UNIVERSIDAD PRIVADA AUTÓNOMA DEL SUR

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE

QUÍMICO FARMACÉUTICO

“ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DEL EXTRACTO

ETANÓLICO DE HOJAS Y TALLOS DE Aristeguietia
gayana (Asmachilca) SOBRE Staphylococcus aureus
ATCC 25923, AREQUIPA – 2021”

PRESENTADA POR:
BACH. CUSI PEREZ, EDUARDO MILLER
BACH. PARI YANQUI, ALFREDO

PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE

QUÍMICO FARMACÉUTICO

ASESORA:

DRA. Q.F. GISELE MARIA DELGADO MONTOYA

AREQUIPA – PERÚ
2022
 UNIVERSIDAD PRIVADA AUTÓNOMA DEL SUR
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

TESIS
“ACTIVIDAD ANTIBACTERIANA DEL EXTRACTO
ETANÓLICO DE HOJAS Y TALLOS DE Aristeguietia
gayana (Asmachilca) SOBRE Staphylococcus aureus
ATCC 25923, AREQUIPA – 2021”

PRESENTADA POR:
BACH. CUSI PEREZ, EDUARDO MILLER
BACH. PARI YANQUI, ALFREDO

TESIS PARA OPTAR EL TÍTULO PROFESIONAL DE

QUÍMICO FARMACÉUTICO

APROBADO POR:
PRESIDENTE DEL JURADO : DR. BENJAMÍN EMILIO PAZ ALIAGA

SECRETARIO DEL JURADO : DRA. DIANA LUCIA DÍAZ MONTOYA

VOCAL DEL JURADO : DRA. ROMINA LESLIE RONDÓN CHAMBI

 DEDICATORIA

A mí querida hermana Celia, por haberme dado su apoyo en todo momento, por ser
mi mejor amiga y quien puso su alma, vida y corazón en mí, gracias a ti hermanita
por ser como eres y por esas palabras adecuadas en el momento oportuno.

A la personita más importante en mi vida, mí hijo Joseph Antonny, por quien me

encuentro aquí culminando un sueño más, a ti hijo querido por ser mi aliento, mis
ganas de luchar y de seguir adelante. Gracias por existir.

Alfredo Pari Yanqui

I
 DEDICATORIA

Primordialmente a Dios creador y bondadoso, por haberme permitido culminar mí

periodo académico.

A mis padres Eduardo y Delfina, por su apoyo incondicional en mi trayectoria académica,

a mí hijo quien siempre fue el motivo a seguir adelante, a mis hermanos por sus consejos
y palabras.

A mis compañeros de estudios por los momentos buenos y malos que siempre pasamos
juntos. Para la realización de exposiciones, tareas y proyecciones sociales, dándonos la
mano en todo momento.

Eduardo Miller Cusi Perez

II
 AGRADECIMIENTO

Agradecer primordialmente a Dios por su amor hacia a nosotros y permitirnos llegar

al desarrollo de nuestra carrera, por habernos dado fortaleza y sabiduría para asumir
los retos que se nos presentaron a lo largo de la misma.

Agradecemos a nuestra asesora de Tesis, Dra. Q.F. Gisele María Delgado Montoya,
por brindarnos la capacidad, oportunidad y experiencia científica en el proceso de
la realización de esta investigación.

Agradecemos al Dr. Q.F. Wilber Benito Ichocan, por sus enseñanzas en la parte
práctica para la realización de nuestra Tesis.

A todos ustedes, gracias

Alfredo y Eduardo

III
 RESUMEN

Aristeguietia gayana, más conocida por los pobladores de las zonas alto andinas
como asmachilca, es una planta utilizada en la medicina tradicional peruana por
sus múltiples beneficios a la salud humana.

En la presente investigación, se determinó el efecto antibacteriano in vitro del

extracto de hojas y tallos de Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre
Staphylococcus aureus ATCC 25923. Previo al desarrollo de la prueba se obtuvo
la concentración madre del extracto etanólico de asmachilca, a partir de la cual se
obtuvieron las concentraciones de 60, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 0.5, 0.25 y 0.125%. La
cepa bacteriana fue activada en caldo peptonado y agar manitol salado (AMS) a 37
°C por 24 horas. Posteriormente se preparó un inóculo a la concentración del

