BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

ÁREA DE FISICOQUÍMICA

LICENCIATURA EN BIOTECNOLOGÍA

LABORATORIO DE FISICOQUÍMICA II

PRÁCTICA 4: CINÉTICA POR ESPECTROFOTOMETRÍA

EQUIPO 8

NOMBRE DE LOS MIEMBROS DEL EQUIPO:

PROFESOR: DR. MARIO GONZALEZ PEREA

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 20/09/2021

FECHA DE ENTREGA DEL REPORTE: 26/09/2021

Práctica 4

CINÉTICA POR ESPECTROFOTOMETRÍA

OBJETIVO: Determinar el orden parcial de la reacción con relación al persulfato de

potasio y el valor de la constante de velocidad de la reacción a temperatura
constante.

INTRODUCCIÓN
Espectrofotometría

La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las

investigaciones biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite
comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una
cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la
misma sustancia.
Todas las sustancias pueden absorber energía radiante, aun el vidrio que parece
ser completamente transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al
espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la región del infrarrojo.
La cinética química es un área de la fisicoquímica que se encarga del estudio de la
rapidez de reacción, cómo cambia la rapidez de reacción bajo condiciones variables
y qué eventos moleculares se efectúan mediante la reacción general

Cinética por espectrofotometría

La termodinámica nos permite saber si una reacción es espontánea o no según

factores termodinámicos como entalpía, entropía y energía libre, pero no informa
acerca de la rapidez con que se produce el cambio químico. La Cinética Química
determinará si una reacción es lenta o rápida al estudiar los factores que determinan
la velocidad y el mecanismo, es decir, la etapa o serie de etapas en las que ocurre
el cambio.

Aplicaciones

Las aplicaciones principales son:

• Determinar la cantidad de concentración en una solución de algún
compuesto
• Para la determinación de estructuras moleculares.
• La identificación de unidades estructurales específicas ya que estas tienen
distintos tipos de absorbancia (grupos funcionales o isomerías).
• Determinar constantes de disociación de indicadores ácido-base
Espectrofotómetro

Un espectrofotómetro es un instrumento usado en el análisis químico que sirve para

medir, en función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma
magnitud fotométrica relativos a dos haces de radiaciones y la concentración o
reacciones químicas que se miden en una muestra.
También es utilizado en los laboratorios de química para la cuantificación de
sustancias y microorganismos.
Hay varios tipos de espectrofotómetros, puede ser de absorción atómica, de
absorción molecular (que comúnmente se conoce como espectrofotómetro UV-
VIS), y no debe ser confundido con un espectrómetro de masa.
La velocidad de reacción corresponderá a la rapidez con que tiene lugar una
reacción; durante el cambio, la concentración de los reactantes disminuirá, mientras
que la concentración de los productos aumentará. La velocidad media, entonces,
se medirá a través del cambio de concentración en un periodo determinado de
tiempo.

Cinética de las reacciones químicas

La velocidad de una reacción química puede medirse como la velocidad de

formación de uno o más de sus productos o bien la velocidad de utilización de sus
reactivos. Podemos suponer que al aumentar la concentración de los reactivos la
probabilidad de interacción de los mismos aumenta juntamente con la velocidad que
procede tal reacción.
Una reacción química tiene dos características de importancia: La posición de
equilibrio (estabilidad de la concentración de productos y reactivos), la velocidad de
reacción (las reacciones tienen por objeto determinar el mecanismo y la velocidad
con que interaccionan las moléculas bajo determinadas condiciones).
Ambas variables (velocidad de reacción y concentración de los reactivos) son
directamente proporcionales, así que matemáticamente debe existir un valor
constante, de esta manera podemos escribir: vr = k. [reactivos]n . (velocidad de
reacción) = (constante) . (concentración de reactivos)n
El valor del exponente n es el orden de la reacción. si n = 1, estamos en presencia
de una reacción de primer orden donde la velocidad es proporcional a la reacción
de un solo reactivo. vr = k. [A]

