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TECNOLOGÍA SUPERIOR EN BIOTECNOLOGÍA

INFORME PRÀCTICA / REPORTE APRENDIZAJE AUTÓNOMO

Nivel de Académico
Nombre de la materia / Semestre

INSTITUTO SUPERIOR TECNOLÓGICO


“17 DE JULIO”

PRÁCTICA DE: Biotecnología vegetal

TEMA: Siembra de explantes del tomate de árbol (Solanum betaceum)

GRUPO: A

ESTUDIANTE: Johanna Del Carmen Lastra Calderón

DOCENTE: Pedro Martínez

07/12/2022
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1. Objetivos
• Obtener órganos de los explantes usando una hoja de tomate de árbol, de manera
masiva
• Determinar el porcentaje y tiempo de crecimiento de explantes in vitro
• Identidicar las diferencias el medio MS y MS con fitohormonas
2. Introducción
El cultivo de tejidos vegetales es una técnica biotecnológica que permite el mantenimiento
de las plantas o componentes en condiciones estériles concentradas evitando así la
contaminación o enfermedades de las plantas, antes le dará no ha sido de gran ayuda en la
agricultura y la investigación vegetal.(Roca y Mroginski 2013)

El cultivo in vitro de las plantas va depende mucho del medio de cultivo y lo que se va a
sembrar de la planta como las hojas, semillas, tallo etc, para esto el medio de cultivo debe
contener nutrientes, reguladores de crecimiento, agua y fuente de carbono dependiendo de
las necesidades de las plantas. El cultivo in vitro es muy difícil de realizar porque cada
especie necesita nutrientes diferentes, de igual manera depende mucho de la adaptación para
el cremiento optimo, en esta práctica se trabajó con medio MS adicional Fitohormonas, este
medio se caracteriza por ser un medio basal y de fácil adaptación en las plantas gracias a las
concentraciones altas de macro y micronutrientes.(Francis Turner et al. 2019)

Para que se de el proceso de cultivo de explantes se debe encontrar en un ambiente con


condiciones adecuadas como la temperatura humedad, condiciones de luz, además se debe
tomar encuenta que algunas hojas no crecen tan rápido y puede tener contaminación de
algunas bacterias , hongos , o se contamina por algunas enfermedades o residuos que estén
en la planta.(Cando et al. 2013)
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3. Materiales
• Caja Petric: Se caracteriza por su forma redonda, hecho de vidrio o de plástico, se
usa común mente para poder observar diferentes tipos de muestras tanta
biológicas como químicas, también se usa para el cultivo de bacterias y otras
especies.(Anón 2020)
• Vaso precipitado : Un vaso precipitado tiene la forma cilíndrica y posee un fondo
plano, comúnmente son de vidrio y de plásticos , se usan principalmente para
contener líquidos o sustancias , también se usa para calentar , disolver o preparara
reacciones químicas (Ramírez Diaz 2016)
• Bisturí: El bisturí o conocido como escalpelo es un instrumento en forma de
cuchillo pequeño que se usan en procedimiento de cirugía , o en el laboratorio se
usan para cortar pequeñas fragmentos. (Ramírez Diaz 2016)
• Pinzas: las pinzas en el laboratorio se caracterizan por ser una herramienta que
permite mantener firmemente el objeto. (Ramírez Diaz 2016)
• Alcohol: El etanol es un compuesto químico conocido como alcohol, el cual en el
laboratorio nos va a permitir la desficción del área de trabajo o materiales previos
a usar o mantener una área estéril. (Ramírez Diaz 2016)
• Frascos boecos: esta botella redonda de diferentes volúmenes se puede utilizar
para almacenamiento, así como la mezcla o muestreo. (Ramírez Diaz 2016)
• Agar -Agar: El agar – agar es un gelificante natural que procede de algas rojas ,
este tiene que ser disuelto en agua caliente al menos de 80°C para la disolución y
añadir en los medios.(Alejos Cabrera et al. 2021)
• Medio MS: El medio Murashige y Skoog MS, se ha convertido en un medio más
común usados en los cultivos in vitro de tejidos vegetales , ya que se caracteriza
por tener macro y micronuentres necesarios en tejidos vegetales. (Alejos Cabrera
et al. 2021)
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• Sacarosa: La sacarosa es una fuente de carbodritados más usada en cultivo in vitro


