IDENTIFICACIÓN DE LIPIDOS

HEINNER BLANCO IBARRA, JOSE BURGOS PÉREZ Y MARLON MARTÍNEZ

ARROYO

Informe de laboratorio

Ramon Lozada Devia

UNIVERSIDAD DE SUCRE

FACULTAD DE EDUCACIÓN Y CIENCIAS, DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA

SINCELEJO

2021
OBJETIVOS

Objetivo general:

 Identificar mediante ensayos cualitativos la presencia de lípidos de origen

vegetal y animal.

Objetivos específicos:

 Identificar las reacciones presentes en los productos de las diferentes

reacciones.
 Utilizar tinciones y solventes que indiquen la existencia de lípidos.
 Observar las reacciones que poseen los reactivos al entrar en contacto con
lípidos.

MARCO TEORICO

Los lípidos son un grupo de biomoléculas orgánicas constituidas por C, H y O,

aunque algunos también presentan F, N pero en menor proporción; Su principal
característica es ser hidrófobos en solventes polares (insoluble en agua) y solubles
en disolventes orgánicos, estos tienen funciones muy diversas, siendo en muchos
organismos la principal fuente de almacenamiento o reserva de energía en forma
de aceites y grasas que son derivados de los ácidos grasos. Los triglicéridos
almacenan las calorías no utilizadas en forma de triacilgliceroles, los cuales son los
lípidos más sencillos obtenidos a partir de los ácidos grasos, estando compuestos
por tres ácidos grasos y un glicerol unidos por un enlace éster. Los fosfolípidos y los
esteroles constituyen los principales elementos estructurales de las membranas
biológicas de los seres vivos, formando una capa lipídica que separa el medio
externo del interno.

Debido a sus propiedades los lípidos se pueden identificar por medio de diferentes
pruebas cualitativas:

 Prueba de Solubilidad: Como se dijo anteriormente, los lípidos son

hidrófobos, por lo tanto, las grasas son insolubles en agua. Cuando se agitan
fuertemente en ella se dividen en pequeñísimas gotitas formando una
"emulsión" de aspecto lechoso, que es transitoria, pues desaparece en
reposo, por reagrupación de las gotitas de grasa en una capa que por su
menor densidad se sitúa sobre la de agua. Por el contrario, las grasas son
solubles en los llamados disolventes orgánicos como el éter, benceno, xilol,
cloroformo, etc.

Las moléculas del agua son polares y las del aceite (lípido) son no polares,
debido a las diferentes estructuras y densidades, no hay adhesión entre las
moléculas de agua y la sustancia lipídica. Por lo tanto, estos dos reactivos se
 repelen entre sí frente a una prueba de solubilidad y dan como resultado dos
fases.
 Prueba de Tinción: El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar
específicamente las grasas, porque es lipofílico, es soluble en las grasas. Al
ser de color rojo, cuando se disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado.
La tinta roja colorea a todo tipo de sustancias, en cambio, el Sudan III solo
colorea a los lípidos; Por lo tanto, los tubos con Sudán III y aceite o grasa se
tiñen de rojo anaranjado, mientras que, en tubo con tinta roja, la tinta se irá
al fondo y el aceite o grasa no estará teñido.

