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tema 1 Determinaciones para

analizar el metabolismo
del hierro
María Martín-Pérez Gutiérrez

1. METABOLISMO DEL HIERRO


El hierro es un elemento común en la naturaleza. En el organismo se encuentra en
todas las células, participando en varias funciones vitales:
- En el transporte del oxígeno a los tejidos desde los pulmones, formando parte
de la hemoglobina.
- Facilita el uso y almacenamiento del oxígeno en los músculos a través de la
mioglobina.
- Participa como medio de transporte de electrones al interior de las células,
mediante los citocromos.
- Participa en las reacciones enzimáticas en varios tejidos.
Su déficit conduce a una alteración de estas funciones vitales con su correspondiente
morbi-mortalidad.
La cantidad total de hierro en el organismo viene determinada por su ingesta, su
pérdida y por su almacenamiento. En condiciones normales, la media de hierro corporal
es aproximadamente de 3,8 gr. en el hombre y de 2,3 gr. en la mujer.
La mayoría del hierro es funcional, utilizándose el resto en su transporte y
almacenamiento.
Más del 80% del hierro funcional se encuentra en forma de Hb dentro de la masa
de hematíes y el resto formando parte de la mioglobina y de las enzimas respiratorias
intracelulares. El almacenamiento de hierro fundamentalmente es en forma de ferritina, y
en menor parte en forma de hemosiderina, mientras que el transporte de hierro en sangre
se realiza en forma de transferrina.

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La regulación del balance de hierro ocurre principalmente en el tracto gastrointestinal
a través de la absorción.
La capacidad del organismo para absorber el hierro de la dieta depende de:
- La cantidad de hierro corporal
- La velocidad de producción de los hematíes
- La cantidad y tipo de hierro ingerido
- La presencia en la dieta de los factores potenciadores e inhibidores de su
absorción.
El factor más importante que controla su absorción es la cantidad almacenada en
los depósitos de hierro, de tal manera, que el intestino aumenta su absorción cuando los
depósitos están disminuidos y la disminuye cuando son suficientes. La composición de
la dieta es otro factor importante, el hierro en forma de hemo, que se encuentra en los
vegetales y dietas fortificadas con hierro.
Además, existen otros componentes en la dieta que la potencian como la vitamina
C, o que la inhiben como los polifenoles (en ciertos vegetales), taninas (en el té), fitatos
(salvado) o calcio.
La mayoría del hierro utilizado en la formación de hematíes no proviene de la dieta
sino que es reciclado de la destrucción de los propios hematíes.
Se calcula en 1 mg. La pérdida diaria de hierro, en el adulto, a través de las heces
y descamación por piel y mucosas. Las mujeres en edad fértil requieren hierro adicional
para compensar las pérdidas por menstruaciones de entre 0,3 y 0,5 mg. diarios y en el
embarazo aumenta hasta 3 mg. diarios.
Una vez cubiertas las necesidades de hierro para la utilización funcional, el hierro
corporal sobrante, es almacenado en forma de complejo proteínico soluble (fenitina) o
insoluble (hemonidenina).

FUENTES DE HIERRO EN LA DIETA


mg de hierro/1000
Fuentes de hierro en la dieta
calorías
Dieta normal (media) 6
Legumbres 10
Carne y derivados 9
Frutas 7
Cereales 6
Lácteos 1
Aceites y grasas 0
Fig. 8.1. Fuentes de hierro.

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Ambas se encuentran fundamentalmente en el hígado, médula ósea, bazo y músculo
esquelético. Solo una pequeña cantidad de fenitina circula por el plasma. El hierro
almacenado viene a ser entre 1 y 1,4 gr en el varón y de 0,2 a 0,4 gr en la mujer; mientras
que en la infancia es menor. El recién nacido a término nace con una alto hierro corporal
(75 mg/kl), siendo el 25% en forma de depósito; mientras que el pretérmino o bajo peso
nace con igual proporción, pero dado su bajo peso, la cantidad de depósito es muy baja.

REQUERIMIENTOS DE HIERRO/DIA
Requerimientos de hierro/día mg/24h.
Varón 1 mg
Adolescente 2-3 mg
Mujer (edad fértil) 2-3 mg
Embarazo 3-4 mg
Infancia 1 mg
Fig. 8.2. Requerimientos de hierro.