de tejido vegetal y algunos estudios han determinado como una optima fuente de
carbono para las plantas. (Alejos Cabrera et al. 2021)
• Agua destilada: El agua destilada es una sustancia compuesta por H2 O sometida a
un proceso de destilación eliminando las impurezas, se caracteriza por estar
limpia de electrolitos, sales minerales, microorganismos y sustancias
contaminantes, el pH ronda 5,8. (Alejos Cabrera et al. 2021)
• Mechero de alcohol: Es un instrumento que tiene la funcionalidad amplia, se usa
para dar luz a un sitio pequeño, calentar diferentes sustancias o funciona como
una estufa. (Alejos Cabrera et al. 2021)
• Probetas: esta formado por un tubo transparente de un centímetro de distintos
volúmenes, se usa para medir líquidos. (Alejos Cabrera et al. 2021)
Reactivos
• Ácido clorhídrico (HCl) 0.1N : Uso recomendado de las sustancia química
peligrosa o mezclas, restricciones de usos análisis químico , sirve como corrector
de pH.(Guaman Torres 2022)
• Hidróxido de sodio (NaOH) 0.1N: Se usa para ajustar pH , la fabricación de
jabones ,papeles explosivos . (Cárdenas-Bahena et al. 2012)
• Alcohol 70%: Se usa para desinfectar las superficies o materiales previos a
usar.(Casas et al. 2019)
• Hipoclorito de sodio 2.5%: Se principalmente para desinfectar superficies o los
materiales de laboratorio, (Cárdenas-Bahena et al. 2012)
• Tween 20: Medio de cultivo para verificar la neutralización de conservadores en
productos farmacéuticos o sirve para desinfectar los explanes .(Casas et al. 2019)
• Equipos
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• Cámara de flujo : se encarga de proteger al trabajador de laboratorio y los


materiales trabajando en un espacio estéril , con ayuda al flujo de aire .(Arcani
Huanca y Velarde Chávez 2018)
• Autoclave: es un recipiente metálico con paredes gruesas con un cierre hermético
que permite trabajar a vapor de agua altas presión y altas temperaturas , ayudando
a esterilizar instrumentos .(Arcani Huanca y Velarde Chávez 2018)
• Agitador magnético : es un dispositivo electrónico que sirve para mezclar de
manera automática una sustancia, (Arcani Huanca y Velarde Chavez 2018)
4. Metodología
Preparación de medio
Para esta práctica se preparo 300ml de medio MS , primero se prepara todo los materiales a
usar , después se coloca 100ml de agua destilada y se procede a pesar 0,66gr de Ms , esto se
procede a colocar en el agua, una vez listo el medio ,se agrega la sacarosa que se coloco 4,5 gr ,
después de procede a medir y ajustar el pH que debe estar en 5.8 se tuvo la ayuda de dos
soluciones a una concentración de 0.1M HCL o NaOH, después que todo eso este listo se afora a
un volumen de 150ml este proceso se llevo a cabo en frascos para tener el volumen deseado de
300ml , luego se procede a colocar las Fitohormonas , una vez listo todo esto se procede a llevar
al agitador magnético para que la solución durante 3- 4 minutos , pasado el tiempo se deja
enfriar y se esterilizar en el medio , adicional con las cajas petric previos a usar , mientras tanto
se desinfecta la cámara de flujo , después de que este esterilizado se lleva todo la cámara de
flujo y se reparte el medio , y si coloca en fundas ziploox para usar al día siguiente .

Siembra de explantes
Una vez desinfectada el área de trabajo en un vidrio se procedió a cortar 15 pedazos pequeños
aproximadamente de 0,5 de las hojas del tomate de árbol como se evidencia en la figura 1
Todo es proceso que se describirá a continuación se llevó a cabo en cámara de flujo, se coloca
en un vaso precipitado los 15 pedazos de hoja durante 3minutos en alcohol al 70%, luego se lava
con agua destilada, una vez hecho eso se coloco en un vaso precipitados durante 15 – 20 minutos
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en hipoclorito de sodio 2.5% + 4 o 5 gotas de Tween 20, en este proceso se evidencia una
oxidación después se realiza 3- 4 lavados en agua destilada , después de la desafección del
explantes se procede a sembrar en el medio MS con Fitohormonas , para lo cual se va a flamear
las pinzas y se va a colocar 3 hojas por cada .