Ley de rapidez
Si se tiene la reacción: aA + bB p
La rapidez viene dada por la siguiente relación:
1 -d [A] 1 -d [B]
r = --- ---------- = --- --------------- = k [A]α [B]β
a dt b dt
Donde k es la constante de rapidez de la reacción.
Orden de reacción: la rapidez de reacción es proporcional a las concentraciones de
los reactantes elevadas a una potencia, por lo que es conveniente hablar de orden
de reacción.
r = k [A]
En este caso decimos que la reacción es de primer orden, ya que la potencia a la
cual esta elevada la concentración es igual a uno.
r = k [A]2 esta es una reacción de segundo orden así como la siguiente: r = [A] [B]
Entonces en general podemos tener:
r = k [A]α [B]β Donde n = α + β
n es el orden total de la reacción. Es importante señalar que el orden de reacción
es estrictamente una magnitud experimental, que depende exclusivamente de la
forma en que la rapidez se relaciona con la concentración de reactantes.
Molecularidad: cada etapa en el mecanismo de una reacción se denomina reacción
elemental; por lo tanto, una reacción compleja tiene dos o más etapas elementales.
A fin de establecer cuantas moléculas intervienen en una reacción elemental se
introduce el termino molecularidad. Esta representa una deducción del número de
moléculas que participan en una reacción química elemental.
Pseudo orden: Si en una reacción hay exceso de uno de los reactantes, de forma
tal que su concentración no cambia apreciablemente a medida que transcurre el
tiempo, la investigación cinética no revelara dependencia alguna de rapidez
respecto a la concentración de esa sustancia. El resultado es un orden diferente al
real llamado pseudo orden.

Curvas de calibración

Un procedimiento analítico muy utilizado en análisis cuantitativo es el llamado de

calibración que implica la construcción de una “curva de calibración”. Una curva de
calibración es la representación gráfica de una señal que se mide en función de la
concentración de un analito. La calibración incluye la selección de un modelo para
estimar los parámetros que permitan determinar la linealidad de esa curva. y, en
consecuencia, la capacidad de un método analítico para obtener resultados que
sean directamente proporcionales a la concentración de un compuesto en una
muestra, dentro de un determinado intervalo de trabajo. En el procedimiento se
compara una propiedad del analito con la de estándares de concentración conocida
del mismo analito (o de algún otro con propiedades muy similares a éste). Para
realizar la comparación se requiere utilizar métodos y equipos apropiados para la
resolución del problema de acuerdo con el analito que se desee determinar.
A partir de la curva de calibración (conjunto de concentraciones que describen el
intervalo en el cual se deberá cuantificar el compuesto por analizar) y a fin de
asegurar que la recta encontrada con los puntos experimentales se ajuste
correctamente al modelo matemático de la ecuación se calculan los valores de la
ordenada al origen, la pendiente y el coeficiente de determinación (r2 ). Por tener
una buena exactitud y confiabilidad estadística, el método más empleado para
encontrar los parámetros de la curva de calibrado es el método de los mínimos
cuadrados Este método busca la recta del calibrado que haga que la suma de los
cuadrados de las distancias verticales entre cada punto experimental y la recta de
calibrado sea mínima o tienda a cero. A la distancia vertical entre cada punto
experimental y la recta de calibrado se le conoce como residual.

