INTRODUCCION

La frecuencia de las enfermedades hizo necesaria la búsqueda de compuestos bioactivos de las plantas
medicinales. Personas de todos los continentes han usado durante mucho tiempo las infusiones de plantas
autóctonas utilizadas con fines medicinales. Las plantas muestran actividad terapéutica debido a la presencia
de diferentes fitoquímicos (corresponden a metabolitos secundarios sintetizados por las
plantas, que incluyen terpenos, ácidos fenólicos y tiólicos, lignanos y flavanoides). El uso y
búsqueda de nuevos fármacos y compuestos bioactivos derivados de plantas se ha acelerado en los últimos
siglos. Los investigadores están tratando de buscar nuevos fitoquímicos que podrían conducir al desarrollo
de nuevos tratamientos para enfermedades infecciosas a partir de productos naturales extraídos de plantas.
En este estudio se utilizaron dos plantas medicinales Scoparia dulcis y Eclipta alba y cinco solventes (hexano,
cloroformo, acetato de etilo, acetona y metanol) para la extracción en caliente. Se realizó un cribado de
compuestos fitoquímicos a partir de extractos de estas dos plantas medicinales en las cuales ha revelado la
presencia de alcaloides, antocianinas, bálsamos, carbohidratos, glucósidos cardíacos, grasas y aceites fijos,
flavonoides, esteroides, fenol, flobataninas, proteínas, resinas, saponinas, taninos, terpenoides y triterpeno.
Se corrieron cinco extractos de solventes en cinco sistemas de solventes diferentes en TLC (cromatografía en
capa fina) para monitorear el progreso de una reacción, identificar los compuestos presentes en cada
mezcla.

RECOGIDA DEL MATERIAL VEGETAL

Se recolectaron plantas enteras de Eclipta alba y Scoparia dulcis (hojas, tallo, raíces, flores y frutos) y se
identificaron y certificaron los especímenes de plantas y se depositó el número de espécimen de
comprobante (35897, 43794) en el Herbario Nacional de Bangladesh

Luego se hizo una Preparación de los extractos y Se realizó un análisis fitoquímico para detectar la presencia
de compuestos activos que se extrajeron de ambas plantas usando 5 solventes diferentes.

 Preparación de extractos

Pulverizar y almacenar
Se lava con agua Secar al sol durante 10

Se elimina el exceso de En el aparato de soxhlet

 1. 1.5 kg de ambas plantas.
2. Se lava con agua corriente (eliminar polvo y suciedad).
3. Se seca al sol ambas muestras durante 10 días (hasta obtener un peso constante).
4. La planta seca se pulveriza usando una licuadora convencional para obtener un polvo muy
fino y se almacena en un recipiente hermético de vidrio.
5. En el aparto de soxhlet se pusieron 15 gramos del polvo de la planta extraído previamente, se
realizaron con extracciones con solventes de polaridad creciente (250 ml): n-hexano, acetato
de etilo, cloroformo, acetona y metanol.
6. Luego el extracto se concentra, eliminando el exceso de solvente y se almacena a 4 °C.
Fundamento del aparato de soxhlet Como se usa el aparto de soxhlet
Se genera la extracción por medio de un 1. En el cuerpo extractor se introduce el
solvente a fin a un material que por lo general material del que se quiere hacer el
es sólido. extracto.
Este procedimiento se realiza por medio de 2. En la parte superior tiene un conector
lavados consecutivos del solvente sobre la esmerilado hembra que conecta el
muestra solida (planta) y lo que se extrae es una condensador.
esencia, el cual es un aceite. 3. En la parte inferior, un conector
esmerilado macho para conectar un
matraz redondo.
4. Entre el conector macho y el cuerpo
extractor hay un sistema de tubos que
tienen dos funciones:
- El tubo más grueso permite el paso de
vapor del matraz al condensador.
- El tubo más fino actúa como un vaso
comunicante y produce un efecto sifón,
conectando con el matraz redondo.

 Análisis fitoquímico (presencia de compuestos activos).

