Universidad Autónoma de Durango Campus

Zacatecas

Reporte de práctica:
ENZIMAS

Bioquímica l y su Laboratorio

Docente
Ivonne Zarai Haro Piñon
Alumna
Ceila María González Ruiz
Fecha
Martes, 11 de octubre del 2022

INTRODUCCIÓN
La cinética enzimática es el campo de la bioquímica el cual se
encarga básicamente de la medición cuantitativa de los índices
de reacciones catalizadas por enzimas y del estudio de los
factores que pueden afectar estos índices.
De manera más específica o aplicada, la cinética enzimática
representa el principal recurso para identificar agentes
terapéuticos que inhiben de manera selectiva procesos
catalizados por enzimas.
 Como se sabe, las enzimas son proteínas que modifican
la velocidad de una reacción química utilizando una molécula
sustrato para transformarla y generar un producto. Por ende, las
enzimas van a poseer sitios de unión a sustratos en donde se va a
llevar a cabo la reacción formando un complejo de enzima-sustrato.
La relación que presentan estas dos moléculas es de gran
importancia debido a que las concentraciones de ambas van a
determinar la velocidad de la reacción.
A nivel biológico, claramente nunca se va a contar con una
concentración infinita de sustrato ni de enzimas por lo que las
velocidades de las reacciones van a estar limitadas a ellas. A pesar
de una alta concentración de sustrato que puede ser
transformado a través de las enzimas, la velocidad de reacción tendrá
un tope a lo cual se le conoce como saturación de la reacción, y es el
momento en el cual se alcanza una velocidad máxima en la
reacción, es decir, la velocidad se vuelve constante debido a la
diferencia en la proporción enzima-producto existentes.

No existe la concentración suficiente para poder catalizar

todas las reacciones y la velocidad se estanca, por lo que se afirma
que la velocidad de la reacción será directamente proporcional a
la concentración del sustrato. Las enzimas poseen una constante de
afinidad (Ka) la cual nos determina que tan rápido puede
reaccionar un sustrato específico con una enzima.

Sin embargo suele ser de mayor conveniencia analizar la

inversa de esta Ka la cual hace referencia a la constante de
Michaeelis-Menten (Km) debido a su práctico análisis metódico.

Esto quiere decir que la Km será inversamente proporcional a

la Ka, si obtenemos un Km elevado sabremos claramente que
la Ka será muy reducida. La Km indica la concentración de sustrato en
donde la velocidad de la reacción es la mitad de la
velocidad máxima, dándonos, como ya se mencionó una muy cercana
aproximación respecto a la Ka que posee la enzima hacia el sustrato.
 METODOLOGIA
Colocar 6 tubos de
ensayo en una gradilla

Rotular 2 tubos
Rotular 2 tubos
Rotular 2 tubos

Agregar 3ml de Agregar 3ml de

agua a los 2 tubos agua a los 2 tubos
Ambiente
Baño María
Agregar 3ml de
Agua Fría
agua a los 2 tubos

Agregar 1 ml de azul
Agregar 1 ml de azul Agregar 1 ml de azul de
de bromotimol a los 2
de bromotimol a los bromotimol a los 2 tubos
tubos
2 tubos

Colocar los dos tubos Colocar los dos

en el Baño María tubos en Agua Fría

Tomar el tiempo de lo que tarda el reactivo en cambiar de color

Al primer tubo, con un popote se le va a soplar hasta que

cambie de color
Al segundo tubo se le va a agregar bicarbonato gradualmente

Observación del color que dio el reactivo y

RESULTADO Y OBSERVACION
el tiempo que tardo en cambiar

(Fotografía de mi compañero poniendo azul bromotimol

en los tubos de ensayo y fue tomada
en el laboratorio de Bioquímica de la Universidad Autónoma de Durango
Campus Zacatecas)

(Fotografía de los tubos

rotulados, con azul bromotimol y agua, fue tomada en el laboratorio de
Bioquímica de la Universidad Autónoma de Durango Campus Zacatecas)

(Fotografía del momento en que mi compañera comenzó a

soplar al tubo que estaba en el baño maría, y fue tomada en el laboratorio de
Bioquímica de la Universidad Autónoma de Durango Campus Zacatecas)
(Fotografía del resultado del tubo Ambiente en el que solo se sopló y fue
tomada en el laboratorio de Bioquímica de la Universidad Autónoma de
Durango Campus Zacatecas)