1.1. Transporte y almacenamiento.


El hierro se absorbe como ión ferroso (2+), dentro de la célula intestinal se oxida
a ión férrico (3+). Una vez allí puede ligarse a la fenitina (proteína de almacenamiento) o
pasar al torrente sanguíneo.
- Transferrina: en la sangre el ión férrico se combina con una beta-globulina:
la transfemina.
La transferrina distribuye el hierro entre las áreas de absorción, almacenamiento y
utilización. Los receptores específicos tisulares para la transfemina se han localizado sobre
todo en la médula ósea, en reticulocitos y en precursores eritroides. También en menor
grado, en hígado, placenta y tejidos tumorales.
La transferrina se sintetiza en el hígado y probablemente en linfocitos. Es un
polipéptido monocatenario con un peso molecular de 80.000 d. y con una vida media
de 8 a 10 días.
Cada molécula posee dos lugares de unión para hierro en forma férrica. La unión es
reversible. El hierro ligado a transfemina tiene una vida útil de 90 minutos. Normalmente
1/3 de transferrina está saturada con hierro.
La transferrina también puede transportar otros metales, que se encuentran en
el organismo (cromo, cobre, zinc, cobalto y magnesio). Por otro lado, el hierro también
puede ser transportado por otras proteínas, aunque en muy poca cantidad y cuando la
saturación de transferrina es superior al 50%.

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- Ferritina: la ferritina es una proteína soluble en agua, de alto peso molecular,
que sirve para acumular hierro; la parte proteica se llama apofemitina.
Cada molécula puede ligar de 4.000 a 5.000 átomos de hierro y su síntesis
se estimula por la presencia de hierro. Su peso molecular es de 440.000 a
450.000 daltons. Se encuentra en todos los tejidos, pero especialmente en
el hígado, bazo y médula ósea.
No se trata de un solo tipo de proteína, sino de un grupo de proteínas.
La proteína sérica es una isofenitina presente en suero en concentraciones muy
bajas. Su cuantía es proporcional a los depósitos tisulares. Su concentración varía en el
sexo y con la edad, pero su valor es más constante que el del hierro.
- Hemosiderina: es una proteína almacenadora de hierro, contiene
aproximadamente un 37% de su peso en hierro.
Es una forma cristalina insoluble y amorfa de complejo fijador de hierro. Se cree
que puede ser una forma degradada en femitina. Se pone de manifiesto mediante la tinción
de Perlo o de azul Prusia, formando gránulos visibles al microscopio óptico.
El hierro almacenado en forma de hemosiderina se moviliza muy lentamente.
- Ceruloplasmina: enzima que contiene cobre y que cataliza la oxidación del
hierro para ligarse a la transfemina.
- Haptaglobina y hemopexina: son proteínas transportadoras de hierro con
función opuesta a la transfemina ya que retiran el hierro de la circulación
sanguínea cuando se libera da la hemoglobina por hemólisis.

2. TEÓRICAS ANALÍTICAS
Parámetros estudiados en la patología del hierro y técnicas más utilizados en su
determinación:
Para la evaluación del “status” del hierro hay que valorar diversas pruebas que varían
en cuanto a sensibilidad y tipo de información suministrada.

2.1. Índice de hematíes, reticulocitos y extensión sanguínea.


En las anemias por déficit de hierro se observa hipocromía, microcitosis y a veces
priquilocitosis. El porcentaje de reticulocitos es bajo en relación con el grado de anemia.

2.2. Hemoglobina.
Es una proteína que contiene hierro y que le otorga el color rojo a la sangre. Se
encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada del transporte de oxígeno por la sangre

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desde los pulmones a los tejidos y del transporte del dióxido de carbono para su eliminación
del organismo mediante el aire exhalado.
El análisis de la hemoglobina se realiza normalmente en un estudio completo de
hematimetría, con el recuento de glóbulos rojos o hematíes.
Cuando el nivel de hemoglobina en un análisis aparece debajo de los niveles normales
se están describiendo una anemia que puede ser de diferentes orígenes:
- Anemias primarias.
- Cáncer.
- Embarazo.
- Enfermedades renales.
- Enfermedades autoinmunes.
- Hemorragias.
- Linfomas.
- Problemas de alimentación.
Un bajo nivel de hemoglobina suele acompañarse de un nivel de hematocrito bajo.
Si el nivel de hemoglobina aparece alto puede deberse a:
- Cardiopatías.
- Deshidratación.
- Enfermedades pulmonares crónicas.
- Estancias en lugares de mucha altitud.

