INSTITUTO TECONOLOGICO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE

ZAMORA

FITOPATOLOGIA

JESUS ROBERTO RUBIO GAONA

GABRIELA LISSETE RIVERA HERNANDEZ
HILARIO BRACAMONTES RAMIREZ
JOSE EDUARDO CASASOLA PADILLA

PRACTICA 2.- MEDIOS DE CULTIVO

IIAS
5TO SEMESTRE GRUPO A

PROF: EDGAR AYALA PADILLA

ZAMORA MICHOACAN

A 31 DE OCTUBRE DEL 2022

INDICE

-RESUMEN____________________________PAG 3

-INTRODUCCION________________________PAG 3

-OBJETIVOS____________________________PAG 4

-MARCO TEORICO______________________ PAG 4

-MATERIALES Y REACTIVOS______________ PAG 4-5

- PROCEDIMIENTO_______________________PAG 6

-RESULTADOS___________________________PAG 7

-CONCLUSIONES. _________________________PAG 7
RESUMEN
La práctica se dividirá en tres etapas de importancia. Durante la primera etapa los
correspondientes equipos seleccionarán cada uno un medio diferente a elaborar,
los medios para elaborar se encuentran en la tabla de “Medios de cultivo”. Estos
medios se introducirán al proceso de esterilización tomando aproximadamente 35
minutos, durante ese tiempo se llevará a cabo la segunda etapa que consistirá en
la elaboración de las soluciones para desinfección de la mesa para vaciado de
medios en placas y sembrado del material vegetal enfermo. Finalmente, la ultima
etapa será el vaciado de los medios de cultivo en las cajas Petri estériles, cada
equipo seleccionará un cultivo y con las medidas de esterilidad adecuada
proseguirá a elaborar 12 placas por cada equipo, que serán rotuladas con la
fecha, grado y grupo, medio de cultivo. Ademas en este documento tendremos una
breve introduccion al tema. Acompañado de un marco teórico de teoria básica,
en base a los materiales usados y el procedimiento completo de práctica, para
terminar con resultados y las conclusiones respectivas.

INTRODUCCION
Un medio de cultivo es un sustrato o una solución de nutrientes que permite
el desarrollo de microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar
un cultivo, se debe sembrar sobre el medio de cultivo elegido las muestras en
las que los microorganismos van a crecer y multiplicarse para dar colonias. Los
microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en
condiciones extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando
una amplia diversidad de nichos ecológicos. Entre los requerimientos más
importantes para su desarrollo están el carbono, el oxígeno, nitrógeno, dióxido
de carbono e hidrógeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del aporte
extra de factores decrecimiento específicos en forma desuero, sangre y extracto
de levadura entre otros. Existen diversos métodos de esterilización, entre ellos:
calor (seco o húmedo), filtración (para sustancias termolábiles y aire), radiaciones
y aplicación de gas de óxido de etileno (para jeringas y cajas de plástico). Un
medio de cultivo está constituido por una mezcla de agua y sustancias
orgánicas e inorgánicas, los que en conjunto proporcionan los requerimientos
nutricionales para el desarrollo de los microorganismos.
OBJETIVOS
-Que el alumno conozca los diferentes medios de cultivo existentes.
-Que tenga el conocimiento de manejo materiales de laboratorio.
-Conocer las medidas sanitarias para no contaminar los medios de cultivo.
-Que tenga el conocimiento de uso de la autoclave.
-Que el alumno conozca el correcto etiquetado de los medios.
-Que identifique para que son y que organismo se desarrolla en él.

MARCO TEORICO
Los medios de cultivo son, placas que ayudan al crecimiento de virus, bacterias y
hongos, que permite el estudio de los mismos, ya que estos tienen la carga de
nutrientes para que este se pueda desarrollar, como se sabe muchos medios
tienen diferentes componentes y cada uno está estructurado para que cierto
patógeno crezca en el medio, ya que muchas de estos microorganismo no crecen
de manera adecuada si no tiene las condiciones y las necesidades nutrimentales
que necesitan para crecer dentro del medio.
Muchos de los medios como se menciona ya están diseñados para ciertos
microrganismo como lo son el agar nutritivo, sangre, chocolate, PDTA, entre otros,
estos ya están diseñados para ciertos microrganismo, y que al mezclar con otras
materias primas podemos crear un agar mucho más rico para el microorganismos
que queremos.
Debemos tomar en cuenta que para que nuestros agares sean de utilidad
debemos seguir las indicaciones para que estos no se contaminen y nos sean de
total utilidad.
Los agares nos dieron un paso agigantados para la investigación de los
microorganismos y con la ayuda de estos la observación y descripción de colonias
lo hacer más fácil el proceso de cultivación.

