Creación de un nanoacarreador con

ácido poliláctico-co-glicólico para la

liberación controlada de atorvastatina
como tratamiento adyuvante de
leucemia mieloide aguda

Biofarmacéutica II

Noviembre 2022

Equipo 1
Grupo 72
Mariana Beauregard
Amelia Flores
Andrea Hernández
Ana Fernanda Rojas
Vladimir Thompson
 Contenido
Introducción: problema y antecedentes
01
Metodología
02
Resultados y Análisis
03
Mejores en la
04 experimentación

05 Perspectivas a futuro

2
Introducción
3
 Problema
❏ La leucemia mieloide aguda (LMA), un cáncer de
la sangre, se caracteriza por el rápido
crecimiento de células sanguíneas anormales en
la médula ósea (mieloblastos).

❏ En 2020, a nivel mundial 21,450 personas

fueron diagnosticadas con LMA y 10,920
pacientes murieron de la enfermedad.

❏ Si bien más del 70% de estos pacientes

alcanzarán la Remisión Completa (RC) después
de la quimioterapia, prácticamente todos estos
pacientes recaen en una mediana de cuatro a
ocho meses sin terapia citotóxica adicional.

(Fakhouri y Al-Sharaeh, 2018)

4
 Antecedentes

❏ La atorvastatina presenta una opción atractiva ya

que pueden prevenir carcinogénesis y potenciar
las actividades de varios agentes antineoplásicos.

❏ El estudio clínico fase II SWOG S0919 demostró una

remisión completa en pacientes con recaída de
LMA al ser tratados con pravastatina, idarrubicina y
citarabina.

(Advani et al., 2014)

5
 Atorvastatina (Atv)

● Estatina de segunda generación.

● Inhibe a la HMG-CoA reductasa

○ Ruta de biosíntesis del colesterol

● Fármaco de categoría II
○ Requiere de un vehículo de
transporte por su extremadamente
pobre solubilidad en agua.
○ Alto metabolismo de primer paso.

● Captación transmembrana
● Actividad pro-apoptótica

(Jiang et al., 2021) 6

 Metabolismo de atorvastatina

Dosis (rango) V.O. por día 10 - 80 mg

Biodisponibilidad (%) 12

Unión a proteínas plasmáticas (%) ≥ 90

Vida media 14 horas

Excreción fecal (%) 90

Excreción renal (%) <2

Metabolismo hepático CYP450 3A4

Solubilidad Lipofílico

(Climent et al., 2021)

7
 Antecedentes

Atorvastatina

(Jiang et al., 2021)

8
Nanoacarreador

● Sistemas de liberación de fármacos

○ Reducir toxicidad
○ Aumentar biodisponibilidad

● Biocompatibles y biodegradables

● Tamaño deseable ≤ 300 nm

● Poliméricas, puntos cuánticos,

metálicas, liposomales, etc.

9
 Ácido poliláctico co-glicólico (PLGA)
1
● Copolímero compuesto por
ácido glicólico y ácido láctico
○ 50:50
○ Éster terminal

● Naturaleza hidrofóbica (ácido

láctico).

● Polímero lineal biocompatible y

biodegradable.

● Aprobado por la FDA.

(Hernández-Giottonini et al., 2020)

10
 Alcohol de polivinilo (PVA)
1
● Las nanopartículas formadas por PLGA se
preparan en presencia de alcohol polivinílico
(PVA) como estabilizador estérico
ampliamente utilizado.

● Es biodegradable y su degradabilidad
aumenta mediante la hidrólisis debido a la
presencia de grupos hidroxilo en los átomos
de carbono.

● Es soluble en agua y tiene una naturaleza

hidrófila.

(Gossmann et al., 2015; Gaaz et al., 2015)

11
Justificación

12
 Justificación

Los estudios de PLGA NP in vitro con células Caco-2 (línea celular de adenocarcinoma humano) e in vivo en ratas
revelaron que la captación de partículas de 100 nm fue más eficiente que las partículas más grandes (500 nm, 1 μm,
10 μm).
(Pridgen et al., 2015) 13
 Liberación de fármaco de un
nanoacarreador de PLGA

● El PLGA se degrada a través de hidrólisis/ erosión tipo “bulk”.

● El modelo de liberación de Korsmeyer-Peppas (1983) derivó una relación simple

que describe la liberación de fármacos de un sistema polimérico. Se usa para
conocer el mecanismo de difusión del fármaco.

