FIJACIÓN DE CO2

►Tres grupos de plantas según el metabolismo fijador de CO2:

 Plantas C3 (metabolismo C3). (≈ 95% de las especies). El CO2 penetra por los
estomas y se fija en el mesófilo mediante el Ciclo de Calvin .
 Plantas C4 (metabolismo C4). Aprox. 3% de especies. Tienen dos tipos de células
fotosintéticas: mesófilo (CO2 + fosfoenolpirúvico (PEP)→ C4 y vaina del haz (C4 → CO2
+ PEP)
 Plantas CAM (metabolismo CAM). Semejante a las C4:
Noche : CO2 + PEP → C4 → Ciclo de Calvin
Día : C4 → CO2 + PEP)

► Las algas toman CO2 en forma de ión bicarbonato y una anhidrasa carbónica acumula
CO2 en el entorno de la rubisco (enzima fijador de CO 2 del ciclo de Calvin).

CICLO DE CALVIN

► Proceso de fijación de CO2, en

el estroma que es el principal
consumidor de ATP/NADPH.
► Es cíclico por que la fijación
conlleva destrucción del
substrato fijador.
► El carbono entra como CO2 y
sale como triosas fosfato,
generalmente reducidas
(fosgliceraldehido).
► Consta de tres fases:
carboxilación, reducción y
regeneración.

►Fase de carboxilación.
 RubP está en forma de dos isómeros cetoenólico: Rubí cetoenólica (más estable y
mayoritaria) y RubP dienólica.
 La enzima RuBP-carboxilasa-oxigenasa (RubisCO) cataliza la fijación de CO2
sobre la forma dienólica de la RuBP:
► Estructura de RuBisCO
Las rubiscos de plantas tienen 16 subunidades: 8 grandes codificadas por DNA
nuclear contienen los centros activos (8 por molécula) y 8 pequeñas codificadas
por DNA cloroplástico.

Subunidades grande y pequeña de

rubisco de Nicotiana tabaccum: alfahé-
lices (rosa) y betaplega-mientos
(amarillos).

Las rubiscos de organismos fotosintéticos mas primitivos son menos complejas

(4+4 ó 2+2).

► Activación de RuBisCO
 La rubisco se activa con luz e inactiva (protege sus centros activos) en
oscuridad.
 La activación consta de dos pasos:
1. Carbamilación: unión de un CO2 (diferente al que se va a fijar) a un
resto NH2 de una lisina de la rubisco (aparecen cargas negativas
superficiales)

2. Unión de iones Mg2+: El ión magnesio orienta los dos substratos de la

reacción: CO2 y RuBP.
 Las condiciones que permiten la activación de rubisco (pH alcalino y alta
concentración de magnesio) se dan en el estroma cuando los cloroplastos
reciben luz.
 Puede ser que RuBP se una al centro activo antes de que rubisco se haya
activado. Si ocurre así, la rubisco se inactiva y no se activará si antes no se
separa el azúcar del centro activo. Recientemente se ha comprobado que la
enzima rubisco activasa interviene en el proceso de activación de la rubisco al
eliminar el azucar unido al centro activo y permitir la carbamilación y posterior
unión de magnesio:
Mecanismo de la reacción
 La Rubisco activa tiene unido un Mg2+
(verde) y un CO2). El ión Mg2+ deja libre el
plano opuesto al de la proteina (superior)
 La RuBP se un al Mg 2+ por su lado superior
a través de dos oxígenos del C2
 El CO2 se fija través de un átomo de
oxígeno al magnesio por el mismo lado.
 Se forma un enlace entre el C2 de la forma
dienólica de RuBP y el C del CO2
formandose un intermediario de 6C
(cetoarabinitolbifosfato –CAB) que se
rompe y forma 2 moléculas de ácido 3-
fosfoglicérico (PGA).
 La enzima también cataliza la incorporación de O 2 al C2 del azúcar: (ver apartado de
fotorrespiración).
Ac. Fosfoglicólico –PG- (x2)
O2

RuBP Ruta del glicolato

CO2
Ac. 3-Fosfoglicerico (PGA) + CO2

► Fase de reducción. La reducción de PGA ocurre en dos pasos:

· Activación de PGA: reacción con ATP para formar bifosfoglicerato (BPGA)
* Reacción catalizada por PGA-quinasa
* PGA-quinasa se activa con ATP, Mg2+ y PGA .
* Las condiciones de activación de PGA-quinasa se dan en el estroma
cuando los cloroplastos reciben luz.
· Reducción de BPG a gosfogliceraldehído (GAP):
* Reacción catalizada por GAP-deshidrogenasa, única enzima del ciclo
que consume NADPH.
* PGA-quinasa se activa por ferredoxina-tiorredoxina (LUZ).