MATERIALES Y REACTIVOS

Reactivos
-Hipoclorito de sodio.
-Etanol.
Equipo
-Autoclave.
-Mechero.
-Parrilla de calentamiento.
-Agitador.
-Tripié.
-Bascula.
-Material
-Placas Petri.
-Recipiente de vidrio.
-Bolsa de plástico.
-Atomizador.
-Algodón
-Cinta de papel.
-Metro de papel.
-Marcador.
-Flanela.
-Matraz.
-Recipiente especial.
-Proveta.
-Vaso de precipitado.
-Matéria prima
-Avena en polvo.
-Agar bacteriológico.
PROCEDIMIENTO
Primeramente, debemos de hacer reparación de tapones para medios de cultivo;
Se tomará un trozo de algodón y se cubrirá con un trozo de gasa, se colocará
finalmente un trozo de cinta de papel para evitar que el tapón se deshaga. A
continuación, se tomará un trozo de papel estraza de aproximadamente el tamaño
de una hoja de papel y se realizará la figura de un sombrero para cubrir el tapón de
algodón y gasa. Igualmente, este se puede cubrir todavía con un aluminio por si se
necesita guardar el medio de cultivo para un posterior uso.
Despues debemos hacer esterilización; Se debe verificar que los medios se
encuentren bien sellados y rotulados con un trozo de cinta de papel donde debe ir
la inicial de identificación de cada medio de cultivo. Colocarlos de forma en la
autoclave que no se tiren, si se cuenta con un frasco especial para medios colocar
su tapa, caso contrario los tapones y la capucha de papel estraza. El tiempo de
esterilización será de aproximadamente 30 minutos a 121 °C. Finalizada esta etapa
liberar presión y dejar enfriando durante 15 minutos el equipo.
Para hacer la preparación de nuestro espacio de práctica debemos de hacer la
segunda solución tomar 50 a 100 ml aproximadamente y vaciarlo en el atomizador
para esterilizar cada una de las mesas con el fin realizar la parte 3 de la práctica.
Parte 3: Llenado de las cajas Petri con los medios estériles.
1) Cada equipo utilizará solo un medio de cultivo para hacer el llenado las cajas
Petri, por equipo en total deben llenar aproximadamente 12 cajas Petri, habiendo
un total de 6 equipos.
2) Previamente se esterilizará la mesa con la solución de etanol al 70 %, se
encenderá el mechero para tener un ambiente lo más estéril posiblemente, los
alumnos rociarán la solución de etanol también sobre sus manos y no tacarán nada
más para evitar contaminación de los medios.
3) Se tomarán las placas, serán sacadas del paquete sin destaparlas y se colocarán
en forma de torre siendo 12 en total por equipo, se levantará la tapa de una se
verterá el contenido del medio en la primera e inmediatamente se volverá a tapar la
caja Petri. La boquilla del matraz o recipiente se colocará cerca del mechero para
volver a esterilizar, para continuar con el mismo procedimiento que sería vaciar en
una nueva caja y esterilizar la boquilla del frasco que contiene el medio acercándolo
a mechero de nuevo.
Y ya por último las cajas serán selladas con cinta en la parte lateral y rotuladas con
marcador de aceite en la parte de la superficie para llevar un control adecuado. La
rotulación contendrá: grado y grupo, carrera, materia, fecha e iniciales del medio.
RESULTADOS
Se dividieron los reactivos (Material requerido para la preparación de los medios)
entre diferentes equipos para maximizar la producción
Al final fue un éxito total ya que obtuvimos mínimo 10 placas llenas de diferentes
medios de cultivo, más sin embargo en nuestro caso utilizamos PDA con avena en
polvo, aparentemente el reactivo de PDA estaba caduco (aun funciona más el
tiempo de gelificación es más tardado)
Exceptuando ese punto, tenemos un reactivo de hipoclorito de sodio (30%) y uno
de Alcohol (30%) los cuales nos servirán en la próxima practica para la siembra e
inoculación.

CONCLUSIONES:
Como recopilación antes de utilizar cualquier reactivo hay que asegurarnos que se
encuentren en estado optimo y con caducidad vigente. Ahora ya al obtener medios
de cultivo, necesitamos identificar que microorganismos son los más óptimos para
el crecimiento en las cajas Petri
Deben ser preparados con mucha cautela ya que para la introducción y manejo de
la autoclave se debe tener mucha concentración, también debemos esperar
adecuadamente a que después del vertido ya se encuentre en estado sólido para
que sea optima la forma de trabajar.
AL trabajar con preparaciones debemos tener cuidados con los reactivos y las
partes de los mecheros.