● El modelo desarrollado por Baker y Lonsdale (1974) describe la liberación de

fármacos a partir de matrices esféricas. Esta ecuación se ha utilizado para la
linealización de los datos de liberación de varias formulaciones de microcápsulas
y microesferas.
(Hines y Kaplan, 2013)
14
 Objetivos

Principal: Evaluar el tamaño, PDI,

entrampamiento, carga y liberación
de atorvastatina en las
nanopartículas.

Secundario: Caracterizar las

nanopartículas obtenidas para
potencial uso como coadyuvante
para la LMA.

15
Metodología
16
 Metodología
02

Técnica:
Emulsión-Evaporació
Emulsión-Evaporación

17
 Metodología
02
Analizar con Zetasizer

Caracterización
Tamaño de las NPs, PLGANPs y
Emulsión-Evaporació
PDI
n

Auxiliados por los profesores a cargo

18
 Metodología
02
Liofilización
Emulsión-Evaporación

Control: 0%, 5%, 10% y 15% de Manitol como

crioprotector

Con atorvastatina: 0%, 5%, 10% y 15% de

Manitol como crioprotector

Condiciones: -51 °C, 0.06 mbar *

*Auxiliados por los profesores a cargo

19
 Metodología
02

Entrampamiento
Método Indirecto
Emulsión-Evaporació
n

20
 Metodología
02 Entrampamiento
Método Directo
Emulsión-Evaporación

21
 Metodología
02 Entrampamiento
Método Directo
(Liofilización)

22
 Metodología
02 Carga del fármaco

a) b)

23
 Metodología
02
Liberación de
atorvastatina
Emulsión-Evaporación

24
 Metodología
02
Citotoxicidad
Emulsión-Evaporación

25
Resultados y
Análisis
Nanopartículas

27
 Caracterización física
Nanopartículas Lote Tamaño (nm) PDI Potencial Z
(mV)

Control 1 265.2 ± 1.819 0.125 -0.61

2 227.9 ± 0.8 0.011 ± 0.014 -13.6

3 228.7 ± 1.607 0.047 ± 0.035 -13.1

Promedio 240.6 0.061 -9.10

Atorvastatina 1 216.1 ± 4.373 0.058 ± 0.055 -9.62

2 205.5 ± 1.572 0.039 ± 0.029 -7.31

3 237.9 ± 10.34 0.15 ± 0.103 -15.7

Promedio 219.8 0.082 -10.88

28
 Liofilización
Nanopartículas Sin Crioprotector 5% Manitol 10% Manitol 15% Manitol

Atorvastatina

Características: Características: Características: Características:

Se veían cristales Mejores liofilizadas y Tenían humedad Tenían humedad
resuspendidas
en el fondo en el fondo

Control

Características: Características: Características: Características:

parecía que se Tenían Tenían humedad Bien liofilizadas
comprimió más humedad en el en el fondo
fondo
29
 Entrampamiento
Nanopartículas Lote Absorbancia M. Indirecto Concentración %EE

PLGANPs con Primer Lote 0.076 49.74 μg 99.5%

atorvastatina
Absorbancia M. Directo Concentración %EE

Segundo 0.577 205.44 μg 97.9%

Lote

Tercer Lote 0.343 110.41 μg 98.9%

Absorbancia M. Directo Concentración %EE

(Liofilizado)

Segundo 0.61 54.71 μg 99.45%

Lote

30
 Carga del fármaco
Peso de tubo eppendorf de pellet de 1014.2 mg
PLGANPs sin atorvastatina

Peso de tubo eppendorf de pellet de 977.6 mg

PLGANPs con atorvastatina

Peso de atorvastatina 36.6 mg

Carga del fármaco 3.41%

Peso de tubo eppendorf con PLGANPs 1060.5 mg

liofilizadas

Peso de solo el sistema con NPs 50.2 mg

Carga del fármaco 0.24%

%DL=
31
Perfil de liberación

(Li et al., 2016)

32
 Bifásica Bifásica
Monofásica Trifásica
abrupta retrasada
Liberación acumulada de
fármaco in vitro (%)

Figura 1. Cuatro tipos diferentes de sistemas de liberación de fármaco in vitro.