MECANISMO DE ACTIVACIÓN FERREDOXINA-TIORREDOXINA

► Permite la activación por luz de enzimas

con alta proporción de aminoácidos azufrados:
GAP-deshidrogenasa, sedoheptulosa
bifosfatasa, fructosa bifosfatasa y
fosforibulosaquinasa.
► Los electrones de PSI reducen los puentes
disulfuro de los enzimas a través de dos
proteínas: ferredoxina y tiorredoxina.
► Al quedar libres los grupos tiólicos las
enzimas se desagregan y exponen los centros
activos.
DESTINO DEL CARBONO FIJADO Y REDUCIDO

► GAP isomerasa establece un equilibrio entre el GAP formado y dihidroxiacetona

fosfato (DHAP). Cualquiera de las dos triosas fosfato puede:
 Salir al citosol mediante el translocador fosfato para intervenir en la
síntesis de sacarosa :

GAP ó DHAP citoplasma

estroma
Pi

 Permanecer en el estroma e intervenir en la regeneración de la rubisP o

en la síntesis de almidón.

►
Fase de regeneración
► El carbono contenido en triosas fosfato reducidas (GAP/DHAP) se utiliza
íntegramente en formar un compuesto de cinco carbonos RuBP).
1. Actividad aldolásica:
GAP + DHAP fructosa bifosfato (FBP)
2. Actividad fructosa-bifosfatasa:
FBP fructosa 6-fosfato (F6P)

· La enzima fructosa-bifosfatasa:
* Se regula por el mecanismo ferredoxina-tiorredoxina).
* Es una isoforma diferente de la isoforma citoplasmática

3. Actividad transcetolasa:
 Transfiere grupos glicoaldehido (2C)
desde F6P a GAP:
F6P + GAP xilulosa-5-fosfato (X5P) +
+ eritrosa-4-fosfato (E4P)
4. Actividad X5P-isomerasa:
X5P ribulosa 5 fosfato (R5P)
5. Actividad fosforibulosa quinasa:
R5P + ATP ribulosa bifosfato (RuBP)

· La enzima fosforibulosa-quinasa se regula

por el mecanismo ferredoxina-tiorredoxina
6. Actividad aldolásica.
E4P + GAP sedoheptulosa bifosfato (SBP)

7. Actividad SBP-bifosfatasa: regulada por el mecanismo ferredoxina-

tiorredoxina
SBP sedoheptulosa-7-fosfato (S7P)
8. Actividad transcetolásica:
S7P + GAP 2 xilulosa-5-fosfato (X5P)
 La xilulosa-5-fosfato se metaboliza a ribulosa-bifosfato de la forma
descrita anteriormente.

RENDIMIENTO ENERGÉTICO DEL CICLO DE CALVIN

► La Fijación de 6 CO2 requiere:
 18 ATP (12 ATP para reducir 12 PGA y 6
ATP para fosforilar 6 R5P).
 12 NADPH para reducir 12 BPGA .
► Coste energético por vuelta: 3 ATP y 2 NADPH

ATP/NADPH = 1,5
REGULACIÓN DEL CICLO DE CALVIN
► La fijación de CO2 depende de la disponibilidad de CO2 y luz PAR
► Para una [CO2]atm, un aumento de DFF provoca:

Activación de Síntesis Activación

rubisco ATP/NADPH ferredoxina/tiorredoxina

↑ Velocidad de ↑ Velocidad de
carboxilación regeneración

↓ RuBP ↑ RuBP

CuandoV arboxilación = Vregeneración

[RuBP] constante

Las triosas fosfato reducidas salen al citoplasma

e intervienen en la síntesis de sacarosa

SÍNTESIS DE SACAROSA
► Ocurre en el citoplasma a partir de triosas fosfato reducidas.
1. La aldolasa condensa GAP y DHAP para formar fructosa bifosfato (FBP).
2. La fructosa-bifosfatasa elimina un fosfato de FBP (reacción irreversible)
 La fructosa-bifosfatasa citoplasmática se regula por Fructosa-2,6-bifosfato
(F2,6BP), acoplando la actividad del ciclo de Calvin con el destino
citoplasmáticoa del carbono fijado:

LUZ ↓ Fructosa-2,6-bifosfato (F2,6BP)

Ciclo de Calvin
fructosa-bifosfatasa Fructosa-6-fosfato

1. Fosfoglucoisomerasa
2. Fosfoglucomutasa
F6P G6P G1P
3. UDPG-pirofosforilasa
G1P + UTP UDPG
4. Sacarosa-fosfato sintasa
UDPG + F6P sacarosa-fosfato

5: sacarosa fosfatasa
sacarosa-fosfato sacarosa

► La sacarosa-fosfato sintasa es una enzima que acopla la actividad del ciclo de

Calvin, a través de la concentración de F6P y Pi, con la síntesis de sacarosa (se
activa con G6P- proviene de F6P- y Pi):