(Fotografía del resultado del tubo Ambiente en el que se agregó bicarbonato

y fue tomada en el laboratorio de Bioquímica de la Universidad Autónoma de
Durango Campus Zacatecas)
 (Fotografía del resultado del tubo Baño María en el que
solo se sopló y fue tomada en el laboratorio de Bioquímica de la Universidad
Autónoma de Durango Campus Zacatecas)

(Fotografía del resultado del tubo Baño María en el que

se agregó bicarbonato y fue tomada en el laboratorio de Bioquímica de la
Universidad Autónoma de Durango Campus Zacatecas)
 (Fotografía del resultado del tubo de Agua Fría en el que
solo se sopló y fue tomada en el laboratorio de Bioquímica de la Universidad
Autónoma de Durango Campus Zacatecas)

(Fotografía del resultado del tubo Agua Fría en el que se

agregó bicarbonato y fue tomada en el laboratorio de Bioquímica de la
Universidad Autónoma de Durango Campus Zacatecas)
 (Fotografía del tiempo en que cambio el
tubo Ambiente al que solo se le soplo y fue tomada en el
laboratorio de Bioquímica de la Universidad Autónoma de
Durango Campus Zacatecas)
(Fotografía del tiempo en que cambio el
tubo Baño María al que solo se le soplo y fue tomada en el
laboratorio de Bioquímica de la Universidad Autónoma de
Durango Campus Zacatecas)
(Fotografía del tiempo en que cambio
el tubo Agua Fría al que solo se le soplo y fue tomada en el
laboratorio de Bioquímica de la Universidad Autónoma de
Durango Campus Zacatecas)
(Fotografía del tiempo en que cambio el
tubo Ambiente al que se le agrego bicarbonato y fue tomada en
el laboratorio de Bioquímica de la Universidad Autónoma de
Durango Campus Zacatecas)
(Fotografía del tiempo en que cambio el
tubo Baño María al que se le agrego bicarbonato y fue tomada en
el laboratorio de Bioquímica de la Universidad Autónoma de
Durango Campus Zacatecas)
(Fotografía del tiempo en que cambio el
tubo Agua Fría al que se le agrego bicarbonato y fue tomada en
el laboratorio de Bioquímica de la Universidad Autónoma de
Durango Campus Zacatecas)
 AMBIENTE V max/2
Tubo 1 03 : 12 . 30
Tubo 2 00 : 03 . 88

BAÑO MARIA V max/2

Tubo 1 03 : 41 . 78
Tubo 2 00 : 03 . 58

AGUA FRIA V max /2

Tubo 1 01 : 45 . 79
Tubo 2 00 : 35 . 66
OBSERVACIONES
Para esta práctica cabe menciona que es muy importante nuestra capacidad de
precisión y atención, ya que se trabaja soplando durante bastante tiempo por lo
que no se debe perder la concentración.

CONCLUSION
Para concluir se puede decir que la velocidad de una reacción enzimática se
incrementa al aumentar la temperatura dentro de un determinado rango,
alcanzando un valor máximo a la denominada temperatura óptima. A valores
superiores la actividad disminuye debido a que el enzima, como
cualquier otra proteína, sufre procesos de desnaturalización y, por lo tanto, de
inactivación.
La Km es característica de una enzima y particular para un determinado
sustrato y refleja la afinidad de la enzima por el sustrato, por lo tanto
es un parámetro invariable de la enzima. Es decir, si se tiene una enzima y un
sustrato y la afinidad del sustrato es mínima, por gigantesca que sea la
concentración del sustrato, la enzima no creará una mayor de afinidad por el
sustrato.

La Km es característica de una
enzima
particular para un
determinado sustrato y
refleja la afinidad de la
enzima por el
sustrato, por lo tanto es un
parámetro
invariable de la enzima. Es decir,
si se tiene
una enzima y un sustrato y la
afinidad del
sustrato es mínima, por
gigantesca que sea
la concentración del sustrato, la
enzima no
creará una mayor de afinidad por
el sustrato

BIBLIOGRAFIA

Peter J. Kennelly, PhD & Victor W. Rodwell, PhD. Enzimas: Cinética. Cristina
Tapia Montes de Oca, Manuel Bernal Perez, editores. Harper Bioquímica Ilustrada.
30ed. México. McGRAW-HILL INTERAMERICANA EDITORES; 2016. p. 73-87
Martínez Limón, J., Morales Godos, F., & DuránPáramo, E. (2007).
Caracterización cinética de lahidrólisis de sacarosa con invertasa libre
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