The Mayflower School Dpt.

Ciencias Biologa IB

Informe de laboratorio n2

Reconocimiento de Protenas

Profesor: Juan Carlos Guzmn Alumno:Magdalena Gatsch Curso: 10C

Introduccin El objetivo de este informe es lograr ver y analizar las reacciones de los enlaces peptdicos en las protenas y tambin la manera en que se desnaturalizan. Por esta razn vamos a poner en distintas situaciones a las protenas para as poder ver cmo reaccionan. Objetivos -Aplicar mtodos de identificacin de protenas en muestras biolgicas. -Reconocer la accin de agentes desnaturalizantes sobre diferentes protenas.

Materiales -Tubos de ensayo -Mechero -Pipetas -Alcohol etlico -Solucin de NaOH al 20% -Leche

-Gradilla -Vasos de precipitado -Solucin de Hcl concentrado - Solucin de CuSo4 al 1% -Clara de huevo -Solucin de gelatina

1.Reconocimiento y desnaturalizacin de protenas Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formndose cogulos al ser calentados a temperaturas superiores a 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, cidos y alcohol, entre otras. Procedimiento 1.Colocar en tres tubos de ensayo 2-3 ml de clara de huevo. 2.Colocar en tres tubos de ensayo 2-3 ml de leche. 3. Calentar uno de los tubos al bao Mara, aadir a otro 2-3 ml de HCl concentrado y al tercero 2-3 ml de alcohol etlico. 4. Observar y disear una tabla para registrar los resultados de las distintas muestras. Resultados

Huevo Hcl Se coagul al medio, la protena se desnaturaliz.

Leche La leche se cort , sea que se coagul. El efecto es mayor con Hcl

Alcohol

Se coagul pero no lo suficiente.

Se precipit , sea que si se coagul.

Bao Mara

Se coagul por el calor del agua

No pas nada.

Preguntas 1. Cmo se manifiesta la desnaturalizacin de la clara de huevo y leche? Presentando un cogulo ( consiste en una red de protenas insolubles). 2. Cul de los tres agentes usados tiene mayor poder de desnaturalizacin? El cido , que a la vez acta ms rpido. 3. Cmo podramos saber que una sustancia desconocida posee protenas? Presenciando la unin de aminocidos ( enlaces peptdicos) a travs del experimento de Biuret. Interpretacin El cido es el que produjo un mayor efecto en ambos , por lo que podemos deducir que logra desnaturalizar ms rpido y con mayor eficiencia las protenas. Esto se debe a que se rompen los enlaces peptdicos del huevo y la leche presentando as el cogulo. Cuando se desnaturaliza una protena es porque pierde su estructura tridimensional. Por otro lado podemos ver que la leche en bao Mara no se desnaturaliz , esto se pudo deber a que no logr la temperatura para as romper los enlaces. Conclusin El calor , los cidos y el alcohol logran desnaturalizar a las protenas , pero esto no sucede con la misma velocidad. El primero en romper sus enlaces fue el cido ( huevo y leche ) luego fue el alcohol y por ltimo el calor. Por lo que se podra decir que el calor no es el mejor agente desnaturalizador , en comparacin con el cido y el alcohol. Por otro lado , pudimos ver que el huevo siempre se coagulaba ms rpido que la leche. En ambos casos es una reaccin irreversible , ya que nunca va a volver a su estructura inicial.

2. Reacciones coloreadas especficas (Biuret) Entre las reacciones coloreadas especficas de las protenas, que sirven por tanto para su identificacin, destaca la reaccin de Biuret. Esta reaccin la producen pptidos y las protenas, pero no los aminocidos ya que se debe a la presencia del enlace peptdico ( CO-NH) que se destruye al liberarse los aminocidos. El reactivo de Biuret lleva Sulfato de cobre (lll) y una sosa. El Cu en un medio fuerte alcalino, se coordina con los enlaces peptdicos formando un complejo de color violeta ( Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentracin de protenas.

Procedimiento 1. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de clara de huevo 2. Aadir 4-5 gotas de solucin de CuSo4 diluido 3. Aadir 3 ml de solucin de NaOH diluido 4. Agitar para que se mezcle bien 5. Repetir el procedimiento reemplazando la clara de huevo por leche 6. Observar y disear una tabla para registrar los resultados de las distintas muestras. Resultados

Huevo

Leche

Color morado

Si

Si

Preguntas 1. Qu coloracin da la reaccin de Biuret? Violeta 2. Podra una protena coagulada dar positiva a la reaccin de Biuret? No porque ya se rompieron los enlaces peptdicos. 3.Si se realiza la reaccin de Biuret sobre un aminocido como la Glicina, el resultado sera positivo o negativo? Negativo, ya que tiene que haber presencia de enlaces peptdicos y en el aminocido no hay. Interpretacin El CuSO4 con el Reactivo de Biuret reaccionan y al agregarle protenas en presencia de NaOH en una base fuerte es incapaz de romper los enlaces peptdicos y por eso se torna morado. Tanto el huevo como la leche se tornaron morados

Conclusin Tanto el huevo como la leche se tornaron morados, por lo que podemos decir que si hay presencia de el enlaces peptdicos , al mismo tiempo notamos que el NaOH diluido fu incapaz de romper los enlaces por lo que mantuvo su color. El huevo se coagul y se torn ms morado por la concentracin de protenas.