/min
Cosm = 210 mOsm/kgH2O x 2,82 ml/min
---------------------------------------------------------
300 mOsm/kgH20

Cosm= 1,97ml/min

CH20= 2,82 ml/min – 1,97 ml /min

CH2O= 0,85 ml/min

 Restrición Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 Muestra 4
(0 min) (30 min) (60 min) (90 min)

Diuresis 2,82 1,4 1,33 1,47

(ml/min)

Uosm 210 560 560 630

(mOsm/kgH2O)

CH20 0,85 -1,21 -1,12 -1,62

(ml/min)
6- Análisis de los datos:

- Gráfica de diuresis en función del tiempo

- Gráfica de osmolalidad en función del tiempo

- Gráfica de clearance de agua libre

 RESULTADOS
ACTIVIDAD
EXPERIMENTAL 2
 RESTRICCIÓN

Diuresis
resis
3

Diuresis 2,5
(ml/mi
/min)
2

1,5

Restricción
0,5

0
0 1 2 3 4 5

N° Muestra
 Uosm = f (t)
700

Uosm 600

(mOsm/kg H2O)
500

400

300

200
Restricción

100

0
0 1 2 3 4 5

N° Muestra
 CH2O = f (t)
1

CH20
(ml/min) 0,5

0
0 1 2 3 4 5

-0,5

Restricción

-1

-1,5

-2

Nº Muestra
 INGESTA DE SOLUCIÓN HIPOTÓNICA

Diuresis (V) = f(t)

14

Diuresis
12
(ml/min)
10

8
Hipotónico

0
0 1 2 3 4 5

N° Muestra
 Uosm = f(t)
160

Uosm
(mOsm/kg H2O) 140

120

100

80
Hipotónico
60

40

20

0
0 1 2 3 4 5

N° Muestra
 CH2O = f (t)
12

CH20 10
(ml/min)
8

4
Hipotónico

0
0 1 2 3 4 5

Nº Muestra
CON INGESTA DE SOLUCIÓN ISOTÓNICA

6
V = f (t)
Diuresis
(ml/min) 5

2
Isotónico

0
0 1 2 3 4 5
N° Muestra
 Uosm = f (t)
250

Uosm
(mOsm/kg H2O)
200

150

100

Isotónico
50

0
0 1 2 3 4 5

N° Muestra
 CH2O = f (t)
5
CH20
(ml/min)
4

Isotónico

0
0 1 2 3 4 5

Nº Muestra
COMPARACIÓN DE GRÁFICOS DIURESIS

V = f(t)
Diuresis 14

(ml/min)
12

10

Restricción 6

Hipotónico 4

Isotónico 2

0
0 1 4 5
N2° Muestra 3
 COMPARACIÓN DE GRÁFICOS
OSMOLALIDAD URINARIA

Uosm = f (t)
700

600

Uosm
osm 500
(mOsm/kg H2O)
400

Restricción 300

Hipotónico 200

100
Isotónico
0
0 1 2 3 4 5

N° Muestra
COMPARACIÓN DE GRÁFICOS CH 2 O

CH2O = f (t)
12

CH20
10
(ml/min)
8

Restricción 4

Hipotónico
2

Isotónico
0
0 1 2 3 4 5

-2

-4
Nº Muestra
CONCLUSIONES
 ACTIVIDAD EXPERIMENTAL 2

Conclusión sobre restricción hídrica: los resultados reflejan

que la restricción hídrica lleva a una disminución de la
diuresis, un clearance negativo y un aumento en la
osmolalidad de la orina como se esperaba.

Conclusión sobre ingesta de solución hipotónica : la ingesta de una

solución hipotónica produce un aumento de la diuresis, una
disminución en la osmolalidad urinaria y un aumento en el CH2O.

Conclusión sobre ingesta de solución isotónica: los resultados

fueron en el mismo sentido que los obtenidos con la ingesta de
solución hipotónica pero menos acentuados. Esto se explicaría
porque el desafío para el medio interno fue sólo el aumento de
volumen (mientras que la solución hipotónica habría provocado
además descenso de osmolaridad plasmática). Otros mecanismos
reguladores diferentes a la acción de la ADH no podrían
evidenciarse en el corto tiempo del práctico.
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