Reacción Reactivos Resultado
Método de Wagner + HCL (acidificar) Un precipitado amarillo
+ Reactivo de Wagner evidencia la presencia de
alcaloides.
+ 2 ml de extracto Color verde azulado determina
+ 2 ml NaOH la presencia de antocianinas
(Las antocianinas son
pigmentos hidrosolubles).
+ 5 ml de extracto Un color verde oscuro
+ 2 gotas de cloruro férrico determina la presencia de
 90% bálsamos.
+ 5 ml de disolvente Precipitado de color rojo
concentrado ladrillo en 5 minutos determina
+ reactivo de Benedict (2.5 m l) la presencia de carbohidratos.
-Hervir durante 5 minutos
Método keller-killani + 5 ml de extracto La formación de anillo violeta
+ Ácido acético glacial (2 ml) evidencia la presencia de los
+ 1 gota de sln de cloruro glúcidos cardiotónicos (son
férrico glucósidos heterósidos con
+ 1 ml de ácido sulfúrico actividad sobre músculo
concentrado cardíaco, compuestos de una
genina esteroídica y azúcares).
+ 5 gotas del extracto Sln azul clara
+ 1 ml de sln de sulfato de
cobre 1%
+ gotas de NaOH al 10%
+ 1 ml de extracto Color amarillo marrón azulado
+ 1 ml de NaOH es un positivo para los
+ gotas de HSO flavonoides.
+ 2 ml del extracto Sln de verde a violeta (en
+ 2 ml de anhidrido acético algunas muestras indica la
+ 2 ml de HSO presencia de esteroides).
+ 2 ml de extracto Sln de color verde azulado
+ 2 ml de FeCl intenso evidencia la presencia
de fenoles.
+ 1 ml de extracto Precipitado rojo evidencia a
+ Se hierve con ácido florotaninos (son metabolitos
clorhídrico 1% secundarios pertenecientes a la
familia de los compuestos
fenólicos que se encuentran
exclusivamente en algas
marrones).
Biuret + 2 ml de extracto Una sln color violeta es un
+ 5 gotas de sln de sulfato de positivo a presencia de
cobre 1% proteínas en ambas plantas.
+ 2 ml de NaOH al 10%
(mezclar cuidadosamente)
+ Se mezclo extracto de planta Se observa una turbidez que
y acetona 1:1 (indica que se especifico la presencia de
mezcla una cantidad de resinas.
disolución inicial con una
cantidad igual (en volumen)
de agua).
+ 2 ml de agua desmineralizada
+ 0.5 ml de extracto Presencia de espuma o
+ 10 ml de agua burbujas es positivo para
desmineralizada (se agito saponinas.
dinámicamente durante 2
minutos)
+ 2 ml de solución Color verde es presencia
 + gotas de sln de FeCl 5% positiva de taninos.
Salkowski + 1 ml de extracto Formación de una capa de
+2 ml de cloroformo coloración marrón rojiza
+ 3 ml de HSO (mezclo) evidencia la presencia de
terpenoides (compuestos que
están construidos de
unidades de isopreno, por lo
que sus estructuras se pueden
dividir en unidades de cinco
carbonos (C5).
Método de Lieberman + Se vario la sln de cloroformo Las dos capas de unirán de
Burchardt de extracto color rojo intenso y esto
+ gotas de ácido acético evidencia la presencia de
+ 1 ml de ácido sulfúrico triterpenos (Los triterpenos
concentrado son los terpenos de 30
carbonos. Son por lo general
generados por la unión
cabeza-cabeza de dos
cadenas de 15 carbonos).

Estudios cromatográficos en capa fina

La cromatografía de capa fina o TLC por sus siglas en ingles sirve para la separación de componentes de
manera cualitativa.

En una cámara cromatográfica o cubeta de vidrio con tapa se coloca el disolvente que será nuestra fase
móvil que este es bastante volátil por lo cual la cámara cromatográfica debe tener una tapa, la fase móvil
puede ser una mezcla de disolventes en diferentes proporciones, en nuestro caso se realizaron 5 sistemas de
solventes diferentes en proporciones de:

 Hexano: acido acetico (9:1) MENOS POLAR

 Hexano: Acetato de etilo:Acido acetico (5:4:1)
 Hexano: Acetato de etilo:Acido acetico (4:4:2)
 Hexano: Acetato de etilo:Acido acetico (3:6:1)
 Hexano: Acetato de etilo:Acido acetico (2:7:1) MAS POLAR

Luego tenemos lo que es la fase estacionaria o absorbente que es una placa 6x7 que en este caso será de gel
de sílice, en ella vamos a trazar una línea en la parte inferior que luego vamos a puntear a una distancia de
aproximadamente 1 cm, esta línea será la que delimitará nuestros puntos de aplicación de las muestras que
en nuestro caso son 5 muestras:

 Extracto de Hexano
 Extracto de Acetato de Etilo
 Extracto de cloroformo
 Extracto de acetona
 Extracto de metanol
La fase móvil será absorbida por la fase estacionaria hasta llegar a la parte superior de la placa y de este
modo separará nuestras muestras en función de su polaridad

Luego se procedió observar los puntos dejados por los productos en la placa de sílice con ayuda de la luz
ultravioleta para su posterior calculo del Rf, dicho calculo se realiza dividiendo la distancia recorrida por el
soluto o fase móvil entre la distancia recorrida por el punto dejado en la placa, obteniendo como resultado
los siguientes valores

Como podemos ver el sistema de solvente que mejor pudo separar los componentes presentes en el
extracto de Scoparia dulcis es el sistema de solvente 1 que era de Hexano: acido acético (9:1) en el extracto
de hexano donde en el análisis fitoquímico pudimos identificar la presencia de 5 componentes y el que peor
pudo separar los componentes en el extracto de scoparia dulcis es el sistema de solvente 4 y 5 que no
pudieron extraer ningún componente de los 5 extractos de scoparia dulcis

El sistema de solvente que mejor pudo separar los componentes en los extractos de Eclipta alba es el
sistema de solvente 2 que era de Hexano: Acetato de etilo: Acido acético (5:4:1) en los extractos de Hexano,
Acetato de etilo y cloroformo. El que peor separo los componentes de los extractos de Eclipta alba es el
sistema de solvente 1 de Hexano: acido acético (9:1)