5. Resultados
En la práctica después de 4 días se puedo evidenciar una contaminación masiva como se
evidencia en las figuras 1, en todos los explantes, eso se debe a la falta de asepsia o a su ve la
planta está enferma, o mal realizado la esterilización del medio.

Figura 1 Contaminación de explantes

6. Discusión
Medio de cultivo
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de cremientos y otros componentes
que crean condiciones necesarias de manera aséptica para el desarrollo de microrganismo o
cultivo de tejidos. Componentes principales del medio son macronutrientes , micronutrientes ,
factores de cremiento .(Doménech y García 2014)

Tabla 1 Macronutrientes del medio


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Elementos Forma normal de nutrientes en el Forma sumistrada en el medio


ambiente de cultivo
Carbono (C) CO2 Carbono (C), compuestos Glucosa, malato, acetona,
orgánicos piruvato, aminoácidos, extractos
compuestos
Hidrogeno(H) H2O, compuestos orgánicos H2 O, compuestos orgánicos
Oxigeno(O) H2O, O2, compuestos orgánicos H2 O, O2 compuesto orgánico
Nitrógeno(N) NH3, NO3, N2, compuestos Inorgánico: NH4Cl, (NH4)2
orgánicos nitrogenados SO4
Fosforo(P) PO43 KH2PO4, PO4, NaHPO4
Azufre(S) H2S, SO4, compuestos orgánicos Na2SO4, Na2S2 03 , cisteína y
con S, sulfuros metálicos (FeS, otros compuestos orgánicos
CuS, ZnS, NiS, etc.) azufrados

Potasio(K) K +Potasio (K) en solución o KCl, KH2 PO4


como varias sales de K
Magnesio (Mg) Mg 2+Magnesio (Mg) en MgCl2 , MgSO4
solución o como varias sales de
Mg
Sodio (Na) Na+ Sodio (Na) en solución, NaCl
NaCl o como otras sales de Na
Calcio (Ca) Ca2+ en solución, CaSO4 o como CaCl2
otras sales de Ca
Hierro (Fe) Fe2+ o Fe3+ en solución, FeS, Fe Varias soluciones de hierro
(OH)3 o como otras sales de Fe
Fuente: (Doménech y García 2014)
Tabla 2 Micronuentres
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Elementos Función celular


Cromo (Cr) Requerido en los mamíferos para el metabolismo
de la glucosa. Se desconoce si los
microorganismos lo requieren
Cobalto (Co) Vitamina B12 Cobalto (Co) ; transcarboxilasa
(bacterias del ácido propiónico
Cobre (Cu) En la respiración, citocromo c oxidasa; en
fotosíntesis, plastocianina y en algunas
superóxido dismutasas
Manganeso (Mn) Activador de muchas enzimas; presente en algún
superóxido
dismutasas y en la enzima que rompe el agua en
fotótrofos oxigénicos
Molibdeno (Mo) Algunas enzimas que contienen flavinas;
nitrogenasas, nitrato
reductasa, sulfito reductasa, DMSO-TMAO
reductasas y algunas formato
deshidrogenasas
Níquel (Ni) La mayoría de las hidrogenases; coenzima F430
de metanógenos, deshidrogenasa del monóxido
de carbono y ureasa
Selenio (Se) Formato deshidrogenasa; algunas hidrogenasas y
el aminoácido seleniocisteína
Tungsteno (W) Algún formato deshidrogenasas y
oxotransferasas de los hipertermófilos
Vanadio (V) Vanadio nitrogenasa; bromo peroxidasa
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Zinc (Zn) Anhidrasa carbónica, alcohol deshidrogenasa,


ARN y ADN polimerasa, y muchas proteínas
que se unen al ADN
Hierro (Fe) Citocromos, catalasas, peroxidasas, proteínas con
hierro y azufre, oxigenasas y todas las
nitrogenasas
Fuente: (Doménech y García 2014)
Tabla 3 Factores de cremiento

Vitaminas Función
Ácido p-aminobenzoico Precursor del ácido fólico
Ácido fólico Metabolismo de compuestos de un carbono;
transferencia de grupos metilo

Biotina Biosíntesis de ácidos grasos; β-


descarboxilaciones; algunas reacciones de
fijación de CO2

Cobalamina Reducción y transferencia de restos


monocarbonados; síntesis de desoxirribosa

Acido pantoténico Precursor de la coenzima A; activación del


acetilo y derovados acilados

Riboflavina Precursor del FMN, FAD en flavoproteínas


implicadas en transporte de electrones
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Vitamina B Transformaciones de aminoácidos y


cetoácidos
Grupo vitaminas k Transporte de electrones; síntesis de
esfingolípidos
Hidroxanatos Compuestos que unen hierro; solubilización
y transporte del hierro al interior celular

Tiamina α-descarboxilaciones; transcetolasa

Acido nicotínico Precursor del NAD+; transferencia de


electrones en reacciones de oxido-reducción

Ácido lipoico Transferencia de grupos acilo en la


descarboxilación del piruvato y α-
cetoglutarato

Fuente: (Doménech y García 2014)


Tipos de medios
• Sólidos y líquidos.