ANALITO TÉCNICAS UTILIZADAS


- Agentes complejantes cromogénicos:
• Batofenantrolina (540 nm).
Hierro
• Ferrozina.
- Fluorescencia de polarización.
- Inmunodifusión radial.
Transferrina
- Inmunonefelometría.
- Radioinmunoensayo (IRMA,RIA).
Ferritina - Enzimoinmunoensayo.
- Inmunonefelometría.
-Citoquímica sobre extensiones de médula ósea
Hemosiderina con azul de Prusia
(Tinción de Paris).
- Guayaco.
- Ortotolidina.
Hemorragias ocultas en heces
- Benzidina.
- O-dianisima.

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2.3. Hematocrito.
Cuando se centrifuga la sangre total podemos apreciar dos niveles: uno con depósitos
de glóbulos rojos (la mayoría) y otro nivel del plasma total. La relación porcentual entre
ambos es el hematocrito y describe el porcentaje de células transportadoras de oxígeno
con respecto al volumen total de sangre.
El análisis de hematocrito se realiza normalmente en un estudio completo de
hematimetría, con el recuento de glóbulos rojos o hematíes.

Recién nacido 44 a 56 %
A los 3 meses 32 a 44 %
Al año de edad 36 a 41 %
Entre los 3 y 5 años 36 a 43 %
De los 5 a los 15 años 37 a 45 %
Hombre adulto 40 a 54 %
Mujer adulta 37 a 47 % Fig. 8.3. Valores normales de hematocrito.

Un índice bajo de hematocrito puede deberse a:


- Anemia.
- Fallos en médula ósea (radiaciones, tumores.....).
- Embarazo.
- Hemorragias.
- Hipertiroidismo.
- Hemólisis por una transfusión.
- Leucemia.
- Problemas de alimentación.
- Artritis reumatoide.
Un índice alto de hematocrito puede deberse a:
- Cardiopatías.
- Deshidratación.
- Eclamsia (en el embarazo).
- Enfermedades pulmonares crónicas.
- Exceso de formación de hematíes.
- Choque (shock).

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2.4. Plaquetas.
Son células producidas por los megacariocitos en la médula ósea mediante el proceso
de fragmentación citoplasmática, circulan por la sangre y tiene un papel muy importante
en la coagulación.
Para ello forman nudos en la red de fibrina, liberan sustancias importantes para
acelerar la coagulación y aumentar la retracción del coágulo sanguíneo.
En las heridas las plaquetas aceleran la coagulación, además, al aglutinarse obstruyen
pequeños vasos y engendran sustancias que las contraen.
Los valores normales van de 150.000 a 400.000/mm3. La disminución del número
de plaquetas se denomina trombocitopenia y el aumento trombocitosis.
Cuando existe una trombocitopenia aislada, la causa más común es la destrucción
inmune, pero existen trombocitopenias asociadas a un gran número de otras enfermedades
como son:
- Coagulación intravascular diseminada.
- Anemia hemolítica microangiopática.
- Hiperesplenismo (exceso en la función del bazo).
- Disminución de la producción en el caso de anemia aplástica.
- Invasión de médula ósea por enfermedades malignas.
- Quimioterapia por cáncer.
- Púrpura trombocitopénica/idiopática.
- Leucemia.
- Transfusión de sangre.
- Prótesis de válvula coronaria.
- Choque anafiláctico.
- Algunas infecciones que producen hemorragias.
La trombocitosis puede ser secundaria frecuentemente a infecciones, pero existen
otras muchas enfermedades que se asocian con ella y son:
- Anemia por déficit de hierro.
- Enfermedad de Kawasaki.
- Síndrome nefrótico.
- Síndrome post-esplenectomía.
- Traumatismos.
- Tumores.
- Trombocitosis primaria.

