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blanca.ortiz@udea.edu.

Papel de las chaperonas


In vitro

Concentracin estimada de protenas de una clula tpica = 300 mg/ml

DnaJ: 41 kDa
Chaperona

Factor
GrpE: 23 kDa

14 sub-unidades idnticas
2 anillos de 7 unidades c/u

Dominio apical
aas hidrofbicos

Dominio ecuatorial
Bolsillo unin ATP

Mas heterogneo en
secuencia y estructura
Anillos entre 8 y 9

Ausencia de GroES

Eucaritica
(Tailless complex polipeptido-I)

Complejo multiproteico denominado:


foldosoma
No acta en polipptidos nacientes.
Acta en protenas con seal de traduccin:
Receptores de hormonas esteroides
Sealizacin de quinasas
Factores de transcripcin
Es altamente abundante en clulas eucariotas 2% prot. Citoslicas
Chaperona dependiente de ATP
Maquinaria multichaperona en el citosol:
Hsp70
Peptidil-propil-isomerasas
Otras cochaperonas

P23 Co-chaperona
Estimula hidrlisis ATP
Dependiente de disociacin
Hsp90/sustrato

Tamao de la cavidad: 2.5 a 5.5 nm


En GroEL: 6.5 a 8.0 nm

Dominio de
unin al ligando
INESTABLE

Drosophila

No permite la
unin a DNA

Factor de transcripcin (HSF)1 bajo condiciones de NO estrs.

Regulacin de la
expresin del monmero
INACTIVO
Humanos

P
R
O
T
E
A
S
O
M
A

Proteasoma

- (Ornitina decarboxilasa)

NF-B

Funciones de Proteasoma
poli-ubiquitinacin
Degradacin de protenas, despus de cumplir su funcin.
Degradacin de protenas anmalas, control de calidad
Activacin de procesos celulares, mediante degradacin de
protenas inhibitorias criticas, ej: ciclo celular.
Metabolismo, ejercicio, msculos requieren aas para convertirlos
en glucosa y quemar energa.
Sistema inmune, generando pptidos blancos que sean reconocidos
por este. Bazo y ndulos linfoides = Inmunoproteasoma.
Comunicacin clula/clula
Endocitosis
Trascripcin
Reparacin DNA
Traduccin de seales
Apoptosis

Va UBIQUITINA PROTEASOMA - Compleja

Involucra 100 componentes (hasta ahora)

Proteasoma = 30 sub-unidades diferentes


ubiquitina dependiente
ATP dependiente
Estructura compleja, maquinaria enzimtica

Mayor proteasa no-lisosomal en clulas eucariotas.


30.000 proteasomas/clula

19S Regulador

Reconoce sustratos poli-Ubiquitina


Actv. Isopeptidasa, corta la Ubiquitina
Abre el poro de 20S
Actividad antichaperona, desdobla protenas.

2 Mda - 30.3S
(-) hidrofbica

V 84 nm3 - 70 kDa
Micrografa inmuno-electrnica
20S de placenta humana

45 nm long
CAP-19S 18 protenas
(25 a 110 kDa = 700 kDa)

Proteasoma 20S
Levadura

H3N - C - COO
H - C - OH

CH3

1(Pre3) Peptidil glutamil hidrolasa. Reconoce sec. despus de aas


cidos
2(Pup1) Tripsina. Reconoce sec despus de aas bsicos
5(Pre2) Quimotripsina. Reconoce despus de res. hidrofbicos

The enzyme contains three different catalytic activities, a chymotrypsin-like, a


trypsin-like and a peptidyl glutamyl peptide hydrolysing activity. These three
different activities are formed by three of the seven different -subunits. In
all three of these -subunits an aminoterminal threonine is the catalytically
active amino acid.

Funciones de mono-ubiquitinacin
Modificaciones regulatorias

Transcripcin
Funcin histonas
Trfico de protenas a travs de membranas,
blancos para los lisosomas
Sealizacin para receptores endocticos

Ubiquitina:76 aas (eucariotes. Coo G/K)

E1: Enz. activadora de Ubiquitina (1 sola enzima E1. eu.)


E2: Enz. Conjugadora de Ubiquitina, ATP, reaccin alta E, thiol-ester
(10 a 30 E2s eu.)
E3: Ligasa de la protena-Ubiquitina, parece que es el nico
componente sujeto a regulacin. (> que E2)
E4: Factor conjugador de cadenas de poli-Ub. Elongacin de la cadena

.
Activadora

Conjugadora Ligasa

Unin tioester

G76

K48
Enz. deubiqutinante

Estructura Jerrquica del sistema ubiquitina

Proteasoma

GroEL

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