AGAR CHOCOLATE

FUNDAMENTO
 Es un medio de enriquecimiento.
 Las placas de Agar sangre cocida (chocolate) se usan para cultivo y aislamiento
de microorganismos patógenos, especialmente especies de Estreptococos,
Neisseria spp. y Haemophilus.

COMPOSICIÓN DEL AGAR CHOCOLATE

 Composición (g/litro)
 Sustrato nutritivo (extracto de levadura, peptona, hidrolizado de hígado) 23,0
 sodio cloruro 5,0
 sangre de cordero 65 ml
 Agar-Agar 15,0.
 El hidrolizado de higado y la peptona, otorgan al medio un alto valor nutritivo,
que permite el crecimiento de una gran variedad de microorganismos, aún de
aquellos nutricionalmente exigentes.
 El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
El agregado de sangre al medio de cultivo, en concentración final de 5-10 %,
aporta nutrientes para el crecimiento bacteriano, y permite detectar hemólisis.
 Agentes solidificantes: Los contienen los medios sólidos y semisólidos.
 El agar es el más usado; la gelatina y la albúmina se usan escasamente.

MODO DE ACTUACIÓN
 Este medio contiene una rica base nutritiva, que proporciona unas óptimas
condiciones de crecimiento para
 todos los microorganismos relevantes. El Agar sangre cocida (“Agar chocolate”)
es un medio
 extremadamente rico y se prepara calentándolo después de que la sangre ha sido
añadida.

PREPARACIÓN
 Suspender 40 g del polvo en un litro de agua destilada. Dejar reposar 5 minutos
y mezclar perfectamente hasta obtener una suspensión homogénea. Calentar con
agitación frecuente y hervir 1 minuto. Esterilizar 20 minutos a 121°C. Enfriar a
45-50°C agregar sangre desfibrinada al 5%. Homogeneizar y distribuir en placas
después de añadir la sangre y agitando frecuentemente se mantiene el medio de
cultivo a 80°C por 10 minutos hasta que adquiera un color pardo chocolatado.

EMPLEO E INTERPRETACIÓN
 Inocular la superficie de las placas.
 Incubar bajo condiciones óptimas, usualmente 24 horas a 35 ºC en aerobiosis.
  Neisseria y Haemophilus se incuban hasta 48 horas a 35 ºC en atmósfera
microaerófila bajo
CONTROL DE CALIDAD DEL MEDIO DE CULTIVO
Cepas de ensayo Crecimiento
 Neisseria meningitidis ATCC 13090 Bueno
 Neisseria gonorrhoeae 6545 Bueno
 Streptococcus pyogenes ATCC 21059 Bueno
 Haemophilus influenzae ATCC 19418 Bueno