La cadena de transporte de electrones o fosforilación oxidativa es un proceso que se lleva a cabo
en la membrana interna mitocondrial y está constituida por una serie de complejos enzima- coenzima de óxido reductasas. La actividad del complejo Citocromo c oxidasa puede demostrarse mediante la oxidación de sustancias como la p-fenilendiamina (PFDH 2) en presencia del sistema de citocromos. La succínico deshidrogenasa es una enzima que se encuentra asociada a la membrana interna de la mitocondria, está remueve dos protones y electrones del succinato para dar origen al fumarato, oxidación asociada a la coenzima FAD, que transfiere los electrones a la cadena de transporte de electrones, este proceso es inhibido en forma competitiva con la presencia de otros ácidos dicarboxílicos como el malonato, malato, oxalacético y oxálico, los cuales se unen fuertemente al sitio activo de la enzima, lo que genera la acumulación de succinato. El proceso se puede demostrar mediante el uso de un aceptor de electrones artificial como el azul de metileno, que presenta color cuando se encuentra oxidado e incoloro cuando se reduce, en la medida en la que se vuelve a oxidar la coenzima FAD. Cuando el azul de metileno se encuentra en contacto con el oxígeno del aire, se vuelve a oxidar dando una coloración azul y formando peróxido de hidrógeno, por este motivo el sistema se aísla mediante una capa de aceite.
OBJETIVOS
Analizar la actividad enzimática en las reacciones de óxido reducción.
Determinar cualitativamente la actividad de las enzimas Discutir la importancia de los cofactores y el efecto de inhibidores Conocer e identificar el uso y funcionamiento de la succinato deshidrogenasa en una reacción redox. Conocer e identificar el uso y funcionamiento del Citocromo C oxidasa en una reacción redox.
CONCLUSIÓN
o El efecto del inhibidor es indirectamente proporcional a la concentración de sustrato
o La enzima deshidrogenasa succínica es la responsable de que se lleve a cabo la reducción del FAD y la reacción del succinato a fumarato. o El malonato de sodio es un inhibidor competitivo en la reacción enzimática de la succinato deshidrogenasa o El reduce al azul de metileno 𝐹𝐴𝐷𝐻 2 provocando una decoloración. Bibliografías
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