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2.5. Hierro sérico.
La determinación de hierro sérico nos indica la cantidad de hierro unido a
transferrina. Se utiliza para evaluar la presencia de una anemia.
La falta de hierro en el organismo se puede deber a la falta de su consumo en la
dieta, la alteración en su absorción intestinal o por aumento de pérdidas.
Si falta hierro en el organismo se disminuye la formación de hemoglobina y los
glóbulos rojos aparecen pequeños, pálidos y se denomina anemia microcítica o hipocroma.
En este caso aparece bajo el nivel de hierro en sangre, la capacidad de captación del
hierro y transferrina estará elevada y la saturación de transferrina baja.
El exceso de hierro puede aparecer en forma de hemocromatosis o hemosiderosis,
con exceso de depósito en diferentes órganos (cerebro, hígado, corazón) causando
enfermedades secundarias.

Niveles normales de Hierro en adultos hombres De 80 a 180 µg/dl.


Niveles normales de Hierro en adultos mujeres De 60 a 160 µg/dl.
Niveles normales de Hierro en niños menores de 1 año De 100 a 250 µg/dl.
Niveles normales de Hierro en niños De 50 a 120 µg/dl.
Fig. 8.4. Valores normales de hierro en suero.

En estos valores puede haber ciertas diferencias por la técnica o por criterios de
normalidad propios de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces
por las unidades a las que se hace referencia. A veces las unidades se ofrecen en mmol/l
ó unidades SI.
Los niveles aumentados en hierro pueden indicar:
- Hemocromatosis.
- Hemosiderosis.
- Anemia hemolítica.
- Hepatitis.
- Saturnismo.
- Cáncer.
- Intoxicación por hierro.
Los niveles disminuidos de hierro pueden indicar:
- Anemia ferropénica.
- Pérdida de sangre crónica.
- Dietas sin hierro.
- Desnutrición.
- Embarazo.

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- Cáncer.
- Hematuria.
- Hipermenorrea crónica.

2.6. TIBC (Capacidad total de Fijación de Hierro).


Mide la capacidad que tiene el suero de transportar hierro. Como en la práctica,
todo el transporte en suero lo realiza la transferrina, podemos considerar la TIBC como
una medida indirecta de la concentración de transferrina.
2.7. Transferrina. Saturación de Transferrina.
Es una proteína del grupo de las globulinas que capta el hierro de la dieta, lo acumula
y transporta, constituyendo la principal proteína fijadora de hierro circulante.
La CTCH (Capacidad de Captación del Hierro y la Transferrina) mide la cantidad
de proteínas que fijan el hierro, por ello, al medir ambas cosas estamos reflejando lo
mismo.
A diferencia de la ferritina que lo que hace es fijar el hierro de los depósitos y no
el circulante.
Cuando hay una falta de hierro aparecerá elevada la CTCH.
La transferrina también puede ser utilizada como factor reactante de fase
aguda, pero en este caso negativo, ya que disminuye su valor en enfermedades
crónicas, inflamatorias, infecciosas y en el cáncer. En cambio, en el embarazo aparece
elevada.
Los valores de transferrina o CTCH no se modifican con el hierro de la dieta, sino
que refleja un funcionamiento del hígado que es el productor de la transferrina y el estado
nutricional en proteínas del paciente.
La Saturación de la Transferrina se calcula mediante una fórmula:
% ST = Hierro Sérico Total x 100
CTCH
Los valores normales de saturación de transferrina son del 20 al 50% para hombres
y del 15 al 50% para mujeres.

Niveles normales de CTCH de 250 a 460 µg/dl


Niveles normales de transferrina
en adultos hombres de 215 a 360 µg/dl
en adultos mujeres de 245 a 370 µg/dl
en niños menores de 1 año de 125 a 270 µg/dl
en niños de 200 a 350 µg/dl
Fig. 8.5. Valores normales de CTCH y transferrina.

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En estos valores puede haber ciertas diferencias por la técnica o por criterios de
normalidad propios de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces
por las unidades a las que se hace referencia.
Los niveles aumentados de CTCH pueden indicar:
- Anticonceptivos orales.
- Embarazo.
- Policitemias.
- Anemia ferropénica.
Los niveles disminuidos de CTCH pueden indicar:
- Falta de proteínas.
- Enfermedades inflamatorias.
- Cirrosis hepáticas.
- Anemia hemolítica o perniciosa.
- Drepanocitosis.

