ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE JAMÓN COCIDO

E.coli

Material necesario:
-Stomacher y bolsa de stomacher
-10g de jamón cocido
-Papel albal
-Balanza
-Pinzas y tijeras
-Bote con 90ml solución de pectona al 0,1%
-Micropipeta
-Puntas de pipetas esterilizadas azules
-1 tubo de ensayo con 9 ml de solución de pectona al 0,1%
-2 placas de Petri
-50ml agar TBX a 45ºC.
-Rotulador permanente
- Mechero busen.

DÍA 0: Primero homogeneizamos 10g de jamón cocido con 90ml de agua de pectona. Con
esa dilución 10-1, hacemos la dilución 10-2 a un tubo que tiene 9ml de agua de pectona.
Sembramos por duplicado 1ml de la dilución 10 -2 en una placa de Petri esterilizada.
Vertimos 25ml de agar TBX en cada placa y dejamos que solidifique. Se incuba las placas
a 37º durante 4h. Después se incubará a 44º durante 18-20h.
DÍA 1: Pasadas las 22-24h se recogen las placas de la incubadora y se efectúa el
recuento de colonias en las placas que son las que se presentan un color azul verdoso.

Listeria monocytogenes

Material necesario:
- Stomacher y bolsa de stomacher.
- 25 g de jamón cocido
- Balanza
- Pinzas y tijeras
- Papel albal
- 225 ml de caldo Fraser semi
- Un tubo de ensayo con 10 ml de caldo Fraser completo
- Placa de Petri de agar cromogénico para listeria
- Placa de Petri de PALCAM
- Pipetas volumétricas de 1 ml
- Asa de siembra estéril
- Mechero busen
- Rotulador permanente

DÍA 0: homogeneizar 25 g de jamón cocido con 225 ml de caldo (Fraser semi) e incubar a
30ºC durante 24h.

DÍA 1: incluimos 0,1 ml en un tubo de ensayo que contenga 10 ml de caldo Fraser

completo e incubar a 35º-37ºC durante 24 horas.
DÍA 2: sembramos por agotamiento en la placa de Petri del medio de aislamiento (agar
cromogénico para Listeria) e incubar a 35ºC por 24-48 horas. Utilizamos un segundo
medio de aislamiento (PALCAM) el cual incubaremos en atmósfera aerobia durante 42 –
48 h a 35 – 37 °C y efectuaremos la lectura después de 18 – 24 h.

DÍA 4: Visualizamos los resultados obtenidos en el medio de aislamiento (agar

cromogénico para Listeria) y contamos las colonias que hay en la placa. Las colonias
sospechosas de pertenecer a las especies Listeria monocytogenes o L. ivanovii presentan
color azul/verdoso y están rodeadas de un halo opaco.

DÍA 5: Visualizamos los resultados obtenidos en el medio PALCAM y contamos las

colonias que hay en la placa.

Virginia Blanco de la Cruz

Carlota Álvarez Castro