• Medio definido (sintético) y medio complejo.

• Medio mineral o basal: compuestos inorgánicos.

• Medio mínimo: medio basal + 1 fuente de carbono.

• Medio rico: todos los requerimientos nutritivos.

• Medio de enriquecimiento.
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• Medio selectivo.

• Medio diferencial. (Doménech y García 2014)

Medio MS
El medio Murashige and Skoog (MS), o abreviado MS0, fue inventado por los investigadores
Toshio Murashige y Folke K. Skoog en 1962 mientras estudiaban nuevos reguladores del
crecimiento vegetal y se ha convertido en el medio más utilizado para el cultivo de tejidos
vegetales in vitro. Como investigador postdoctoral en Skoog, Murashige inicialmente se centró
en encontrar hormonas de crecimiento en el jugo de tabaco, pero sin éxito. En cambio, el análisis
del jugo de tabaco reveló altas concentraciones de minerales específicos. Varios experimentos
posteriores demostraron que la variación de los niveles de estos nutrientes dio como resultado un
aumento significativo del crecimiento en comparación con las formulaciones existentes. En
particular, se encontró que el nitrógeno promueve el crecimiento del tejido del tabaco en
cultivo.(Rodríguez, Chacón, y Carrillo 2014)

Rodríguez, Chacón, y Carrillo (2014) Menciona que el medio Ms tiene diferentes componentes
como se mencionara a continuación

Componente de MS
Sales Mayores
• Nitrato de amonio 1650 mg/l
• Cloruro de calcio 440 mg/l
• Sulfato de magnesio 370 mg/l
• Fosfato monopotásico 170 mg/l
• Nitrato de Potasio 1900 mg/l.

Sales Menores(micronutrientes) por litro

• Ácido bórico 6. 2 mg/l


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• Cloruro de cobalto 0.025 mg/l


• Sulfato de hierro 27.8 mg/l
• Sulfato de manganeso 22.3 mg/l
• Yoduro de potasio 0.83 mg/l
• Molibdato de sodio 0.25 mg/l
• Sulfato de cinc 8.6 mg/l
• Ácido etilendiaminotetraacético 36.70 mg/l
• Sulfato de cobre(II) pentahidratado0.025 mg/l
Vitaminas y compuestos orgánicos por litro

• Inositol 100 mg/l


• Niacina 0.5 mg/l
• Piridoxina · HCl 0.5 mg/l
• Tiamina · HCl 0.1 mg/l
• Glicina 2 mg/l
• Peptona 1 g/l (opcional)
• Ácido indolacético 1-30 mg/l (optional)
• Kinetina 0.04-10 mg/l (opcional)

Fitohormonas
Las hormonas vegetales, u hormonas vegetales, son compuestos naturales producidos en las
plantas que determinan en gran medida el desarrollo. Se sintetizan en muy baja concentración (˂
1 ppm) en una determinada parte u órgano de la planta y actúan allí o se trasladan a otro lugar
donde regulan determinados eventos fisiológicos (estimulan, inhiben o modifican el desarrollo).
Los nutrientes están excluidos de este término porque las plantas no los producen, sino que los
absorben, así como los aminoácidos y las enzimas porque están presentes en concentraciones
más altas en las plantas. En general, las hormonas están presentes en todas las partes de la planta
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y en todo momento, aunque finalmente se concentran más donde más se necesitan.(Porta et al.
2020)

