Informe de prácticas de Microbiología

Alumno: Joao Boris Inca Mosquera

DNI: 49245040Q

Práctica 1
Objetivos
El alumno debe aprender a sembrar colonias de microorganismos
y aislarlas.
Metodología
Los medios empleados para el cultivo fueron los siguientes:
- Agar nutritivo

Medio común para cultivar

cualquier microorganismo sin
diferenciarlos.

- Agar MacConkey

Medio selectivo y diferencial para

obtener determinados
microorganismos.

En el Agar MacConkey obtuvimos 4

tipos de colonias.
Ahora si dividimos esas 4 colonias entre el área del móvil
(medido en centímetros) obtenemos:

N = UFC / ÁMóvil , UFC= 4 y ÁMóvil= 0,16 cm2

N= 4 / 0,16 = 25 UFC/ cm²

Es decir, por cada cm² del móvil obtenemos 25 unidades

formadores de colonias.

Conclusiones
Los microorganismos se asientan en cualquier medio de la
superficie terrestre. El alumno deberá usar diferentes medios para
aislar estas colonias y saber que tipos de microorganismos se
asientan en una superficie que se esté estudiando.

Práctica 2
Objetivos
El objetivo es manejar tinciones para localizar los
microorganismos que busquemos en nuestro estudio.

Metodología
Se utilizaron tres tinciones:
-Tinción simple
Se utilizó Safranina.
-Tinción de Gram
Se empleó Cristal Violeta, Lugol y posteriormente Safranina.

-Tinción de esporas (Wirtz)

Se empleó Verde de Malaquita y después Safranina.

Conclusiones
El empleo de diferentes de tinciones permite diferenciar diferentes
microorganismos a la hora de usar el telescopio.
Práctica 3
Objetivos
En esta práctica se deberá usar el muestreador de impactación de
aire y también aislar la bacteria Vibrio harvey que es luminiscente.

Metodología
Se usa el muestrador de impactación de aire para calcular la
UFC/m³.

Según marcó en el laboratorio indicó que era

de 6 UFC. Suponiendo que 100 L es igual a
0,1 m³, calculamos.

6 / 0,1 = 60 UFC/m³ , por tanto el laboratorio

donde se llevaron a cabo las prácticas cae en
la categoría de contaminación baja en cuanto
a bacterias (<100 UFC/m³).

La otra subpráctica consistía en aislar la bacteria Vibrio harvey a

través de su inoculación en estría sobre un agar. Su emisión de luz
depende de la presencia de O2. Se incubó la placa a 30ºC durante
las 24 h.
Conclusiones
La cantidad de O2 condicionará la bioluminiscencia de la bacteria.
El muestreador es una aparato preciso para medir la
contaminación biológica del aire.

Práctica 4
Objetivos
Se realizarán pruebas bioquímicas para la identificación de
determinados microorganismos, en esta caso la especie
Citrobacter treumdii.

Metodología
En primer lugar se realizó la prueba de oxidación-frementación de
azúcares. Se inoculó la bacteria Citrobacter treumdii por picadura
en dos tubos que contenían el medio Hugh-Leifson cuyo indicador
de pH era azul de bromitol.
Posteriormente se realizó la prueba de la catalasa.
Se debía comprobar si el microorganismo problema, en presencia
de la catalasa, desdoblaba el H2O2.

Para finalizar la práctica se hizo la prueba de KIA.

Con esta prueba se determinó si la muestra problema requería de
O2, si utilizaba tanto la glucosa como la lactosa, si usaba la
peptona como fuente de carbono y ver si producía H2S y gas.
La siguiente tabla muestra lo resultados que obtuvimos:
Especie Tubo O Tubo F Movilid Catalas Aerobio Glucosa Lactosa H2S Peptona Gas
ad a o
anaerob
io
Citrobac + + + + Anaerob + + + + -
ter (Se io (No
treumdii mueve) facultati produce)
vo

Conclusiones
Nuestra especie problema presenta movilidad, produce burbujas
(catalasa), es anaerobio facultativo, utiliza tanto la glucosa como
la lactosa, utiliza la peptona como fuente de carbono y produce
gas y H2S.
Práctica 5
Objetivos
Los objetivo de esta última práctica consiste en manejar los
indicadores bacterianos (coliformes) y víricos (colifagos).

Metodología
Se utilizó la técnica de la colimetría por el número más probable.
Las tablas siguientes muestran los resultado que obtuvimos.

Tabla precativo
Dilución -1 + + +
Dilución -2 + + +
Dilución -3 + + +
Dilución -4 + - -
Dilución -5 - - -

Tabla confirmativa
Se consideró solamente las diluciones que obtuvieron todas
positivas en la tabla precativa.
Dilución -1 + + +
Dilución -2 + + +
Dilución -3 + + +

Con los resultados de la tabla confirmativa deducimos que el valor

más probable sea mayor a 2.400 de UFP/mL.
Por último se realizó un análisis de un agua residual mediante
indicadores víricos a través de la técnica de agar de cobertura.
Posteriormente se tiñó.

Las zonas no coloreadas son las colonias víricas. Se contó que

había 121 calvas.
Suponiendo que lo diluimos en 0,5 Ml, obtenemos:

UFP/mL = 121*100 / 0,5 = 24.200 UFP/mL

Conclusiones
Dado que UFP/mL>2.400, se deduce que el agua está muy
contaminada.

Bibliografía
Los resultados pertenecen a las hojas de prácticas de
Microbiología de la profesora Teresa Pinto.