LEY DEBOUGUER-LAMBERT-BEER

La ley de BOUGUER-LAMBERT-BEER también se conoce como ley de Beer-

Lambert-Bouguer y fue descubierta de formas diferentes e independientes en primer
lugar por el matemático y astrónomo francés Pierre Bouguer en 1729´Luego por el
filósofo y matemático alemán, Johann Heinrich Lambert en 1760 y por último el físico
y matemático también alemán, August Beer en el año 1852.
Se puede decir que esta ley se trata de un medio o método matemático, el cual es
utilizado para expresar de que modo la materia absorbe la luz. En óptica (Rama de
la física que se encarga del estudio de la luz) La ley de Beer afirma que la totalidad
de luz que emana de una muestra puede disminuir debido a tres fenómenos de la
física, que serían los siguientes:
1. El número de materiales de absorción en su trayectoria, lo cual se denomina
concentración
2. Las distancias que la luz debe atravesar a través de la muestra. Denominamos a
este fenómeno, distancia del trayecto óptico
3. Las probabilidades que hay de que el fotón de esa amplitud particular de onda
pueda absorberse por el material. Esto es la absorbencia o también coeficiente de
extinción.
La relación anterior puede ser expresada de la siguiente manera:
Donde, A = Absorbencia
ε = Coeficiente molar de extinción
d = Recorrido (en cm)
c = Concentración molar
A medida que la luz atraviesa un medio que la absorbe, la cantidad de luz absorbida
en cualquier volumen corresponde a la intensidad de luz que incide, luego se
multiplica por el coeficiente de la absorción. Frecuentemente la intensidad de un haz
de luz incidente declina significativamente a medida que pasa a través del medio
absorbente. Cuando esta relación se expresa como Ley de BOUGUERLAMBERT-
BEER, tenemos que:

Donde, T = Transmitancia
ε = Coeficiente molar de extinción
c = Concentración molar del absorbente
d = Recorrido en cm
La transmitancia se puede expresar como la intensidad de la radiación incidente, Io.
Esto puede dividir a la luz que emerge de la muestra, I. Se refiere a la relación I/Io
como transmitancia o como T. La transmitancia se puede trazar con relación a la
concentración, pero esta relación no sería Lineal. Aunque el logaritmo negativo en
base 10 de la transmitancia sí es lineal con la concentración. De esta forma, la
absorción es medida como:

HIPÓTESIS
 o Los datos de la absorbancia serán de ayuda para conocer el orden de la
reacción.

MATERIAL Y SUSTANCIAS

o 1 Espectrofotómetro
o 1 Cronómetro
o Guantes de polietileno o látex
o Pañuelos desechables de bolsillo (no perfumados)
o 1 Termómetro
o 2 Matraces aforados de 25 ml.
o 2 Vasos de precipitados de 50 ml.
o 2 Pipetas graduadas de 5ml.
o Solución de Yoduro de potasio 0.075M
o Solución de persulfato de potasio 0.015M

DESARROLLO EXPERIMENTAL

(MÉTODO DE AISLAMIENTO)
1. Conectar el espectrofotómetro y dejar calentar durante 30 min. Para que se auto
verifique, regule y estabilice apuntando a 465 nm.
2. La tapa del porta celda debe estar siempre cerrada.
3. Tomar una alícuota de 5 ml de solución de yoduro de potasio y agregarla en una
primera celda hasta la marca indicada, la cual servirá de blanco.
4. Introducir la celda en la dirección correcta indicada en el porta celda y cerrar y
calibrar el aparato a cero de absorbancia.
5. Mezclar 5 ml de la solución de yoduro de potasio con 5 ml de solución de
persulfato de potasio, agitar e iniciar simultáneamente el tiempo de reacción, tomar
la temperatura de la mezcla de reacción.
6. Tomar una alícuota de la mezcla de la reacción y agregarla en una segunda celda
hasta la marca.
7. Cambiar la celda del blanco por la de reacción, cerrar y tomar valores de
absorbancia cada 3 minutos hasta completar 10 lecturas.
8. Sacar la celda, limpiarla con agua y apagar el equipo.

NOTA: Las lecturas deberán ser cada 3 minutos después de haber metido la
muestra ya que cambian muy rápido. Por lo tanto, podemos decir que el tiempo total
de reacción será de 30 minutos.

DATOS EXPERIMENTALES
Tabla 1.- Curva de calibración: valores de Concentración de [I3-] con
su respectiva absorbancia.