2.8. Hierro de la Médula Ósea (Perls).


En caso de déficit de hierro, la tinción es negativa (ausencia de hierro en
macrófagos).

2.9. Ferritina sérica.


La ferritina es la principal proteína de almacenamiento de hierro en sangre, y es
proporcional a los depósitos de hierro.
Se suele realizar este análisis en el contexto de un estudio de anemia junto con
el hierro sérico, la saturación de transferrina y otros valores hematimétricos (hematíes,
hemoglobina, hematocrito, etc.).

En adultos hombres 12 a 300 ng/ml


En adultos mujeres 10 a 150 ng/ml
En niños menores de 1 año 25 a 500 ng/ml
En niños 7 a 142 ng/ml
Fig. 8.6. Valores normales de ferritina en suero.
En las personas normales el valor de 1 ng/ml de ferritina corresponde a 8 mg de
hierro almacenado. Se utiliza para evaluar la presencia de una anemia e indica la cantidad
de hierro disponible del organismo. Cuando se obtienen los valores del hierro sérico total
y la capacidad de captación de hierro es parte del estudio de una anemia.
Se utiliza para el control de los depósitos de hierro en la insuficiencia renal crónica.

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En estos valores puede haber ciertas diferencias por la técnica o por criterios de
normalidad propios de laboratorios concretos, a veces en el rango de valores y otras veces por las
unidades a las que se hace referencia. A veces las unidades se ofrecen en mg/l ó unidades SI.
Los niveles aumentados de ferritina pueden indicar:
- Hemocromatosis.
- Hemosiderosis.
- Anemia megaloblástica.
- Anemia hemolítica.
- Hepatitis alcohólica o infecciosa.
- Enfermedades inflamatorias.
- Cáncer.
- Colagenosis y enfermedades autoinmunes.
Los niveles disminuidos de ferritina pueden indicar:
- Anemia ferropénica.
- Falta de proteínas.
- Hemodiálisis.

2.10. Protoporfirina libre eritrocitaria.


Se trata de protoporfirina sin hierro. El organismo prepara la parte del grupo hemo
que puede, pero no se le añade el hierro. Su concentración se incrementa en el déficit de
hierro antes de que aparezca la anemia. Otras causas de aumento son:
- Envenenamiento por plomo.
- Porfiria eritropoyética.
- Anemia sideroblástica (algunos casos).

2.11. ZPP (Protoporfirina de Zinc).


Su medida es fluorométrica.
Cuando existe déficit de hierro en la formación de proporfirina, éste se sustituye
por una molécula de Zinc, y cuanto mayor es el déficit, mayor la proporción de ZPP. El
marcador es más sensible que la medición de ferritina, de modo que, con niveles normales
en ésta ya pueden detectarse niveles aumentados de ZPP, que van incrementándose a
medida que disminuye la ferritina.

2.12. Estudio de sangre oculta en heces.


La sangre presente en las heces se puede observar fácilmente como melena, pero
lo más frecuente es que no sea macroscópicamente visible. Su determinación es muy

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importante en el estudio de neoplasias digestivas y en caso de anemias ferropénicas sin
causa evidente.
El principio en que se basa su determinación es que los compuestos hem tienen
actividad peroxidasa y pueden catalizar la oxidación de ciertas sustancias por el agua
oxigenada (guayaco, ortotolidina, bencidina y odianisina).
Un individuo normal pierde cantidades mínimas de sangre por el tracto intestinal, y
además, algunos alimentos tienen actividad peroxidasa. Es necesaria por esto una técnica
que detecte cantidades mínimas de sangre pero que a la vez no origine falsos positivos.
Como las muestras no son homogéneas y el sangrado puede ser intermitente, se
recomienda la detección en tres muestras de días distintos y tras una dieta de 3-4 días sin
carnes, pescados ni hortalizas.

3. ASPECTOS PRÁCTICOS
3.1. Sideremia.
La extracción debe realizarse sin causar hemólisis y a una hora temprana de la
mañana para reducir las fluctuaciones horarias ya que los valores de Sideremia están
más elevados por la mañana. Las muestras hemolizadas pueden alterar los resultados.
Cada miligramo de hemoglobina contiene 3,4 mg. de hierro. La liberación del hierro de la
transferrina puede también liberar el hierro de la hemoglobina dándonos valores falsamente
elevados de sideremia.
El material y el agua que vaya a utilizarse en la técnica ha de estar libre de hierro.