estándar N° 0.5 en la escala de McFarland de 1,5 x 108 UFC/mL, el cual se agregó

a caldo peptonado para determinar la Concentración Mínima Inhibitoria y
Concentración Mínima Bactericida para cada una de las concentraciones, dando
como resultado, que a partir de la concentración de 5% hasta 60% no presentaron
turbidez, por lo que se determinó la CMI a 5% y a partir de este resultado, estas
muestras se cultivaron y se determinó la CMB a 5%. A continuación, se procede a
realizar el sembrado de esta cepa bacteriana en placas Petri con agar Mueller-
Hinton y aplicar el extracto de asmachilca a diferentes concentraciones, lo que
permitió determinar el potencial antimicrobiano mediante la técnica de Kirby Bauer,
donde los resultados dieron que las concentraciones de 5%, 10%, 20%. 30%, 40%,
50%, y 60% del extracto de Aristeguietia gayana (asmachilca) produjeron halos de
inhibición de crecimiento entre 7 a 16 mm de diámetro; luego, estos resultados se
comparan con el estándar de la NCCSL, encontrando que a partir de la
concentración de 30% del extracto de asmachilca, el 50% de las unidades de
estudio presentan halos de inhibición que están dentro del rango de categoría
sensible y el 50% están dentro del rango de intermedio, por lo tanto, nuestro
extracto produjó una actividad antibacteriana sobre la cepa de Staphylococcus
aureus ATCC 25923 a las concentraciones de 30, 40, 50 y 60%.

Palabras clave.
Staphylococcus aureus, Aristeguietia gayana, efecto antibacteriano, sensibilidad
bacteriana.

IV
 ABSTRACT
Aristeguietia gayana, better known by the inhabitants of the high Andean areas as
asmachilca, is a plant used in traditional Peruvian medicine for its many benefits to
human health.

In the present investigation, the in vitro antibacterial effect of the extract of leaves
and stems of Aristeguietia gayana (asmachilca) on Staphylococcus aureus ATCC
25923 was determined. Prior to the development of the test, the mother
concentration of the ethanolic extract of asmachilca was obtained, from which
concentrations of 60, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 0.5, 0.25 and 0.125% were obtained. The
bacterial strain was activated in peptone broth and mannitol salt agar (MSA) at37 °C
for 24 hours. Subsequently, an inoculum was prepared at the concentration of
standard No. 0.5 on the McFarland scale of 1.5 x 108 CFU/mL, which was added to
peptone broth to determine the Minimum Inhibitory Concentration and Minimum
Bactericidal Concentration for each of the concentrations, giving as a result, that from
the concentration of 5% to 60% they did not present turbidity, for which the MIC was
determined at 5% and from this result, these samples were cultivated in the CMB
was determined at 5% . Next, this bacterial strain was seeded in Petri dishes with
Mueller-Hinton agar and the asmachilca extract was applied at different
concentrations, which allowed determining the antimicrobial potential using the Kirby
Bauer technique, where the results showed that concentrations of 5%, 10%, 20%.
30%, 40%, 50%, and 60% of the Aristeguietia gayana (asmachilca) extract produced
growth inhibition halos between 7 and 16 mm in diameter; then, these results are
compared with the NCCSL standard, finding that from a concentration of 30% of the
asmachilca extract, 50% of the study units present inhibition halos that are within the
range of the sensitive category and the 50% are within the intermediate range,
therefore, our extract produced an antibacterial activity on the Staphylococcus aureus
strain ATCC 25923 at concentrations of 30, 40, 50 and 60%.

Keywords.
Staphylococcus aureus, Aristeguietia gayana, antibacterial effect, bacterial
sensitivity.

V
 ÍNDICE

DEDICATORIA................................................................................................................. I
DEDICATORIA .................................................................................................................. II
AGRADECIMIENTO ......................................................................................................... III
RESUMEN................................................................................................................. IV
Palabras clave. ......................................................................................................... IV
ABSTRACT ................................................................................................................V
Keywords ..................................................................................................................V
INTRODUCCIÓN ............................................................................................................. 12
CAPÍTULO I .................................................................................................................... 14
1. EL PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN ..................................................................... 14
Descripción de la realidad problemática ........................................................................ 14
Formulación del problema ............................................................................................... 15
Problema principal ....................................................................................... 15
Problemas Secundarios............................................................................... 15
Justificación ..................................................................................................................... 16
Objetivos ........................................................................................................................... 17
Objetivo general ........................................................................................... 17
Objetivos Específicos .................................................................................. 17
CAPÍTULO II ................................................................................................................... 18
MARCO TEÓRICO .......................................................................................................... 18
Antecedentes investigativos ........................................................................................... 18
A nivel internacional .................................................................................... 18
A nivel nacional ............................................................................................ 19
A nivel local .................................................................................................. 20
Base Teórica ..................................................................................................................... 21
Aristeguietia gayana (Asmachilca) ................................................................. 21
Descripción .................................................................................................. 22
Taxonomía .................................................................................................... 23
Hábitat ........................................................................................................... 23
Extractos vegetales...................................................................................... 24
Staphylococcus aureus ............................................................................... 25
Descripción .................................................................................................. 25

