Realización de una medición

Para realizar una medició n DSC, la celda de referencia se llena primero con tampó n y la
celda de muestra con la solució n de muestra. Estos se calentaron a una velocidad de
barrido constante. La absorció n de calor que se produce cuando una proteína se despliega
provoca una diferencia de temperatura (ΔT) entre las células, dando como resultado un
gradiente térmico a través de las unidades de Peltier. Esto establece una tensió n, que se
convierte en potencia y se utiliza el control de la Peltier para volver Delta T (el diferencial
de temperatura) a 0 ° C. Alternativamente, las células pueden ser permitidas para alcanzar
el equilibrio térmico pasivamente a través de la conducció n.
Generación y análisis de datos
La entalpía de desplegamiento de la proteína es el á rea bajo el pico de DSC concentració n
normalizada y tiene unidades de calorías (o julios) por mol. En ciertos casos, los modelos
termodinámicos pueden ajustarse a los datos para obtener la energía de la Gibb libre (ΔG),
la entalpía calorimétrica (ΔHcal), la entalpía de van't Hoff (ΔHvH), la entropía (ΔS) y el
cambio en el calor capacidad (ΔCp) asociado con la transició n.
DSC es ampliamente utilizado en el descubrimiento y desarrollo de fá rmacos. Aplicaciones
clave incluyen:
Caracterizació n y selecció n de las proteínas má s estables o candidatos potenciales en el
desarrollo bioterapéutico
Estudios de interacció n ligando
Optimizació n rá pida de las condiciones de purificació n y de fabricació n
Fácil determinació n, el rá pido de las condiciones ó ptimas para formulaciones líquidas
Estabilidad rá pida indicando ensayo para proteínas diana a ser utilizado para el cribado
Métodos de Medición
Generalmente, el programa de temperatura para un aná lisis DSC es diseñ ado de tal modo
que la temperatura del portador de muestra aumenta linealmente como funció n del
tiempo. La muestra de referencia debería tener una capacidad calorífica bien definida en el
intervalo de temperaturas en que vaya a tener lugar el barrido. El principio bá sico
subyacente a esta técnica es que, cuando la muestra experimenta una transformació n
física tal como una transició n de fase, se necesitará que fluya má s (o menos) calor a la
muestra que a la referencia para mantener ambas a la misma temperatura. El que fluya
má s o menos calor a la muestra depende de si el proceso es exotérmico o endotérmico.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTIN ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA DE MATERIALES
CURSO: INGENIERIA DE POLIMEROS I
Por ejemplo, en tanto que una muestra só lida funde a líquida se requerirá que fluya má s
calor a la muestra para aumentar su temperatura a la misma velocidad que la de
referencia. Esto se debe a la absorció n de calor de la muestra en tanto ésta experimenta la
transició n de fase endotérmica desde só lido a líquido. Por el contrario, cuando la muestra
experimenta procesos exotérmicos (tales como una cristalizació n) se requiere menos
calor para alcanzar la temperatura de la muestra.
Determinando la diferencia de flujo calorífico entre la muestra y la referencia, los
calorímetros DSC son capaces de medir la cantidad de calor absorbido o eliminado
durante tales transiciones. La DSC puede ser utilizada también para determinar cambios
de fase má s sutiles tales como las transiciones vítreas. La DSC es utilizada ampliamente en
la Industria como instrumento de control de calidad debido a su aplicabilidad en valorar la
pureza de las muestras y para estudiar el curado de los polímeros.
Una técnica alternativa a la DSC es el aná lisis térmico diferencial (DTA). En esta técnica la
magnitud constante no es la temperatura sino el flujo calorífico que se comunica a muestra
y referencia. Cuando muestra y referencia son calentadas de modo idéntico, los cambios de
fase y otros procesos térmicos producen una diferencia de temperatura entre la muestra y
la referencia. Ambas DSC y DTA proporcionan, pues, informació n similar. No obstante, la
DSC es má s utilizada que la DTA.
Curvas DSC
El resultado de un experimento DSC es una curva de flujo calorífico versus temperatura o
versus tiempo. Existen dos convenciones diferentes al representar los efectos térmicos: las
reacciones exotérmicas que exhibe la muestra pueden ser mostradas como picos positivos
o negativos dependiendo del tipo de tecnología o de instrumentació n utilizadas en la
realizació n del experimento. Los efectos sobre o bajo una curva DSC pueden ser utilizados
para calcular entalpías de transiciones. Este cá lculo se realiza integrando el pico
correspondiente a una transició n dada. Así, la entalpía de la transició n puede ser
expresada por la siguiente ecuació n:
ΔH = KA
Donde ΔH es la entalpía de la transició n, K es la constante calorimétrica y A es el á rea bajo
la curva. La constante calorimétrica variará de instrumento a instrumento, y puede ser
determinada analizando una muestra bien caracterizada con entalpías de transició n
conocidas
Aplicaciones
Análisis morfológico de materiales
La calorimetría de barrido diferencial puede ser utilizada para medir varias propiedades
características de una muestra. Usando esta técnica es posible caracterizar procesos como
la fusió n y la cristalizació n así como temperaturas de transiciones vítreas (Tg). La DSC
puede ser también utilizada para estudiar la oxidació n, así como otras reacciones
químicas.
Las transiciones vítreas se presentan cuando se aumenta la temperatura de un só lido
amorfo. Estas transiciones aparecen como una alteració n (o peldañ o) en la línea base de la
señ al DSC registrada. Esto es, debido a que la muestra experimenta un cambio en la
capacidad calorífica sin que tenga lugar un cambio de fase formal.
A medida que la temperatura aumenta, un sólido amorfo se hará menos viscoso. En algún
momento las moléculas pueden obtener suficiente libertad de movimiento para disponerse
por sí mismas en una forma cristalina. Esto es conocido como temperatura de cristalización
(Tc). Esta transición de sólido amorfo a sólido cristalino es un proceso exotérmico y da lugar a
un pico en la curva DSC. A medida que la temperatura aumenta, la muestra alcanza
eventualmente su temperatura de fusión (Tm). El proceso de fusión resulta evidenciado por un
pico endotérmico en la curva DSC. La capacidad para determinar