Las auxinas

Las auxinas son hormonas de crecimiento superiores debido a la división y elongación (raíces,
tallos, hojas, frutos, etc.), especialmente al inducir el enraizamiento (por ejemplo, cortar raíces).
Están involucrados en el tropismo de las plantas, inhiben el envejecimiento o la senescencia de
los tejidos, inhiben la germinación de las yemas laterales (axilares) y la abscisión de órganos.
Las auxinas se sintetizan a partir del aminoácido triptófano, de los cuales la auxina más
estrechamente relacionada en términos de cantidad y actividad es el ácido indolacético (IAA).
Algunos nutrientes, como el Zn y el B, están íntimamente relacionados con la auxina, ya que su
deficiencia provoca una disminución de la cantidad de auxina en los tejidos, lo que reduce el
proceso de división y elongación celular. Algunos cultivos se caracterizan por el acortamiento de
los entrenudos, en parte debido a la baja síntesis de auxinas.(Porta et al. 2020)

Las giberelinas

Las giberelinas, hormonas que estimulan el crecimiento principalmente a través de la división y


elongación celular, son las protagonistas de esta última; regulan la germinación y en cremiento
promueven el desarrollo de flores masculinas. También están involucrados en la eliminación de
radicales libres y anti-envejecimiento y anti-floración. De hecho, promueven el alargamiento de
los entrenudos, aumentan el tamaño de la fruta, inducen la partenocarpia en ciertas variedades de
fruta y retrasan la maduración, entre otras cosas. Hay más de 130 especies de giberelinas en las
plantas, pero pocas son biológicamente activas, siendo las más destacadas GA₁, GA₃ y GA4,
todas las cuales exhiben un movimiento apical (hacia arriba) y basal (hacia abajo). Nutrientes
como el N, Zn, B y Ca están ampliamente involucrados en su síntesis y funcionamiento, por lo
que deben estar presentes en niveles adecuados. (Porta et al. 2020)

Las citocininas
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Las raíces son el principal órgano de síntesis de estas hormonas, aunque también se sintetizan
en cualquier tejido, especialmente en lugares de intensa división celular. Activan el crecimiento
de las yemas laterales, estimulan el crecimiento de los frutos, retrasan la senescencia de las hojas
y estimulan la movilización de nutrientes. Hay varias citoquininas naturales, las más importantes
son la zeatina, la benciladenina y la kinetina. Su movimiento es preferentemente al alza, aunque
también puede ser a la baja, pero depende totalmente de donde estén más demandados. El N es
uno de los principales elementos asociados a la presencia de esta hormona en los tejidos.(Porta
et al. 2020)

Explantes

Los explantes dentro de la biotecnología vegetal es el tejido vivo que se aísla de


su propio órgano y se transfiere a un medio de crecimiento artificial. El nombre "explante
" es la versión en español de la palabra inglesa "explant"; fue inventado específicamente para
identificar tejido vegetal cultivado in vitro y no tiene otro significado. La selección de
explantes es un aspecto esencial para el éxito del cultivo de tejidos, ya que, dependiendo de su
ubicación en la planta, el tipo de tejido que contiene, su edad cronológica y fisiológica, el
contenido de hormonas endógenas, etc. (Cando et al. 2013)

Tipos
Se utilizarán como explantes segmentos de hoja obtenidos de la planta madre del tomate de
árbol, que crece en condiciones óptimas y estériles.(Roca y Mroginski 2013)

Elección, acondicionamiento
Para su acondicionamiento los explantes será tratados con los reactivos y procesos mencionados
anteriormente en la desafección de explantes, dentro de la adaptación se realizó en el cuarto de
cultivo, donde mantendrá el ambiente aséptico. (Roca y Mroginski 2013)

Árbol de tomate
Taxonomía
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Solanum betaceum fue descrita por Antonio José de Cavanilles y publicado en Historia
Natural.(Roca y Mroginski 1991)
Nombre común: Tomate de árbol
Reino : Plantae
División: Angiospermae
Clases: Magnoliopsida
Subclases: Asteridae
Familia:Solanales
Genero:Solanum
Subgénero: Cyphomandra

Sección: Pachyphylla
Especie: S. betaceum

Descripción
Tiene hojas enteras alternas con un pecíolo grueso de 4 a 8 cm de largo en los extremos de las
ramas. Las hojas son de 15-30 cm de largo, ovaladas, puntiagudas, de color verde oscuro,
ligeramente ásperas al tacto. Las hojas jóvenes tienen pelos finos en ambos lados. Las venas son
claras y visibles. Las flores son pequeñas, de 1,3-1,5 cm de diámetro, de color blanco rosado,
dispuestas en pequeños racimos terminales. Tienen 5 pétalos y 5 estambres amarillos. Florece de
mayo a junio. El fruto es una baya ovoide, de 4-8 cm x 3-5 cm, con un largo pedúnculo sobre el
que crece el cáliz. La piel madura es lisa, roja o anaranjada, con rayas brillantes. La pulpa es
jugosa, ligeramente agria, de color naranja a rojo y contiene muchas semillas. La fruta es
comestible, se come cruda o mezclada en ensaladas, o se cocina mejor y se convierte en jugo,
dulces y postres. Aportan hierro, potasio, magnesio, fósforo y vitaminas A, C y E.(Acosta 2019)