 Prueba de Saponificación: Es una prueba para identificar ácidos grasos, se

puede detectar si un lípido es saponificable, mediante la reacción de
saponificación, o formación de jabón. Los jabones se definen químicamente
como, las sales metálicas de los ácidos grasos superiores. La saponificación
es una reacción de un ácido graso (aceite) y una base (NaOH). Las grasas
reaccionan en caliente con el hidróxido sódico o potásico descomponiéndose
en los dos elementos que las integran: glicerina y ácidos grasos; Éstos se
combinan con los iones sodio o potasio del hidróxido para dar jabones, que
son en consecuencia las sales sódicas o potásicas de los ácidos grasos. En
los seres vivos, la hidrólisis de los triglicéridos se realiza mediante la acción
de enzimas específicos (lipasas) que dan lugar a la formación de ácidos
grasos y glicerina.
  Prueba de Lieberman-Burchard: Sirve para identificar colesterol o
ergosterol; Se basa en la reacción coloreada (verde) que dan aquellas
sustancias que tienen como núcleo el ciclo pentanoperhidrofenantreno. El
colesterol reacciona con anhídrido acético y ácido sulfúrico concentrado; Se
produce una pérdida de agua y una protonización del colesterol y se
constituyen en medio anhidro polímeros de hidrocarburos no saturados de
intenso color verde azulado. Para ergosterol es positiva si muestra una
coloración roja.

La reacción de Lieberman-Burchard se realiza en general en un medio ácido

fuerte constituido por ácido sulfúrico, ácido acético y anhídrido acético; En la
reacción, el colesterol sufre una oxidación gradual, formándose en cada
etapa una molécula de colestapolieno que posee un doble enlace adicional
con respecto al compuesto del cual deriva. La etapa inicial de la reacción de
Lieberman-Burchard consiste en la protonación del grupo OH del colesterol,
con la consiguiente pérdida de agua obteniéndose el ión carbonio 3,5 -
colestadieno que constituye el primer paso de la reacción de color. La
oxidación secuencial de este ion carbonio alílico por el SO2 produce un ácido
colesta-hexano -sulfónico cromóforo con máximos de absorbancia a 620 nm.

PROCEDIMIENTO
RESULTADOS

Tabla 1: prueba de solubilidad con aceite vegetal y grasa animal con reactivos
como el éter y agua.

Lípido Reactivos Observaciones

Aceite vegetal 2 ml de éter Se observó una coloración lechosa.

Grasa animal 2 ml de éter Se observó una coloración lechosa.

Aceite vegetal 2 ml de agua No se observó una coloración, se podían

ver las sustancias por separados.

Grasa animal 2 ml de agua No se observó una coloración, se podían

ver las sustancias por separados.

Tabla 2: Ensayo de tinción en diferentes muestras de lípidos utilizando como

reactivo Sudan III y tinta roja.

Lípido Reactivos Observaciones

Aceite vegetal Gotas de Sudan III Se observó una coloración rojiza intensa.

Grasa animal Gotas de Sudan III Se observó una coloración rojiza intensa

Leche Gotas de Sudan III Se observó una coloración rojiza intensa

Aceite vegetal Gotas Tinta roja Se observó una suspensión de la tinta en

el aceite vegetal.
Tabla 3: Prueba de Saponificación con grasa animal utilizando NaOH al 20%.

Lípido Reactivos Observaciones

Una vez terminado el baño de maría

se pudo observar diferentes fases, una
Grasa animal 2 ml de NaOH al 20% acuosa, una jabonosa y la otra fase
aceitosa.

Tabla 4: Prueba para identificar colesterol mediante el ensayo de liaberman-

Burchard.

Lípido Reactivos Observaciones

Cloroformo + Se pudo observar una tinción verde

anhídrido acético + azuloso indicando positivo para
Yema de huevo ácido sulfúrico colesterol

ANALISIS DE RESULTADO

 El éter es un disolvente orgánico apolar con una densidad de 0,713 g/ml y

una constante dieléctrica o polaridad baja cuantificada en 4.3 por lo tanto esto
lo hace tener afinidad tanto para el aceite vegetal como el animal a
consecuencia de que estos lípidos presentan baja solubilidad debido a su
estructura hidrocarbonada; En términos simples el aceite animal y vegetal los
componen moléculas apolares sin carga eléctrica por lo tanto son solubles
en solventes no polares tal y como lo es el éter. Mientras que el agua al
mezclarse con los aceites anteriormente dichos no posee esa afinidad debido
a la diferencia de solubilidad, el agua es un disolvente con un alto grado de
polaridad, sus moléculas están compuestas por átomos de oxígeno e
hidrógeno unidos, dicho esto el oxígeno es más pesado y más pequeño que
el carbono, de modo que un volumen de moléculas de agua es más pesado
que el mismo volumen de moléculas de aceite. Dicho de otra manera, los
lípidos presentan hidrofobicidad en solventes polares e hidrofilidad en
solventes apolares.