(Yoo y Won, 2020)

● La cinética de liberación de fármaco del lote 2 se ajusta más al modelo bifásico

retrasado.
● El lote 3 se ajusta al modelo bifásico abrupto.
● En el caso de la atorvastatina sola, el cual simula la liberación desde una tableta,
se ajusta más al modelo bifásico abrupto.
33
 Perfil de liberación de fármaco

El lote 3 de PLGANPs con Atv sigue un perfil de

liberación de primer orden. Este resultado coincide
con el obtenido por Li et al. (2016).
34
 Perfil de liberación de fármaco

El lote 2 de PLGANPs con Atv sigue un perfil de liberación de

Korsmeyer Peppas. Este resultado coincide con el obtenido por
Bohrey et al. (2016) al realizar PLGANPs con PVA con diazepam. 35
 Citotoxicidad y viabilidad celular
Muestra Absorbancia % Viabilidad

Blanco 1.94728 N/A

Control (Sin Atorvastatina) 1.47373 100

Stock (19.13 μg/mL) 1.73335 45.1757998

1:10 1.54475 78.6675114

1:100 1.52932 88.2610073

1:100 1.77035 37.3624749

1:1000 1.35245 125.610812

36
Biodisponibilidad y posología

Tableta NPs

Biodisponibilidad 12% 3-4x*

Dosis inicial 80 mg 0.307 mg

Dosis disponible 11.2 mg ???

Frecuencia Cada 24 horas ???

*(Abdelkader et al., 2021)

37
Mejoras

38
 Entrampamiento Carga del
Manufactura fármaco

Liberación Citotoxicidad Caracterización

39
Perspectivas
a Futuro
40
 Vía de administración

Modelo in vivo Funcionalización

41
Conclusiones

42
 Conclusiones
● Se lograron obtener nanopartículas cargadas con atorvastatina
de dimensiones apropiadas para un nanoacarreador.
● Se debe de analizar las mejores condiciones de manufactura.
● Se deben de repetir y hacer por triplicado las pruebas de
caracterización farmacológica.
● Utilizar una línea celular apropiada para el tratamiento buscado.
● Una vez establecido todo esto, continuar con estudios in vivo
para analizar su posible efecto coadyuvante para la LMA.

43
Referencias

44
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49
Extras

50
 PLGA

VENTAJAS:
Biodegradable, biocompatible, aprobado por FDA

DESVENTAJAS
● carga de fármaco relativamente baja y su eficiencia de entrampamiento
● dificultades para controlar la liberación del fármaco encapsulado
● inestabilidad de la formulación

(Han et al., 2016)

51
 PLGA

La función principal de PLGA es

controlar la cinética de la liberación del
fármaco para lograr la liberación
sostenida del fármaco.

Desafortunadamente, la mayoría de las

micro/nanopartículas de PLGA cargadas
con drogas exhiben un inconveniente
común: un estallido inicial descontrolado
del fármaco.

(Liechty et al., 2010)

52
 Degradación de PLGA

Se ha sugerido que los tiempos de

degradación de PLGA 50/50, 75/25 y
85/15 son de 1 a 2, 4 a 5 y 5 a 6 meses,
respectivamente (Anju et al., 2020).

53
 Tamaño de las NPs
En estudios de biodistribución de nanopartículas , se observó que tamaños menores a 300
nm (50 nm, 100 nm y 250 nm) solo se encontraron principalmente en la sangre, el hígado y
el bazo.

(Huang & Zhang, 2017)

54
 Cinética de degradación

La cinética de degradación de las NP poliméricas es regulado por varios factores:

(i) la interacción polímero-agua, ya que cuanto más hidrofílico el material, más rápida
es la tasa de descomposición;
(ii) la cristalinidad del polímero: menor la cristalinidad del material, más rápida la
degradación;
(iii) la temperatura, ya que impulsa la cinética de la reacción;
(iv) la presencia de heteroátomos y/o grupos hidrófilos, que facilita la degradación;
(v) ramificación de cadenas poliméricas y uso de iniciadores en síntesis;
(vi) concentración de polímero, pH y concentración de sal;
(vii) en el caso de PLGA, GA/LA ratio: se ha demostrado que la estabilidad óptima del
polímero en biofluidos se obtiene con una proporción de 50/50 LA/GA

(Han et al., 2016) 55

Curva de calibración de Atorvastatina

56
 Concentración de PVA

Según Feczko, et al. la aplicación de una concentración de PVA demasiado alta

puede causar una disminución en la eficiencia de la carga. Al aumentar la
concentración de PVA al 5% (p/v), se reduce el rendimiento de partículas a
alrededor del 80%, lo que también se refleja en la eficiencia de atrapamiento.