Adaptaciones y requerimientos climáticos

Crece en un clima típico de bosque húmedo montano con una temperatura de 13 a 24 ºC y una
precipitación anual de alrededor de 600 a 1500 mm; también a una altitud de 800 a 2800 m sobre
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el nivel del mar. Es muy sensible a las bajas temperaturas, los fuertes vientos y la sequía.
Requiere una marga que drene bien, sea rica en materia orgánica y se beneficie del
compost.(Acosta 2019)

Usos
En Colombia y Ecuador, su uso medicinal está relacionado con la garganta y la gripe. Use frutas
u hojas precalentadas durante la amigdalitis o la angina. En caso de gripe, comer fruta fresca en
ayunas. Se sabe que esta fruta tiene un alto contenido de ácido ascórbico. Otra propiedad se
encuentra en Jamaica y Bolivia como remedio para problemas hepáticos. Se puede utilizar
cocido o crudo. La salsa de chile a menudo se prepara de la misma manera con esta fruta. En
Colombia, la fruta se sirve en jugo o sorbete.(Acosta 2019)

Porque no se desarrollan los explantes


Las bacterias son los contaminantes externos más comunes y plantean serios problemas porque
pueden ser sistémicas y difíciles de detectar y eliminar. Estos últimos incluyen virus, viroides y
muchos géneros bacterianos como: Agrobacterium, Bacillus, Corynebacterium, Lactobacillus,
Erwinia, Enterobacter y Pseudomonas. Su distribución puede ser localizada o sistémica a través
del xilema o floema. Estos contaminantes están ausentes en los primeros subcultivos porque la
alta osmolaridad, el pH y ciertas hormonas en el medio inhiben su crecimiento. Debido a este
efecto inhibidor, muchos microorganismos requieren un período de aclimatación a las nuevas
condiciones antes de emerger; esto suele ocurrir durante la fase de multiplicación. Las
principales fuentes de contaminación bacteriana son los explantes, el ambiente de trabajo, los
operadores y los métodos deficientes de esterilización. Además, los microorganismos pueden ser
transmitidos por garrapatas, hormigas. El ambiente de trabajo es una fuente directa o indirecta
de contaminación. Se ha sugerido que las partículas del suelo cargadas con esporas y células
microbianas ingresan al acondicionador de aire a través de las corrientes de aire, son
transportadas e introducidas artificialmente y permanecen en el medio ambiente debido a un
saneamiento inadecuado.(Roca y Mroginski 2013)
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Cuarto de cultivo
Los cuartos de cultivos comúnmente requieren un espacio seguro, en un entorno consistente y un
esquema de mantenimiento y crecimiento de las plantas. Los cuartos de cultivos requieren un
espacio seguro, además las plantas logran adelantase con un impacto ambiental mínimo al
sacarse al exterior.(Sandoval 2013)

Características del cuarto de cultivo son las siguientes así lo menciona (Sandoval 2013) :

Aire 20%
Temperatura
Humedad
Contenido CO2
Luz 20%
Intensidad
Espectro
Fotoperioridad
Agua 20%
temperatura
pH (medida de acidez o alcalinidad)
EC (conductividad eléctrica)
contenido de O2

Nutrientes 20%
composición
pureza

Medio de cultivo 20%


contenido de aire
contenido de humedad
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7. Conclusiones
• Se pudo obtener órganos de los explantes usando una hoja de tomate de árbol, de manera
masiva
• En la practica se determinó el porcentaje y tiempo de cremiento de los explantes de las
hojas del tomate de árbol
• Se identifico las diferencias entre el Medio MS y Ms con fitohormonas las cuales son que el
Ms no tiene todos los nutrientes necesarios para el crecimiento óptimo de la planta y el MS
con fitohormonas es un medio óptimo para el desarrollo del explante
8. Referencias Bibliográficas
Acosta, Belen. 2019. «Cultivo de Tomate de Árbol - Guía Práctica». ecologiaverde.com.
Recuperado 2 de enero de 2023 (https://www.ecologiaverde.com/cultivo-de-tomate-de-
arbol-2023.html).