[I3-], M Absorbancia del

I3 -
Curva de calibración
0.015 2.668
3
0.01 1.813 2.5 absorbancia = 195.6(I3) - 0.2475

Absorbancia del I3-

R² = 0.9956
2
0.008 1.294
1.5
0.006 0.857 1
0.5
0.004 0.479 0

0.002 0.138 -0.5 0 0.005 0.01 0.015 0.02

[I3-], M

0.001 0.016

Tabla 2.- Valores de tiempo y absorbancia de la mezcla

de reacción realizada a 22 °C.

Tiempo Absorbancia [I3-] = [I2]

[K2S2O8]0−[I2]t=[K2S2O8]tK2S2O80
(s) del I3- mol/L −I2t=K2S2O8t
mol/L
208 0.136 0.001960 M 0.015 M - 0.001960 M = 0.01304 M
388 0.27 0.002645 M 0.015 M - 0.002645 M = 0.012355 M
568 0.4 0.003310 M 0.015 M - 0.003310 M = 0.01169 M
 748 0.51 0.003872 M 0.015 M - 0.003872 M = 0.011128 M
928 0.624 0.004455 M 0.015 M – 0.004455 M = 0.010545 M
1108 0.743 0.005063 M 0.015 M - 0.005063 M = 0.009937 M
1288 0.855 0.005636 M 0.015 M - 0.005636 M = 0.009364 M
1468 0.969 0.006219 M 0.015 M - 0.006219 M = 0.008781 M
1648 1.073 0.006751 M 0.015 M - 0.006751 M = 0.008249 M
1828 1.178 0.007287 M 0.015 M - 0.007287 M = 0.007713 M
2008 1.281 0.007814 M 0.015 M - 0.007814 M = 0.007186 M
2188 1.371 0.008274 M 0.015 M - 0.008274 M = 0.006726 M
2368 1.469 0.008775 M 0.015 M - 0.008775 M = 0.006225M
2548 1.554 0.009210 M 0.015 M - 0.009210 M = 0.00579 M
2728 1.644 0.009670 M 0.015 M - 0.009670 M = 0.00533 M
2908 1.72 0.010058 M 0.015 M - 0.010058 M= 0.004942 M

[K2S2O8]0K2S2O80
La concentración inicial del persulfato de potasio (0.015 M)

𝑎𝑏𝑠 = 𝑚(𝐼2 ) + 𝑏

𝑏 + 𝑎𝑏𝑠
= 𝐼2
𝑚

0.2475+0.136
Tiempo: 208 s 𝐼2 = =0.001960 M
195.6

0.2475+0.27
Tiempo: 388 s 𝐼2 = =0.002645 M
195.6

0.2475+0.4
Tiempo: 568 s 𝐼2 = =0.003310 M
195.6

0.2475+0.51
Tiempo: 748 s 𝐼2 = =0.003872 M
195.6

0.2475+0.624
Tiempo: 928 s 𝐼2 = =0.004455 M
195.6

0.2475+0.743
Tiempo: 1108 s 𝐼2 = =0.005063 M
195.6

0.2475+0.855
Tiempo: 1288 s 𝐼2 = =0.005636 M
195.6

0.2475+0.969
Tiempo: 1468 s 𝐼2 = =0.006219 M
195.6
 0.2475+1.073
Tiempo: 1648 s 𝐼2 = =0.006751 M
195.6