Se encontró que a una concentración de PVA de 0,75% (p/v) la mayoría de las

partículas estaban en el rango de tamaño submicrónico y si el objetivo es fabricar
nanopartículas que fueran fáciles de esterilizar por filtración (<220 nm),
aproximadamente 1% (p/v) de PVA es suficiente. Esto indica que la relación de
masa PLGA/PVA debe estar cerca de 1 para obtener nanopartículas pequeñas y
uniformes con alto rendimiento.

57
 Citotoxicidad

(Fröhlich, 2012)

Dianas para la citotoxicidad de las nanopartículas (NPs):

Generación extracelular de especies reactivas de oxígeno (ROS) pueden dañar físicamente

la membrana plasmática al causar agujeros unirse a proteínas de membrana, canales de
Ca2+ y receptores de membrana induciendo así la señalización oxidativa, aumentando los
niveles de Ca2+ intracelular y activando cascadas de segundos mensajeros. Interferir con el
metabolismo mitocondrial son modos interferencia de la maquinaria de transcripción y
daño oxidativo del ADN 58
 Internalización

Las nanopartículas de PLGA se

internalizan en las células en parte a
través de pinocitosis y también a través
de endocitosis mediada por clatrina.

Las nanopartículas de PLGA escapan

rápidamente de los endolisosomas y
entran al citoplasma dentro de los
primeros 10 minutos. Esto resulta en
el escape de nanopartículas al citosol.

(Danhier et al., 2012) 59

 “Burst release”
Tamaño de Porosidad de PM de Tipo de Capa acuosa
partícula partícula polímero fármaco límite

Bajo PM Hidrofílica
Liberación acumulada
del fármaco (%)

Tiempo

Alto PM Hidrofóbica
Liberación acumulada
del fármaco (%)

Tiempo

● Proporción área superficial a ● Movilidad de

● Solubilidad ● Difusión
volumen cadena
de fármaco ● Disolución
● Distancia de difusión ● Absorción de
en agua
agua

Figura 3. Factores que afectan la liberación abrupta inicial de fármaco de micropartículas de PLGA.

(Yoo & Won, 2020) 60

 Degradación del polímero:
erosión y difusión del fármaco

a) Fármaco en dispositivo cargado

b) Penetración de agua y difusión de fármaco inicial
c) Degradación y erosión a granel o tipo “bulk”
d) Degradación autocatalítica de PLGA y difusión acelerada de fármacos
e) Degradación total y agotamiento de la liberación de drogas

(Hines & Kaplan, 2013)

61
 Tratamiento estándar LMA adultos
Inducción a la remisión Días del ciclo
Citarabina 100 mg/m2 SC, IV para infusión continua de 24 horas 1a7
Daunorrubicina 45-60 mg/m2 SC, IV para infusión de 30 minutos, 1, 2, 3
cada 24 horas durante tres días

Consolidación Días del ciclo

Citarabina 3000 mg/m2 SC, IV para infusión de 3 horas, cada 12 1, 3 ,5 *
horas, por 6 dosis

*Recibirán un ciclo con intervalo de tres a cuatro semanas, considerando su

recuperación hematopoyética. En total se recomienda al menos cumplir con tres ciclos.

(Leyto-Cruz, 2018)
Tamaño:
● Foroozandeh y Aziz (2018), indica que el tamaño idóneo de un nanoacarreador se
ubica en alrededor de menos de 300 nm para asegurar su tránsito libre en sistema
circulatorio y evitar una respuesta inmunológica.

● En el caso de nuestro ensayo, las PLGANPs obtenidas tienen un tamaño menor a

300 nm, de entre 220 y 240 nm promedio y cumplen con esta especificación.

● Li et al. (2017) obtuvieron nanopartículas de PLGA con ATV de 174.7 nm en promedio

mediante el método de emulsión difusión.

● Las PLGANPs con atorvastatina son más pequeñas ya que factores cómo las
interacciones polímero-fármaco, las interacciones fármaco-fármaco y la absorción de
agua, podrían haber ocasionado su menor tamaño (Sánchez et al, 2020)

63
PDI:
● De acuerdo con Danaei et al. (2018), el valor numérico de PDI varía de 0,0 (para una
muestra perfectamente uniforme con respecto al tamaño de partícula) a 1,0 (para
una muestra con poblaciones de múltiples tamaños de partículas).

