UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO - FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

ESCUELA DE MEDICINA HUMANA - CURSO INMUNOLOGIA BASICA

MANUAL DE PRACTICAS INMUNOLOGIA BASICA

“Año del Fortalecimiento de la Soberanía Nacional”

UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO
FACULTAD DE MEDICINA

DOCENTE: Dr. Reyna Lopez, Lennis

CURSO: Inmunología Práctica

NCR: 3739

INTEGRANTES:

 León Montero, Christina

 Lopez Mejía, Gesu
 Lopez Roncal, Miguel
 Lozano Moncada, Flavio

TRUJILLO - PERÚ
2022 - 2

1
 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO - FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
ESCUELA DE MEDICINA HUMANA - CURSO INMUNOLOGIA BASICA
MANUAL DE PRACTICAS INMUNOLOGIA BASICA

PRÁCTICA Nro. 10

PRUEBAS SEROLÓGICAS DE DIAGNÓSTICO

PARA ARTRITIS REUMATODEA

INTRODUCCIÓN:

FACTOR REUMATOIDEO Y ARTRITIS REUMATOIDEA:

El factor reumatoide, es un tipo de trastorno autoinmune que causa dolor, hinchazón y
rigidez en las articulaciones. Es una enfermedad inflamatoria sistémica, caracterizada por la
inflamación crónica de las articulaciones, con su consecuente destrucción, deformidad e
incapacidad, presenta manifestaciones clínicas como: extra articulares, dolor e incapacidad
de movimientos articulares, formaciones de abultamientos y se le asocia a la artritis
reumatoide. Los factores reumatoideos generalmente de tipo IgM reaccionan con las
fracciones Fc. de las IgG. El factor reumatoideo de tipo IgM se detecta en presencia de
Gamma- inmunoglobulina o fracción II de Cohn la cual actúa como antígeno adsorbida sobre
un soporte inerte de látex poliestireno. El antígeno se une a los FR (anti - IgG) produciendo
una aglutinación de las partículas de látex poliestireno, visible macroscópicamente.

LA PROTEINA C-REACTIVA (PCR):

La proteína C reactiva (PCR) se encuentra presente en el suero de individuos sanos y su
concentración plasmática aumenta significativamente en respuesta a diferentes tipos de
estímulos, tales como infecciones, irritantes químicos, temperaturas extremas, irradiación,
cirugía, trauma, neoplasias malignas y otras condiciones inflamatorias. Se ha reportado
que la PCR interactúa con el sistema inmunitario modulando la respuesta inmune contra un
gran número de agentes extraños al organismo.
Niveles elevados de PCR representan un sensible marcador inespecífico de la respuesta
inflamatoria aguda y desempeñan un papel importante en el desarrollo y evolución del
fenómeno mencionado. La sensibilidad y especificidad de los ensayos disponibles en la
actualidad para la detección de la PCR es significativa y depende de la metodología
empleada, en algunos casos compleja y costosa.(3)
.
El objetivo de la práctica es:
- Realizar in vitro pruebas serológicas como criterios de diagnóstico.

MATERIAL Y MÉTODOS:

1.- ARTRITEST:
 Diluir una muestra de suero 1: 20 con buffer glicina. En una placa de vidrio
colocar separadamente el suero diluido 1 gota (50 uL) y una gota de reactivo
de látex-globulina. Mezclar con un palillo descartaba hasta obtener una
suspensión uniforme,
 Inmediatamente disparar el cronómetro, balanceando suavemente la placa de
vidrio observando el resultado dentro de los dos minutos.
 Para la titulación de los sueros se hacen diluciones en tubos, colocando 1,9
mL de buffer glicina en el primer tubo y 1 mL en los restantes.

2
 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO - FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
ESCUELA DE MEDICINA HUMANA - CURSO INMUNOLOGIA BASICA
MANUAL DE PRACTICAS INMUNOLOGIA BASICA

 Agregar 0,1 mL de suero al tubo Nº 1 mezclando, luego transferir 1 mL de la

dilución al tubo Nº 2, y así se continua con el resto de los tubos. Se obtienen
diluciones de 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, etc.

Negativo: No se ve aglutinación.
Positivo: Aglutinación dentro de los dos minutos.
Título: Inversa de la máxima dilución en la que se produce aglutinación.

2.- PROTEÍNA C – REACTIVA

 Preparar una muestra diluida 1:20 de suero en un tubo de ensayo, mezclando

1 gota (50uL) del suero con 1 mL. de buffer glicina. Luego, en una placa de
vidrio mezclar una gota (50 uL) del reactivo de látex y una gota (50 uL) del suero
diluido.
 Inmediatamente poner en marcha el cronómetro, balanceando suavemente la
placa de vidrio por tres minutos. Observar la aglutinación sobre un fondo negro
y por encima de un haz luminoso.

Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas de: 1:40,
1:80, 1:160, etc.

Negativo : No hay aglutinación

Positivo : Aglutinación que aparece a los tres minutos.
Título : Inversa de la máxima dilución en la que se observa
aglutinación.