3.2. Proteínas de fase aguda.


Tanto la ferritina como la transferrina son proteínas de fase aguda y asociada a
tumores. En caso de daño celular, la ferritina puede liberarse del citoplasma al torrente
sanguíneo. Esto debe considerarse en la valoración de resultados.

3.3. Sangre en heces.


El hierro libre (de la dieta) no interfiere la determinación (lo que se mide es
hemoglobina), pero la vitamina C en grandes cantidades puede causar falsos negativos.

4. TÉCNICA DE MEDICIÓN DE HIERRO SÉRICO


Los métodos más utilizados son los colorimétricos. La técnica requiere varias
fases:

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a. Separación del hierro de la transferrina: Se efectúa mediante un ácido fuerte,
suele ser ácido tricloroacético 20%.
b. Reducción del hierro de férrico a ferroso mediante un agente reductor fuerte
(hidracina, ácido ascórbico, ácido thioglicólico o hidroxilamina).
c. Reacción colorimétrica: El hierro ferroso reacciona con un compuesto
complejante del hierro capaz de generar color. Los compuestos más usados
son la batofenantrolina, la ferrozina y el TPZ (tripiridiltriacina). El tiempo
que se necesita para la formación de color va de 15-60 minutos.
Las técnicas utilizan habitualmente un blanco de reactivo y un blanco de suero
con el fin de reducir las interferencias que se deben a turbidez del suero o presencia de
bilirrubina, así como las debidas a la existencia de color en el cromógeno por envejecimiento
o contaminación.
Debe hacerse un blanco de suero para cada uno de los sueros, de manera que la
corrección se haga respecto al mismo suero y no frente a un suero estándar.
La sideremia se expresa en mg/l o en mmd/l 100ml. de sangre contienen 50 mg.
de Fe (900 mmd).

5. VALORACIÓN DE RESULTADOS
Ver tabla pág. siguiente.

5.1. Estados de déficit de hierro.


Es la causa más común de anemia en el mundo. Es más frecuente en mujeres , niños
y en países subdesarrollados.
Las causas de déficit son:
- Pérdida de sangre fisiológica o patológica.
- Incremento de la demanda.
- Malabsorción.
- Dieta pobre.

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Hierro de
Patología Hierro Sérico TIBC % Saturación Ferritina
depósitos
Déficit de hierro
Disminuido o
(depleción de de Normal Normal Normal Disminuido
ausente
depósitos)

Déficit de hierro
Disminuido o
(Eritropoyesis Disminuido Aumentado Disminuido Disminuido
ausente
ineficiente)

Déficit de hierro Disminuido o


Disminuido Aumentado Disminuido Disminuido
(Anemia) ausente
Anemia de los
Normal o
desórdenes Disminuido Disminuido Normal Presente
aumentado
crónicos

Hemocromatosis Aumentado Aumentado Aumentado Aumentado Aumentado

Envenenamiento
Normal Normal Aumentado Normal Normal
por plomo

El estudio inicial de laboratorio del déficit de hierro incluye: el hemograma completo


con especial atención al VCM y HCM, así como, el examen al microscopio de un frotis de
sangre periférica. Característicamente, la anemia ferropénica es microcítica e hipocroma, y
cursa con una sideremia baja, ferritina baja, TIBC elevada e IST bajo, aunque el parámetro
más específico es la disminución de la ferritina. El diagnóstico de certeza lo da el estudio
del hierro medular mediante la tinción de Perls.

5.2. Estados de sobrecarga de hierro.


En condiciones normales el cuerpo no es capaz de eliminar el exceso de hierro en
distintos órganos, sobre todo en hígado.
El exceso de hierro o hemocromatosis es una enfermedad grave que puede
ser primaria o secundaria a transfusiones repetidas, cirrosis alcohólica y anemias con
eritropoyesis ineficaz.
El parámetro más sensible y precoz es la ferritina. Aumenta también el hierro sérico
y el porcentaje de saturación de transferrina.

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28 Tema 1. Determinaciones para analizar el metabolismo del hierro

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