Departamento Académico de Cursos Básicos

Curso: Bioquímica I

UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR

CARRERA(S): MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

PRÁCTICA DE LABORATORIO

CURSO: Bioquímica I

PROFESOR(A): Muñoz Cabana Milagros Yovana

INFORME DE PRÁCTICA

PRÁCTICA N°: 9

TÍTULO: Determinación de triglicéridos y colesterol

INTEGRANTES: Aguilar Flores Ursula Yanet–100117647@cientifica.edu.pe – 100 %

Santos Valenzuela Anita– 100112886@cientifica.edu.pe – 100 %

Tafur Tembladera Abigail– 100113839@cientifica.edu.pe – 100%

Tello Carrasco Fabiola– 100116888@cientifica.edu.pe – 100%

Vergara Poma Doris – 100116599@cientifica.edu.pe – 100%

HORARIO DE PRÁCTICA

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 07 días de noviembre de 2022

FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 17 días de noviembre de 2022

LIMA, PERÚ

2022
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Curso: Bioquímica I

PRÁCTICA N° 9

Determinación de triglicéridos y colesterol

1. Introducción: La determinación de triglicéridos en plasma constituye un

dato muy importante en el manejo de ciertas dislipidemias. Su incremento en
el plasma constituye un factor de riesgo positivo para aterosclerosis

2. Objetivos
• Determinación del nivel de colesterol en suero sanguíneo.
• Determinación del nivel de triglicéridos en suero sanguíneo.

Fundamento teórico
Los triglicéridos del plasma son hidrolizados por una lipoproteína lipasa (LPL) que
forma como productos glicerol y ácidos grasos. El glicerol en presencia de ATP por
acción del glicerol quinasa es convertido en glicerol – 1 – fosfato, compuesto que es
convertido por el glicerol fosfato oxidasa (GPO) en dihidroxiacetona fosfato y
peróxido de hidrógeno, este compuesto en presencia de 4 – aminofenazona (4 – AF),
clorofenol y peroxidasa (POD) es transformado en una quinonimina de color rojo.

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Fundamento teórico
El colesterol es una sustancia cuyos niveles en la sangre mantienen una estrecha
relación con diversas patologías, por cuyo motivo su determinación puede contribuir
al diagnóstico de: aterosclerosis, mixedema, diabetes mellitus, nefrosis,
hipertiroidismo, etc. La técnica utilizada para la determinación se fundamenta en la
hidrólisis previa de los ésteres de colesterol por la colesterol esterasa, la posterior
acción de la enzima colesterol oxidasa que formará peróxido de hidrógeno en
cantidades estequiométricas y finalmente la participación de la peroxidasa que en
presencia de reactivos químicos formará un compuesto coloreado proporcional a la
cantidad de colesterol existente en la muestra de sangre.

3. Materiales y métodos
3.1 Materiales en la mesa de los estudiantes
• 01 gradilla
• 06 tubos de ensayo 13x100mm
• 01 piseta con agua destilada
• 03 pipetas graduadas o volumétricas de 5mL
• 03 propipetas

3.2 Materiales en la mesa central del profesor

• 01 suero tubo de tapa rosca 2mL
• 01 estándar de triglicéridos frasco 2mL
• 01 reactivo de trabajo para triglicéridos frasco 36mL

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• 01 estándar de colesterol frasco 2mL • 01 reactivo de trabajo para

colesterol frasco 36mL
• 01 espectrofotómetro
• 01 micropipeta 10 – 100 µL y/o de 5 – 50 µL
• 12 puntas descartables respectivas
• 12 cubetas para espectrofotometría
• 01 baño maría 37°C
• 01 vórtex

4. Resultados
Parte experimental colesterol
Paso 1: Se rotula cada tubo de ensayo de forma correcta.

BLANCO CALIBRADOR MUESTRA

Suero o plasma (uL) - - 0.01

Estandar de colesterol - 0.01 -

Reactivo de trabajo 1.00 1.00 1.00

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Paso 2: Mezclar e incubar 5 minutos a 37°.

Paso 3: Luego de ello verter cada tubo en cada cubeta para poder llevarlo al
espectrofotómetro a leer las absorbancias a 505 nm.
Dato: La concentración del standar es 200 mg/dL.
Resultado del espectrofotómetro:
Abs standar: 0.280
Abs paciente: 0.460
Reemplazando:

FC= __200___ x 0.460 = 328.6 mg/dL

0.280

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Parte experimental triglicéridos

Paso 1: Se rotula cada tubo de ensayo de forma correcta.