3
 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO - FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
ESCUELA DE MEDICINA HUMANA - CURSO INMUNOLOGIA BASICA
MANUAL DE PRACTICAS INMUNOLOGIA BASICA

TAREA DE LABORATORIO:

1.- Defina que es una reacción serológica directa e indirecta

Reacción serológica directa: Son aquellas que basadas en el

principio de la reacción antígeno anticuerpo investigan la presencia del
antígeno. En el caso de la enfermedad infecciosa equivale a decir que
investigan la presencia del agente etiológico o, uno de sus
componentes.

Reacción serológica indirecta: Son aquellas que basadas en la

reacción antígeno anticuerpo, investigan la huella que el agente dejó al
pasar por su huésped en términos de una respuesta inmune puesta en
evidencia por el hallazgo de anticuerpos específicos contra el agente o
alguno de sus componentes y que, indirectamente permite suponer que
el agente en cuestión estuvo presente en el huésped en algún
momento.(1)
2.- Defina que es reacción serológica de aglutinación y precipitación

Reacción serológica de aglutinación: Cuando un antígeno

particulado reacciona con su anticuerpo específico se observa
la formación de grumos o agregados de estas partículas, esto
se conoce como aglutinación. En estas reacciones el
determinante antigénico está sobre la superficie de una
partícula o de una célula. Estas reacciones son más sensibles
que las de precipitación para detectar pequeñas cantidades de
anticuerpos, debido a que relativamente pocas moléculas de
anticuerpo pueden unir efectivamente un gran número de
partículas de antígeno en grumos gruesos macroscópicamente
visibles

Reacción serológica de precipitación: Ocurre cuando se combina un anticuerpo, por lo menos

divalente, con un antígeno soluble y esto conlleva a la formación de agregados que precipitan. Para
que la precipitación ocurra en forma máxima se necesita que tanto el antígeno como el anticuerpo
estén en concentraciones óptimas, cuando cualquiera de los reaccionantes están en exceso no se
pueden formar grandes agregados antígeno-anticuerpo.(2)

4
 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO - FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
ESCUELA DE MEDICINA HUMANA - CURSO INMUNOLOGIA BASICA
MANUAL DE PRACTICAS INMUNOLOGIA BASICA

3.- Defina que es una reacción de aglutinación pasiva.

Las reacciones de aglutinación pasiva o indirecta más ampliamente empleadas se

basan en la sensibilización de la partícula inerte con el antígeno, por lo que resultan
útiles para la detección y titulación de anticuerpos en distintos fluidos biológicos.(2)

4.- Diga a qué tipo de reacción serológica corresponden las pruebas realizadas en
el laboratorio.

 Proteina c-reactiva: Aglutinación

 Artritest: Aglutinación

5.- Coloque fotos de material usado en la práctica

5
 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO - FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
ESCUELA DE MEDICINA HUMANA - CURSO INMUNOLOGIA BASICA
MANUAL DE PRACTICAS INMUNOLOGIA BASICA

6.- Coloque fotos de resultados de la práctica

6
 UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO - FACULTAD DE MEDICINA HUMANA
ESCUELA DE MEDICINA HUMANA - CURSO INMUNOLOGIA BASICA
MANUAL DE PRACTICAS INMUNOLOGIA BASICA

CONCLUSIONES:
 Las pruebas serológicas han tenido un gran desarrollo en las últimas décadas, constituyen una
importante herramienta de diagnóstico y en el manejo de la enfermedad infecciosa. Sin
embargo, se debe tener en cuenta que como todo procedimiento de laboratorio tienen una
utilidad y una limitación, pueden dar resultados falsos positivos o negativos y por tanto los
resultados deben ser valorados dentro del contexto de una correlación clínica.
 Las reacciones de aglutinación involucran una interacción secundaria entre Ag-Ac que llevará a
la aparición de un aglutinado que se visualiza como grumos.
 La ventaja de las reacciones de aglutinación desde un punto de vista de acuerdo a su utilidad
en el laboratorio es que son muy sencillas de realizar, no requieren de ningún equipamiento
para su lectura, son rápidas y fáciles de implementar. Además, son una valiosa herramienta
para diversos estudios serológicos (búsqueda de Acs específicos contra agentes patógenos) y
para la detección de antígenos en fluidos biológicos.
 La sensibilidad y especificidad de los ensayos disponibles en la actualidad para la detección de
la PCR es significativa y depende de la metodología empleada, en algunos casos es compleja
y costosa.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
1. Miguel A. Guzmán.Las pruebas serológicas en el diagnóstico de la enfermedad
infecciosa. Revista de la Facultad de Medicina Universidad Nacional de Colombia,
Colombia:1999 .Vol. 47 (2):89 - 97.
2. Departamento de Microbiología, Parasitología e Inmunología.Guia de técnicas
inmunológicas. Facultad de Medicina de la Universidad de Buenos Aires, Argentina:2019.
3. Guerreiro Hernández AM, Villaescusa Blanco R, Morera Barrios LM, Castro Isaac M,
Cruz Arencibia J, Pérez Llerena CR. Evaluación de un método de aglutinación con látex
para la detección de proteína C reactiva. Rev cuba hematol immunol hemoter
[Internet]. 2009 [citado el 2 de diciembre de 2022];25(1):0–0. Disponible en:
http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-02892009000100008