↑ fotosíntesis

↑ F6P ↓ fosfato libre

↑ G6P

↑ actividad sacarosa-P sintasa ↑ sintesis

sacarosa
► Las concentraciones de G6P y Pi están relacionadas, puesto que las triosas
fosfato, precursoras de G6P, se intercambian por fosfato libre (Pi) a través del
transportador fosfato: ↑G6P→ ↓Pi
► La regulación de sacarosa-
fosfatasa (SPS) se consigue
por fosforilación de
aminoácidos específicos a
través de dos enzimas, una
SPS-quinasa y una SPS-
fosfatasa que añaden o
eliminan respectivamente un
grupo fosfato a SPS. La forma
fosforilada de SPS es menos
activa que la no fosforilada:
SPS se activa con G6P, porque
G6P inhibe SPS-quinasa, y se
inhibe por Pi, porque Pi inhibe
SPS-fosfatasa.
ALMIDÓN
► Es una mezcla de dos polímeros:
· Amilosa: a(1-4)-glucano lineal
· Amilopectina: eje central a(1-4)-glucano con ramificaciones a(1-4)- glucano
en C6 (2).

Amilosa Amilopectina
► Es la forma mayoritaria de almacenamiento de carbono reducido.

METABOLISMO DE ALMIDÓN

► Día: síntesis a partir del exceso de

carbono reducido que permanece en el
cloroplasto y no se utiliza en regenerar
RuBP.

► Noche: hidrólisis para mantener niveles

basales de intermediarios del ciclo de Calvin
y mantener la el suministro de
carbohidratos cuando cesa la
fotosíntesis.

SÍNTESIS DE ALMIDÓN

► La síntesis de almidón comienza cuando la F6P se convierte primero en G6P y luego en G1P
mediante actividad fosfoglucoisomerasa y fosfoglucomutasa respectivamente (ver
reacciones en síntesis de sacarosa).

► G1P se activa al reaccionar con adenosintrifosfato (ATP) mediante actividad ADP-

glucopirofosforilasa:
G1P + ATP ADP-glucosa

► Los dos tipos de almidon sintasa agregan unidades de glucosa con enlace a(1,4) a un
glucano incipiente :
(glucano)n + ADP-glucosa (glucano)n+1

► Las enzimas ramificantes añaden unidades de glucosa con enlaces a(1,6) a cadenas de
amilasa.
► La síntesis de almidón se regula a través
del efecto de gliceraldehído-fosfato y
glucosa-6-fosfato sobre la enzima ADP-
glucopirofosforilasa

FOTORRESPIRACIÓN
► Consumo de O2 por actividad
oxigenasa de rubisco y formación de
CO2 en la ruta del glicolato.

► La ruta del glicolato requiere la

participación de cloroplastos,
peroxisomas y mitocondrias.

► De forma global:
+
10 RuBP + 10 O2 + 2 ATP + 2,5 NADPH 0,9 RuBP + 0,5 CO2 + 2 ADP + 2,5 NADP + 2 Pi
► La relación entre car-boxilación
y oxigenación de rubisco depende
sobre todo de la relación O2/CO2.
► La temperatura afecta a la
fotorrespiración a través del
efecto que tiene sobre la
solubilidad de gases en
líquidos. Aunque la solubilidad
de los dos gases (O2 y CO2)
disminuye conforme aumenta
la temperatura, la solubilidad
de CO2 disminuye más que la
de O2 y, por tanto si aumenta la
temperatura el cociente O2/CO2
también aumenta:

↑Tra ↑ O2/CO2 ↑Fotor.

► El significado fisiológico de
la fotorrespiración es dudoso:
¿disipación de ATP/NADPH en
condiciones de alta iluminación
y baja [CO2]?
METABOLISMO C4
► El metabolismo C4 disminuye la tasa de fotorrespiración al acumular CO2 en el
entorno de la rubisco.

mesófilo

► En las plantas con metabolismo

C4, los cloroplastos del mesófilo
tienen mas grana ya que debe
aumentar el flujo acíclico de
electrones (necesitan reducir OAA
→ malato). Por el contrario, los de
la vaina del haz tienen menos vaina del haz
grana por conseguir NADPH del
malato importado.

► Las plantas C4 economizan agua al abrir menos los estomas para tomar la misma

METABOLISMO CAM

► El metabolismo CAM disminuye la tasa

de fotorrespiración al acumular CO2 en
el entorno de la rubisco.

► El metabolismo CAM economiza agua:

· Permiten que el ciclo de Calvin se
desarrolle con los estomas cerrados
· El CO2 entra durante la noche (tra.
baja).