 El Sudán III es un colorante lipófilo (soluble en grasas), los lípidos como el

aceite vegetal y animal se colorean selectivamente de rojo intenso
demostrando prueba positiva para presencia de esta biomolécula
hidrofóbica, Así mismo la leche al ser un alimento que posee una gran
 cantidad de ácidos grasos, la prueba resulta positiva ya que al teñirse con el
Sudán III se torna de color rojo. Mientras que la tinta roja (sin propiedades
hidrofóbicas) al agregarla con el aceite vegetal se termina yendo al fondo y
es notoria la diferenciación entre las dos sustancias ya que no se mezclan.

 Los lípidos saponificables son todos aquellos que en su estructura están

compuestos por ácidos grasos, estos serían los triacilgliceridos, ceras,
esfingolipidos, estos poseen enlaces éster y pueden hidrolizarse. En el
proceso de hidrolisis de la grasa, dicha grasa animal reacciona en calor con
el NaOH descomponiéndose en los dos elementos que las integran: glicerina
y ácidos grasos, estos se combinan con los iones sodio del hidróxido para
dar jabones, que son en consecuencia las sales sódicas de los ácidos grasos.
Ante esto aparecen tres fases en las que se encuentran: una fase sobrante
junto con la glicerina formada, otra intermedia semisólida que es el jabón
formado y una superior lipídica de aceite inalterado, para finalizar se agrega
agua en verificación de las propiedades espumantes de la fase del jabón.

 El ensayo colorimétrico de lieberman-burchard muestra prueba positiva para

colesterol debido a la presencia de un tono verde claro al finalizar el proceso.
Este color es resultante del grupo –OH del colesterol al reaccionar con los
reactivos y el aumento de la conjugación de la instauración en el anillo
fusionado adyacente puesto que este ensayo se evalúa con anhídrido acético
y ácido sulfúrico.

CONCLUSIONES

 La estructura química básica de los lípidos consiste en cadenas

hidrocarbonadas con muchos enlaces C-C y C-H y por lo tanto estos enlaces
no poseen polaridad, es decir no existe interacción con las moléculas polares.

 Los ésteres de ácidos grasos sufren hidrólisis en presencia de un alcalino

como el NaOH. Esta hidrólisis conduce a la liberación del alcohol y a la
formación de sales de ácido graso o jabones.

CUESTIONARIO

1. Cuál es el fundamento de todas las pruebas realizadas.

Prueba de Solubilidad: Como se dijo anteriormente, los lípidos son hidrófobos, por
lo tanto, las grasas son insolubles en agua. Las moléculas del agua son polares y
las del aceite (lípido) son no polares, debido a las diferentes estructuras y
densidades, no hay adhesión entre las moléculas de agua y la sustancia lipídica.
Por lo tanto, estos dos reactivos se repelen entre sí frente a una prueba de
solubilidad y dan como resultado dos fases.
Prueba de Saponificación: La saponificación es una reacción de un ácido graso
(aceite) y una base (NaOH). Las grasas reaccionan en caliente con el hidróxido
sódico o potásico descomponiéndose en los dos elementos que las integran:
glicerina y ácidos grasos; Éstos se combinan con los iones sodio o potasio del
hidróxido para dar jabones, que son en consecuencia las sales sódicas o potásicas
de los ácidos grasos.

Prueba de tinción: Los lípidos se colorean selectivamente de rojo-anaranjado o

coloración rojiza con el colorante Sudán III.

Prueba de Liebermann-Burchard: El colesterol reacciona con anhídrido acético y

ácido sulfúrico concentrado; Se produce una pérdida de agua y una protonización
del colesterol y se constituyen en medio anhidro polímeros de hidrocarburos no
saturados de intenso color verde azulado.