BLANCO CALIBRADOR MUESTRA

Suero o plasma (uL) - - 0.01

Estándar de TGC (µL) - 0.01 -

Reactivo de trabajo (mL) 1.00 1.00 1.00

Paso 2: Mezclar e incubar durante 5 minutos en baño maría a 37°C.

Paso 3: Luego de ello verter cada tubo en cada cubeta para poder llevarlo al
espectrofotómetro a leer las absorbancias a 520 nm.
Dato: La concentración del standar es 200 mg/dL.
Resultado del espectrofotómetro:
Abs standar: 0.380

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Abs paciente: 0.620

Reemplazando:
FC= __200___ x 0.620 = 326.3 mg/dL
0.380

5. Discusión

El resultado del experimento 1 sobre el colesterol , salió 328.6 mg/dL , lo cual indica
que el paciente presenta hipercolesterolemia, que de acuerdo al valor referencial es
mayor a 200 mg/dL . El resultado del experimento 2 sobre los Triglicéridos, salió
326.3 mg/dL , lo cual indica que el paciente presenta hipertrigliceridemia, que de
acuerdo al valor referencial es mayor a 150 mg/dL. Tener un nivel alto de triglicéridos
en la sangre puede aumentar el riesgo de padecer una enfermedad cardíaca.

Las fuentes de error que puede presentarse en la experimentación 1 y 2 , podría ser

por error en el uso del espectrofotómetro, también podría ser por no colocar la
temperatura adecuada al momento del baño maria.

Los lípidos representan una importante fuente de reserva energética para los caninos
y, en general, para todos los mamíferos, desempeñan funciones de protección frente
al frío y los traumatismos, y ayudan a la formación de enzimas, hormonas y
mensajeros . La fuente principal de colesterol y de triglicéridos procede de la dieta,
aunque en ocasiones estos pueden ser sintetizados por el hígado y otros tejidos .
Las lipoproteínas se encargan del transporte de los lípidos en el plasma para su
posterior metabolismo o almacenamiento . Debido a que el metabolismo lipídico
difiere entre especies, el canino es considerado como patrón HDL, que además se
cree que influye en la protección para enfermedades coronarias que son tan

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comunes en los humanos . Es importante realizar el análisis del perfil Lipídico en los
animales como la especie canina ( perro) para determinar su nivel de colesterol y
triglicéridos , y diagnosticar alguna anormalidad o enfermedad que pueda tener el
animal.

6. Conclusiones

● Se determinó para el caso del primer paciente que el nivel de colesterol está
en 328.6 mg/dL, diagnosticándole así hipercolesterolemia, ya que sobrepasa
los valores referenciales estudiados.
● Se determinó para el caso del segundo paciente que el nivel de triglicéridos
está en 326.3 mg/dL, diagnosticándole así hipertrigliceridemia ya que
sobrepasa los valores referenciales estudiados.

7. Bibliografía

1 Ucm.es. [citado el 17 de noviembre de 2022]. Disponible en:

. https://www.ucm.es/data/cont/docs/261-2018-11-21-
CUADERNO%20DE%20PR%C3%81CTICAS%20DE%20BIOQU%C3%8DMIC
A%20HUMANA-2018-19%20(1).pdf

2 Fbbva.es. [citado el 17 de noviembre de 2022]. Disponible en:

. https://www.fbbva.es/microsites/salud_cardio/mult/fbbva_libroCorazon_cap13.p
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3 Binasss.sa.cr. [citado el 17 de noviembre de 2022]. Disponible en:

. https://repositorio.binasss.sa.cr/repositorio/bitstream/handle/20.500.11764/721/l
ipidos.pdf?sequence=1&isAllowed=y

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4 Llanos C, Marassi E, Díaz R. Edu.ar. [citado el 17 de noviembre de 2022].

. Disponible en:
https://med.unne.edu.ar/sitio/multimedia/imagenes/ckfinder/files/files/Carrera-
Medicina/BIOQUIMICA/lipoproteinas.pdf
5. Schenck Dvm, P. (s/f). Royalcanin.es. Recuperado el 14 de noviembre de
2022,dehttps://vetacademy.royalcanin.es/wp-content/uploads/2019/11/Cap-7-
Hiperlipidemia-canina-causas-y-manejo-nutricional.pdf

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