0.2475+1.178
Tiempo: 1828 s 𝐼2 = =0.007287 M
195.6

0.2475+1.281
Tiempo: 2008 s 𝐼2 = =0.007814 M
195.6

0.2475+1.371
Tiempo: 2188 s 𝐼2 = =0.008274 M
195.6

0.2475+1.469
Tiempo: 2368 s 𝐼2 = =0.008775 M
195.6

0.2475+1.554
Tiempo: 2548 s 𝐼2 = =0.009210 M
195.6

0.2475+1.664
Tiempo: 2728 s 𝐼2 = =0.009670 M
195.6

0.2475+1.72
Tiempo: 2908 s 𝐼2 = =0.010058 M
195.6

Pseudo orden cero: [A]t=[A]0−ak′∗t

tiempo K2S2O8 Gráfica 1: Pseudo orden 0
(s) 11
208 0.013
388 0.0123
568 0.0116
748 0.0111 [A]t
928 0.0105
1108 0.0099
1288 0.0093
1468 0.0087
1648 0.0082
1828 0.0077
2008 0.0071 Tiempo s

2188 0.0067
2368 0.0062
2548 0.0057
2728 0.0053
2908 0.0049

Pseudo orden uno:

𝑙𝑛[𝐴]𝑡 = 𝑙𝑛[𝐴]0 − 𝑎𝑘´ ∗ 𝑡

Tiempo
In [A]
(s)

208 -4.339733
388 -4.393694 Gráfica 2: Pseudo orden 1
11
568 -4.449021
748 -4.498290
928 -4.552103
1108 -4.611490
1288 -4.670882
1468 -4.735164
-
1648
4.7976632 Tiempo s
-
1828
4.8648480
2008 -4.935620
2188 -5.001774
2368 -5.079181
2548 -5.151622
-
2728
5.2344040
2908 -5.309985
Pseudo orden dos: 1/ [A]0 - 1/[A]t = -ak´t

Tiempo (s) 1/At

208 76.3184
388 80.7335
568
Grafica 3: Pseudo orden 2
85.3925
250
748 89.862
928 94.7294 200
1108 100.6331
1288 106.7911 150
1/At

1468 113.8046
100
1648 121.1532 R² = 0.961

1828 129.5803 50 y = 0.0451x + 55.372

2008 139.0901
2188 0
148.6088
0 500 1000 1500 2000 2500 3000 3500
2368 160.2421 Tiempo s
2548 172.6437
2728 187.5484
2908 202.2776

Observando los resultados de las 3 pseudo órdenes, la mas apropiada es la Pseudo

orden 0 ya que posee valores cercanos a 1.
Por lo tanto, para determinar la velocidad de reacción está determinada por
𝑚 = −𝑎𝑘 ∴ −3.27𝑥10−6 = −(1)′𝑘, sí multiplicamos (-1) a toda la ecuación
𝑚𝑜𝑙
obtenemos 3.27𝑥10−6 = ′𝑘
𝐿

COMENTARIOS

• La termodinámica nos permite saber si una reacción es espontanea o no según

factores termodinámicos como entalpia, entropía y energía libre, pero no informa
acerca de la rapidez con que se produce el cambio químico. La cinética química
determina si una reacción es lenta o rápida al estudiar los factores que determinan
 la velocidad y el mecanismo, es decir, la etapa o serie de etapas en las que ocurre
el cambio.

• Con la práctica pudimos comprobar como la temperatura afecta severamente en

las constantes cinéticas y el comportamiento de la reacción.

• La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las

investigaciones biológicas.

• Un gran beneficio de la aplicación de la espectrometría en el análisis de procesos

industriales es monitorizar y optimizar simultáneamente la totalidad de todos los

procesos de productos procesados en él.

CONCLUSIÓN

Para el análisis químico de muestras de 𝐾2 𝑆2 𝑂8 usando un espectrofotómetro de

UV-Vis se recomienda usar la gráfica 1 para calibrarlo ya que esta es una gráfica
lineal y sus valores son cercanas a 1. A partir de esta misma gráfica y de los valores
obtenidos mediante la pseudo ecuación de orden 0, se determinaría la
concentración de muestras usando la ecuación de Lambert-beer siendo
3.27𝑥10−6 𝑚𝑜𝑙/𝐿 = ′𝑘 la velocidad de reacción del equipo usado en esta práctica.

BIBLIOGRAFÍAS

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