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Equipo:

BENEMERITA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE PUEBLA


Monserrat Fortis Valera
Samuel Rojas Barcelata
Diego Armando Fras Vzquez

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS


LIC. EN QUIMICO FARMACOBIOLOGO

Es posible apreciar la actividad de la Succinato Deshidrogenasa mediante una reaccin colorimtrica?


INTRODUCCIN

CONCLUSION

La enzima succinato deshidrogenasa o deshidrogenasa del cido succnico es una


Oxidorreductasa que cataliza la oxidacin del succinato para formar fumarato siendo la coenzima el FAD. Esta enzima
se localiza en eucariotes en la membrana mitocondrial interna.

OBJETIVO

Apreciar la actividad de la enzima Succinato deshidrogenasa mediante una reaccin con cambio
de color.

FUNDAMENTOS Y CONCEPTOS

MATERIAL Y REACTIVOS

La succinato deshidrogenasa
cataliza la reaccin estreo especifica de succinato a fumarato:
discusin

2 tubos de ensaye
Bao mara a 50C
Mortero
2 pipetas de 5 ml
Pinzas para tubo de ensaye
1 caja Petri

di

cido succnico al 3%
Azul de metileno al 0.1%
Hgado de pollo
Fenol al 90%
Aceite mineral

FUNCION DE LOS REACTIVOS


La succinato deshidrogenasa tiene un grupo prosttico FAD, el cual funciona para oxidar bioqumicamente a alcanos
como el succinato en alquenos como fumarato.
La deshidrogenacion del succinato produce FADH2 . El H2 cedido por el succinato puede ser transferido del FADH2 a
un colorante susceptible como el azul de metileno que es un sustituyente del aceptor natural de electrones, donde acta
como reductores, que al cambiar su estado redox pasa de coloreado a incoloro o

viceversa.

Si se puede determinar la actividad enzimtica de la succinato deshidrogenasa, ya que el


azul de metileno vira de color en condiciones oxidantes. Adems de que el azul de
metileno acepta electrones del complejo succinatoFADH2 el cual es el indicador para
darnos la reaccin verdosa, y el azul de metileno es reducido por acido succnico, el fenol
inhibe la actividad de la enzima y la desnaturaliza.

* Fenol: desnaturalizar a la protena.


* Azul de metileno: para hacer una deteccin cuantitativa del estado de oxidacin-reduccin. Es un
aceptor electrnico artificial coloreado cuando se encuentra oxidado e incoloro cuando se reduce, en la
medida en que se re oxida la coenzima FAD
* Aceite Mineral: cuando el azul de metileno se encuentra en contacto con el oxigeno del aire se re oxida
tomando la coloracin azul y formando perxido de hidrogeno, por esta razn el sistema se asla
mediante una capa de aceite mineral.

DISCUSION
Se observo que el tubo 1 hubo un resultado positivo ya que como si hay actividad enzimtica por
parte de la succinato deshidrogenasa, ya que esta queda inhibida por el fenol a comparacin del
tubo 2 donde no podemos apreciar ningn cambio de coloracin , esto debido a que la enzima
no esta inhibida y por el cambio de color podemos determinar que la succinato deshidrogenasa
si esta presente.
En el tubo 1 por accin de la oxidacin de succinato catalizada por la enzima succinato
deshidrogenasa pierde dos H+ los cuales son trasferidos al cofactor FAD el cual pasa a FADH2 y de
esta forma reducida pasa al azul de metileno el cual acepta protones y vira de color.
En el caso del tubo 2 como no se aadi fenol la enzima no fue inhibida y por lo tanto esto nos
sirvi de referencia para poder hacer una comparacin de la coloracin obtenida y determinar si
la enzima estaba presente y tenia actividad.

RESULTADOS

FICHAS DE SEGURIDAD

PROCEDIMIENTO
RESULTADOS

Enzima: Son protenas que fungen como catalizadores biolgicos, dando parte a un incremento en las velocidades de
diferentes reacciones qumicas que se llevan a cabo en la clula.
-Coenzima: Se aplica a las molculas orgnicas, generalmente derivadas de vitaminas hidrosolubles, esenciales para la
actividad de numerosas enzimas. Algunas coenzimas estn fuertemente unidas a la porcin proteica de una
determinada enzima; de hecho, la enzima a veces se desnaturaliza cuando se intenta extraer la coenzima. En otros
casos, la coenzima est unida tan dbilmente que una simple dilisis la separa de la parte proteica.

-Oxirreductasa: Son enzimas que catalizan reacciones de xido-reduccin. Transfieren electrones.


Grupo Prosttico: Son molculas orgnicas con unin covalente a la enzima.
Reaccin colorimtrica:es aquella en que el producto de la reaccin es una molcula que, al modificar su estructura
qumica durante la reaccin, genera una molcula que presenta un color.
Flavin Adenin Dinucletido: (abreviado FAD en su forma oxidada y FADH2 en su forma reducida).Es una coenzima que
interviene en las reacciones metablicas de oxidacin-reduccin. Su precursor vitamnico es la rivofavina (vitamina
B2).Su funcin es intervenir como dador o aceptor de electrones o de protones en reacciones metablicas redox.

CUESTIONARIO
1.- Cules son las coloraciones del azul de metileno en sus estados oxidado y reducido?
El azul de metileno tiene una coloracin azul en estado oxidado y es incoloro en estado reducido, esto lo hace un
indicador redox.
2.- Cul es la funcin del fenol en la reaccin?
Desnaturaliza a las protenas; en este caso a la enzima succinato deshidrogenasa, provocando la prdida de su
actividad.
En que va metablica esta involucrada la enzima succinato deshidrogenasa? La oxidacin de succinato a fumarato
est involucrada en la reaccin 6 del ciclo de Krebs; el succinato formado a partir del succinil-CoA es oxidado a
fumarato
por
la
flavoprotena
succinato
deshidrogenasa.