2. Escriba las reacciones de todas las pruebas realizadas.

Prueba de Saponificación:

Los ésteres de ácidos grasos sufren hidrólisis en presencia de un álcali. Esta

hidrólisis conduce a la liberación del alcohol y a la formación de sales de ácido graso
o jabones:
3. En qué consiste el proceso de saponificación

Saponificación es la síntesis del jabón a partir de la reacción química de aceites o

grasas en un medio alcalino, que bien pudiera ser el hidróxido de sodio en un medio
básico.

La reacción consiste en la hidrólisis en medio básico de las grasas o lípidos, que se

descomponen en sales de potasio o sodio (jabones) y glicerina, como se muestra a
continuación:

Ácidos grados + Solución alcalina = Jabón + Glicerina

La misma ocurre con desprendimiento de calor, elemento muy necesario para lograr
un producto de calidad, por ello mientras mayor sea el calor producido por la
reacción mayor calidad tendrán los jabones producidos (transparencia y limpieza),
aunque esta reacción rara vez produce el calor necesario por lo que se hace muy
conveniente suministrárselo para que la neutralización de los ácidos grasos ocurra
completamente lográndose así una mayor calidad en el producto. Los lípidos que
pueden intervenir en la reacción son los saponificables que serían aquellos que
estén compuestos por un alcohol unido a uno o varios ácidos grasos (iguales o
distintos). Esta unión se realiza mediante un enlace éster, muy difícil de hidrolizar.
Pero puede romperse fácilmente si el lípido se encuentra en un medio básico. En
este caso se produce la saponificación alcalina.

4. Cómo se define un jabón.

El jabón básicamente es una sal sódica o potásica resultante de la reacción química

entre una y un lípido, esta reacción se denomina saponificación. El lípido puede ser
de origen vegetal (como el aceite de coco) o animal (como la manteca de cerdo). El
jabón es soluble en agua. Por sus propiedades detersivas se utiliza para el lavado
de ropa, corporal, etc.

Los ácidos grasos que se utilizan como materia prima del jabón son los siguientes:

 Aceites vegetales: coco, soja, maíz, oliva, lino, algodón.

 Aceites animales: de pescado, grasas animales.

5. Por qué los lípidos son insolubles en agua

El agua está compuesta por un átomo de oxígeno y dos de hidrógeno a su alrededor,

unidos entre sí por un enlace de hidrógeno. El núcleo de oxígeno es más grande
que el del hidrógeno, presentando mayor electronegatividad. Como los electrones
tienen mayor carga negativa, la transacción de un átomo de oxígeno tiene una carga
suficiente como para atraer a los de hidrógeno con carga opuesta, uniéndose así el
hidrógeno y el agua en una estructura molecular polar.

Por otra parte, los lípidos son largas cadenas de hidrocarburos y pueden tomar
ambas formas: cadenas alifáticas saturadas (un enlace simple entre diferentes
enlaces de carbono) o insaturadas (unidos por enlaces dobles o triples). Esta
estructura molecular es no polar. Los enlaces polares son más energéticamente
estables y viables, por eso es que las moléculas de agua muestran una clara
afinidad por los demás. Pero, por el contrario, las cadenas de hidrocarburos no son
capaces de establecer un grado sustancial de afinidad con las moléculas de agua y
entonces no se mezclan. Los lípidos son insolubles en agua porque no hay adhesión
entre las moléculas de agua y la sustancia lipídica.

Dicho de otro modo y de forma más simple: los lípidos son insolubles en agua
porque sus moléculas son no polares y entonces no son atraídas por las del agua.

6. Por qué los lípidos se colorean con sudan III.

El Sudán III es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas,
porque es lipofílico, es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se disuelve
tiñe las grasas de color rojo anaranjado.