● En este caso, el PDI de la mayoría de los lotes de PLGANPs se encuentran dentro

de este rango a excepción del primer lote sin atorvastatina (no se realizó bien la
emulsión). 04

64
Potencial Zeta:

● De acuerdo con Chiu et al., (2021) , nanopartículas con

± 20 mV en potencial zeta absoluto son favorables
para que las nanopartículas carguen los fármacos, así
como otorgarles una alta estabilidad.

● En el presente trabajo se obtuvo un potencial zeta de

-10.88 mV promedio, lo cual queda fuera del valor de
referencia anterior. Esto podría afectar la estabilidad e
integridad de las nanopartículas a la hora de la
liberación controlada del fármaco.
04
● Sin embargo, comparando el valor obtenido con el de
Li et al. (2017) (-8.64  ±  0.34 mv), el resultado obtenido
es similar para las PLGANPs con Atv.

65
Liofilización:

● Un buen liofilizado debe mantener las propiedades físicas y químicas del producto
original, y obtener una torta con buen aspecto, corto tiempo de reconstitución, bajo
contenido de humedad residual y buena estabilidad a largo plazo. Además, después
de la liofilización, las nanopartículas deben resuspenderse fácilmente y no
presentar ninguna modificación en la distribución del tamaño de las
partículas.(Fonte et al, 2016)

● En nuestro caso, solamente las PLGANPs con Atv y 5% de manitol cumplieron

con este requisito. Esto se debe a que el incremento de la concentración de
crioprotector, ocasiona una mayor agregación de NPs al resuspenderlas.

66
 Entrampamiento
● La eficacia de entrampamiento de fármacos de las nanopartículas de PLGA
sintetizadas a través del método de emulsión es menor en comparación con
cualquier otro método (Raichur et al, 2014).

● La eficacia de entrampamiento varía entre el 30 al 70%. Li et al. (2017)

obtuvieron un %EE del 71% para PLGANPs con Atv. Por otra parte, en el artículo
de Cespedes (2018) se obtuvo un valor de entrampamiento mayor al 95% cuando
se realizaron PLGANPs con Atv y PEG.

● En nuestro caso, se obtuvo un valor de %EE mayor al 97% que podría resultar de
la insolubilidad de Atv entrando en el núcleo interno hidrofóbico de PLGANPs.
Esto quiere decir que el 97% de la atorvastatina se entrampó en las PLGANPs.

67
 Carga de fármaco

● Cómo lo mencionan Liu et al. (2020), la carga de fármacos de la mayoría de los

sistemas de nanopartículas es relativamente bajo (generalmente menos del 10%).

● En el artículo de Li et al. (2017) la carga de fármaco que obtuvieron fue del 8%, sin
embargo se siguen buscando técnicas para aumentar la carga del fármaco en las
nanopartículas.

● En este ensayo se obtuvo un valor de 3.41%. Según Feczko, et al. la

concentración elevada de PVA puede disminuir la eficiencia de carga del fármaco.

● Desde el punto de vista de la fabricación, se desea lograr la carga de fármaco más

alta posible, pero de acuerdo con Chu et al., (2013) también hay beneficios en el
uso de NPs con una carga de fármaco más bajo ya que tiene un perfil
farmacocinético más favorable

68
 Citotoxicidad

● En nuestro caso las PLGANPs tuvieron una menor viabilidad a la

concentración de atorvastatina de 19.13 ug/ml.

● A menor concentración de atorvastatina mayor viabilidad celular.

● De acuerdo con el artículo Almutary y Sanderson (2016), las partículas pueden

agregarse en la parte inferior de un recipiente de cultivo que evita la tinción de
células por cristal violeta y por consiguiente, no se evalúa correctamente la
citotoxicidad. Así mismo, la citotoxicidad evaluada por cristal violeta ocasiona
lecturas con menor absorbancia en comparación de otras técnicas como MTT.

69
Manufactura de PLGANPs:

● Utilizar PLGA con una terminación ácida para reducir el tamaño de las
nanopartículas, en lugar de usar con ester terminal (Gebreel,2021).

● Evaluar diferentes concentraciones de polímero. El aumento de la concentración

de PLGA podría aumentar significativamente la carga superficial negativa neta de
las NP resultantes (Abdelkader et al, 2021).

● Evaluar diferentes concentraciones de PVA. Modifica la carga y el nivel de

entrapamiento del fármaco.
○ El aumento de la concentración de PVA del 0,5 al 1 % p/v da como resultado
un aumento significativo del tamaño de las partículas. Un aumento
significativo en el % de EE se da cuando la concentración de PVA aumenta
de 0,5 a 1 % p/v (Abdelkader et al, 2021).

