Universidad Univer Milenium

Nombre del alumno:

Colín Valencia Luis Daniel

Nombre del docente:

Vidal Morales Mercado

Materia: Biotecnología Industrial

Actividad de Aprendizaje

Grupo: MLQFB – 701

Nombre de la carrera: Químico Farmacéutico

Biólogo

Fecha de entrega: 25/09/2022

Las proteínas son las moléculas orgánicas más abundantes en la célula, ellas
constituyen más del 50% del peso seco de la célula. Cada tipo celular, tiene un rol
específico determinado por su composición proteica.

DIAGRAMA DE FLUJO DE LA OBTENCION DE PROTEINA CELULAR

 Vector de transformación

Los vectores de clonación son moléculas transportadoras que transfieren y

replican fragmentos de ADN que llevan insertados mediante técnicas de ADN
recombinante. una molécula debe ser capaz de replicarse junto con el fragmento
de ADN que transporta. También debe tener secuencias de reconocimiento que
permitan la inserción del fragmento de ADN a clonar. Para insertar un fragmento
de ADN al vector, se utiliza una enzima de restricción, y se mezcla con fragmentos
de ADN producidos con la misma enzima. Los vectores que transportan un
fragmento insertado se denominan vectores recombinantes. Para servir de vector,
una molécula de ADN debe tener unas determinadas características:

1. Debe poder replicarse independientemente junto con el segmento de ADN que

transporta.
2. Debe contener algunos sitios de corte para enzimas de restricción, presentes
sólo una vez en el vector. Estos sitios de restricción se cortan con una enzima de
restricción y se utilizan para insertar segmentos de ADN cortados con la misma
enzima.
3. Debe tener algún marcador de selección (normalmente genes de resistencia a
antibióticos o genes de enzimas que la célula huésped no tiene) para poder
distinguir las células huésped que transportan el vector de las que no lo contienen.
4. El vector de la célula huésped debe ser fácil de recuperar.

Plásmido pBR322

Mapa genético y físico de pBR322 que muestra las posiciones de dos genes de
 resistencia a la ampicilina (amp) y la tetraciclina (tc), el punto de partida de la
replicación (ori) y los lugares de corte más importantes de las endonucleasas de
restricción.

El plásmido pBR322 de E. coli, muy popular para los técnicos en genética, se
desarrolló a finales de los años 1970. La p significa plásmido, BR se refiere a los
científicos en él involucrados: Bolívar y Rodríguez. El número 322 diferencia el
plásmido de otros del mismo laboratorio, como pBR325, pBR327, etc. pBR322
contiene genes para las enzimas de resistencia a antibióticos: la tetraciclina y la
ampicilina. Diferentes endonucleasas de restricción pueden cortar el plásmido en
lugares de corte específicos. Finalmente, también se insertan allí los fragmentos
de ADN cortados. Si se utilizan EcoRI no se corta ningún gen de resistencia a
antibióticos; sin embargo, esto sí sucede si se corta por ejemplo con BamHI.
Entonces se corta el gen de resistencia a tetraciclina y se inserta un gen exógeno
en medio del gen tc.
Descripción del vector

Referencias:
 Baneyx, F. (1999). Recombinant protein expression in Escherichia coli.
Current Opinion in Biotechnology 10, 411–421.
 Cisneros–Ruiz, M. y Rito–Palomares. M. (2005). Estrategias de
bioingeniería para la recuperación primaria de productos biológicos. Revista
Mexicana de Ingeniería Química 4,131–139. 
 Eiteman, M.A. y Altman, E. (2006). Overcoming acetate in Escherichia
coli recombinant protein fermentations. Trends in Biotechnology 24, 530–
536. 
 Jones, K.L., Kim, S.W. y Keasling, J.D. (2000). Low–copy plasmids can
perform as well as or better than high–copy plasmids for metabolic
engineering of bacteria. Metabolic Engineering 2, 328–338. 
 Wong, H.H., O'Neill, B.K. y Middelberg, A.P. (1996). Centrifugal processing
of cell debris and inclusion bodies from recombinant Escherichia coli.
Bioseparation 6, 361–372.  
 Vidal, L., Pinsach, J., Striedner, G., Caminal, G. y Ferrer, P. (2008).
Development of an antibiotic–free plasmid selection system based on
glycine auxotrophy for recombinant protein overproduction in Escherichia
coli. Journal of Biotechnology 134,127–136.