Alejos Cabrera, Ruth, Gheraldine Ynga Huamán, Wilmer Gaspar Reyes, y Alexander Niño
Velásquez. 2021. «Manual de desinfección y esterilización del material de laboratorio de
alimento vivo: microalgas». Instituto del Mar del Perú - IMARPE.

Anón. 2020. «Placa de Petri – TP – Laboratorio Químico». Recuperado 31 de diciembre de 2022


(https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-e-instrumentos-
de-un-laboratorio-quimico/placa-de-petri.html).

Arcani Huanca, Juan José, y Luis Ramiro [tutor Velarde Chavez. 2018. «Equipos de laboratorio
clinico». Thesis.

Cando, Geraldo, Francys Braga, Rafaela Souza, y Claudinia Nudes. 2013. «- Biotecnología
vegetal y cultivo de plantas in vitro». - Biotecnología vegetal y cultivo de plantas in vitro.
Recuperado 2 de enero de 2023
(https://tecnal.com.br/es/blog/327_biotecnologia_vegetal_y_cultivo_de_plantas_in_vitro)
.
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Cárdenas-Bahena, Ángel, Sergio Sánchez-García, Carlos Tinajero-Morales, Víctor Manuel


González-Rodríguez, y Laura Baires-Várguez. 2012. «Hipoclorito de sodio en irrigación
de conductos radiculares: Sondeo de opinión y concentración en productos comerciales».
Revista Odontológica Mexicana 16(4):252-58.

Casas, Francesc Tresserra, Alameda Quitllet Francesc, Aneiros Fernández José, Añorbe Diaz
Loreto, Blavi Torres Judit, Bosch Pincep Ramón, Carrasco García Ángel Miquel, Català
Costa Isabel, Casajut Fibla Marta, Centeno Haro Macarena, Combalia Soriano Neus,
Corral Gayo Cesar, de la Villa Porras Isabel, Dinarès Fernández Carme M., Fabra Pañella
Gemma, Gallardo Campos Joana, González Miguez Clarisa, Gonzalez Moya Sara,
González Tormos Borja, Granados Carreño Rosario, Hernandez Salleras María, Jaén
Martínez Miguel Joaquin, Lerma Puertas Enrique, Lloveras Rubio Belen, Lozano
Figueras Abraham, Mancebo Marco Eva, Munné Bertran Isidre, Pallares Quixal Judith,
Pérez Ochoa Francisco, Sant Masoliver Francesc, Santacana Espasa Maria, Tarroch
Sarasa Xavier, Temprana Salvador Jordi, Tomás Arasa Bàrbara, Tresserra Casas
Francesc, Vasquez Dongo Carmen, y Vázquez de las Heras Ivonne. 2019. Guía de
Calidad en Citopatología: Societat Catalana de Citopatologia. Societat Catalana de
Citopatologia.

Doménech, Antonio, y Elena Garcia. 2014. «1 Medios de cultivo».

Francis Turner, Liliana, Librada Ramírez de Collazos, Fredy Arvey Rivera Páez, y Marco Fidel
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EL PROCESO DEL HIDRÓGENO PARA LA OBTENCIÓN DE ÁCIDO
CLORHÍDRICO». Thesis.
TECNOLOGÍA SUPERIOR EN BIOTECNOLOGÍA

INFORME PRÀCTICA / REPORTE APRENDIZAJE AUTÓNOMO

Nivel de Académico
Nombre de la materia / Semestre

Porta, Helena, Gladys Jiménez-Nopala, Helena Porta, y Gladys Jiménez-Nopala. 2020. «Papel de
las hormonas vegetales en la regulación de la autofagia en plantas». TIP. Revista
especializada en ciencias químico-biológicas 22. doi:
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Sandoval, Gregory Mejía. 2013. «Cuarto de cultivo».


TECNOLOGÍA SUPERIOR EN BIOTECNOLOGÍA

INFORME PRÀCTICA / REPORTE APRENDIZAJE AUTÓNOMO

Nivel de Académico
Nombre de la materia / Semestre

Anexos

Figura 2 Cortes de explantes Figura 3 Siembra

Figura 4 Desinfección de explantes


Figura 5 Contaminación de explantes

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