7. Qué aplicación puede cumplir la prueba de Liebermann-Burchard.

La prueba de Liebermann-Burchard o anhídrido acético se puede utilizar para la

detección de colesterol. La formación de un color verde o azul verdoso después de
unos minutos es positiva.

8. Por qué los Lípidos no se pueden definir de acuerdo a su estructura

Porque son compuestos muy diversos debido a su estructura molecular: algunos

son rígidos, otros son flexibles y por lo general tienen cadenas unidas unidas
mediante puentes de hidrógeno. Los diferentes tipos de lípidos pueden tener
estructuras distintas y, por lo tanto, diversas funciones en los organismos.
9. Describa las diferentes estructuras químicas que se presentan en los lípidos

 Ácidos grasos.- Aunque se encuentran en estado libre en la naturaleza

en pequeñas cantidades, son componentes moleculares (sillares
estructurales) de muchos de los lípidos comunes.
 Lípidos saponificables.- Son lípidos que contienen ácidos grasos unidos
mediante enlaces de tipo éster a otro componente molecular que varía
según los tipos.
 Lípidos no saponificables.- En general, no contienen ácidos grasos como
componentes moleculares o, al menos, no están unidos mediante enlaces
éster a otros componentes.

10. Cuál es la función biológica de los lípidos

Los lípidos cumplen funciones diversas en los organismos vivientes, entre ellas la
de reserva energética (como los triglicéridos), la estructural (como los fosfolípidos
de las bicapas) y la reguladora (como las hormonas esteroides).

Referencias
 Anagua, D. (s.f.). Lípidos: Informe de Laboratorio. Obtenido de
Monografias.com: https://www.monografias.com/docs113/informe-
laboratorio-lipidos/informe-laboratoriolipidos.shtml

 http://www.ehu.eus/biomoleculas/lipidos/lipid1.htm

 Clavo Valdivieso, L., & Ramírez Vega, S. (s.f.). Composición química de

órganos de cobayos de altura. Obtenido de
https://sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtualdata/Tesis/Salud/Ramirez_V_S/cap2.
pdf

 Estructura y polaridad de los lípidos. (s.f.). Obtenido de Biomodel:

http://biomodel.uah.es/model2/estructura/estructura_2D.htm

 Pino, F. (s.f.). ¿Por qué los lípidos son insolubles en agua? Obtenido de
Vix: http://www.vix.com/es/btg/curiosidades/4036/por-que-los-lipidos-son-
insolubles-enagua
 Practica #3 Lípidos. (2018). Obtenido de UNIVERSIDAD NACIONAL DE
SAN JUAN:
http://dea.unsj.edu.ar/quimica2/LABORATORIO%203%20LIPIDOS.pdf

 PRÁCTICA :DETERMINACIÓN DE LÍPIDOS. (s.f.). Obtenido de

https://www.edu.xunta.gal/centros/iesquiroga/system/files/inicio/depart/biolo
xia/materi albio/labbio2bac/lipidos.pdf

 Química Biológica I TP 3 LÍPIDOS. (s.f.). Obtenido de

http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/quimicabiologica1/wp-
content/uploads/2010/08/TPLIPIDOS.pdf

 Regla, I., Vázquez Vélez, E., Cuervo Amaya, D. H., & Neri, A. C. (s.f.). La
química del jabón y algunas aplicaciones. Obtenido de Universidad
Nacional Autónoma de México:
https://www.revista.unam.mx/vol.15/num5/art38/

 Sanz Tejedor, A. (s.f.). Tecnología de grasas, aceites y ceras. Obtenido de

https://www.eii.uva.es/organica/qoi/tema-02.php

 Saponificación. (s.f.). Obtenido de EcuRed:

https://www.ecured.cu/Saponificaci%C3%B3n

 https://www.monografias.com/trabajos101/lipidos-funciones/lipidos-
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%20diversas,(como%20las%20hormonas%20esteroides).

 https://proteopedia.org/wiki/index.php/L%C3%ADpidos_estructura_y_clasifi
cacion

 https://concepto.de/lipido/