70
Para entrampamiento:

● Evaluar la selectividad del sistema. La falta de selectividad, debida a la presencia de

sustancias interferentes, provoca errores sistemáticos en los resultados de ensayo.

● Evaluar el pH de la fase acuosa. El desempeño de la eficiencia de encapsulación en

diferentes pH reveló que la fase acuosa de pH  4 o inferior podría mejorar
significativamente la eficiencia de encapsulación (Li et al, 2016).

● Evaluar nuestra técnica de entrampamiento. Li et al (2016) utiliza HPLC. Realizar

validación del método analítico.

● Después de centrifugar el lote, resuspender en metanol porque la atorvastatina es

soluble en este medio para medir el fármaco libre (Abdelkader et al, 2021).

● Para el método directo, deshacer el pellet por fases (usar primero acetato de etilo para
disolver el PLGA y luego metanol para disolver la atorvastatina). Evaluar diferentes
proporciones de los solventes.
71
Para carga del fármaco:

● Evaluar medir la carga del fármaco con otras técnicas. Li et al (2016) utilizan HPLC.
Realizar validación del método analítico.

● Conocer bien el peso total de las PLGANPs que se producen por cada lote.

Para liberación del fármaco:

● Realizar otro ensayo de liberación para validar el tipo de perfil de liberación (modelo
bifásico abrupto o modelo bifásico retrasado).
● Realizar triplicados
● Usar lotes realizados el mismo día

72
 Caracterización de PLGANPs:

● Evaluar y comparar la sonicación como un método alternativo para la emulsificación. Operti,

et al. 2022, establece la manufactura industrial con sonicación de nanopartículas de PLGA
obteniendo tamaños de 150 ± 50 nm.
● Evaluar la terminación de nuestro polímero, la concentración de PLGA y PVA, así como la
fracción de solvente utilizado para obtener nanopartículas uniformes y reproducibles con
características físicas similares. (Hernández-Giottonini, et al. 2020)
● Determinar la morfología de nuestras nanopartículas con el uso de un microscopio
electrónico de transmisión. De acuerdo con Li et al (2016) se esperaría obtener la siguiente
morfología:

73
Caracterización de PLGANPs:

● Realizar calorimetría diferencial de barrido (DSC) para caracterizar la estabilidad

de las nanopartículas.
● Realizar un análisis de termogravimetría (TGA).

74
Para citotoxicidad:
● Utilizar líneas celulares más adecuadas para el ensayo de citotoxicidad y el
estudio directo de la leucemia mieloide aguda. Como las utilizadas por
Trachtenberg, et al. (2019):
○ KG-1a una línea celular de macrófagos de promieloblastos de médula ósea
de un paciente con LMA.
○ U937 línea celular de leucemia mieloide humana pro-monocítica de linfoma.
○ HL-60 línea celular de promieloblastos aislados de sangre periférica de un
paciente con leucemia.

75
● Analizar un posible cambio de administración hacia vía IV, con
una doble encapsulación para evaluar el efecto coadyuvante de
la ATV en conjunto con la quimioterapia usada normalmente en
la LMA (Fig 1.)

● Evaluar efectos terapéuticos en modelos in vivo de pez cebra

debido a que comparte los mecanismos genéticos y moleculares
de la hematopoyesis con los humanos. O ratón dado que la
hematopoyesis en ratones se ha caracterizado bien y
proporcionan un modelo razonablemente reproducible para
estudiar la patogénesis de la LMA y posibles terapias. (Skayneh,
et al., 2019) .

● Funcionalizar el producto con el uso de ligandos para aumentar

la especificidad a la LMA

(Zhang et al., 2017)

76
 Antecedentes

Se ha identificado que las Adicionalmente, en un

estudio ex vivo con células No hay ensayos clínicos
células LMA aumentan la
de pacientes con leucemia enfocados al uso de
captación de colesterol.
se analizó que la atorvastatina para LMA.
Esto sugiere un mayor
atorvastatina disminuyó la
consumo de colesterol viabilidad de las células
para el tumor y su leucémicas, indicando su
proliferación celular. potencial actividad
antineoplásica.

(Advani et al., 2014)

77
 Metodología
02
Liofilización
Emulsión-Evaporación

78
Distribución del tamaño:

(Li et al., 2016)

79