VI
 Patogenicidad............................................................................................... 26
Actividad antimicrobiana ............................................................................. 26
Conceptos básicos .......................................................................................................... 26
Hipótesis ........................................................................................................................... 27
Hipótesis general ......................................................................................... 27
Hipótesis Especificas .................................................................................. 27
Variables ........................................................................................................................... 27
Identificación de Variables .......................................................................... 27
CAPÍTULO III .................................................................................................................. 29
2. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN............................................................... 29
Planteamiento metodológico ........................................................................................... 29
Nivel de la Investigación:............................................................................. 29
Tipo de Investigación................................................................................... 29
Diseño de la investigación........................................................................... 29
Descripción del ámbito de la investigación .................................................................... 29
Ubicación espacial ....................................................................................... 29
Ubicación temporal ...................................................................................... 29
Población, muestra y muestreo....................................................................................... 30
Población ...................................................................................................... 30
Muestra ......................................................................................................... 30
Muestreo ....................................................................................................... 30
Identificación de la unidad de estudio ............................................................................ 30
Criterios de Inclusión ................................................................................... 30
Criterios de exclusión .................................................................................. 30
Materiales y Métodos ....................................................................................................... 30
Materiales y reactivos .................................................................................. 30
Material biológico......................................................................................... 31
Obtención del extracto etanólico de Aristeguietia gayana (asmachilca) 31
Evaluación de la actividad antimicrobiana .................................................... 32
Reactivación de la cepa de Staphylococcus aureus ATCC 25923 ............ 32
Preparación de inóculo ................................................................................ 32
Determinación de la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) ................... 33
Determinación de la Concentración Mínima Bactericida (CMB) ............... 33

Determinación de la sensibilidad antimicrobiana por el método de

VII
 difusión en disco (Kirby-Bauer) ................................................................................ 33
CAPÍTULO IV .................................................................................................................. 35
RESULTADOS ................................................................................................................ 35
CAPÍTULO V ................................................................................................................... 46
DISCUSIÓN..................................................................................................................... 46
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ................................................................................ 51

VII
I
 ÍNDICE DE TABLAS

Tabla 1: Clasificación taxonómica de Aristeguietia gayana.................................. 24

Tabla 2: Operacionalización de variables .............................................................29

Tabla 3: Criterios de interpretación para difusión de disco de Oxacilina (mm) para

la inhibición de crecimiento de Staphylococcus aureus........................................ 35

Tabla 4: Concentración Mínima Inhibitoria del extracto alcohólico de Aristeguietia

gayana frente a Staphylococcus aureus.............................................................. 36

Tabla 5: Concentración Mínima Bactericida de Aristeguietia gayana frente a

Staphylococcus aureus ........................................................................................ 39

Tabla 6. Diámetros del halo de inhibición que produce el extracto etanólico de

Aristeguietia. gayana a diferentes concentraciones .............................................41

Tabla 7. Descriptivos estadísticos principales: media, desviación estándar y límites

inferior y superior de los tratamientos ...................................................................42

Tabla 8. Análisis de varianza ANOVA ..................................................................44

Tabla 9. Comparación de medias de los tratamientos (concentraciones de extracto

de A. gayana con acción inhibitoria del crecimiento de S. aureus) y el control
negativo mediante la prueba de diferenciación de Scheffe...................................44

Tabla 10. Comparación de las concentraciones del extracto etanólico de A. gayana

(%) y control negativo con el criterio de interpretación para la difusión de disco para
la inhibición de crecimiento de S. aureus ATCC 25923 según el NCCLS ............46

IX
 ÍNDICE DE FIGURAS

Figura 1: Aristeguietia gayana (asmachilca) .......................................................23

Figura 2: Obtención del extracto etanólico .........................................................33

Figura 3: Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) de Aristeguietia gayana frente a

Staphylococcus aureus ....................................................................................... 37

Figura 4: Concentración Mínima Bactericida (CMB) de Aristeguietia gayana frente a

Staphylococcus aureus ....................................................................................... 38

Figura 5: Comparación del diámetro del halo de inhibición de crecimiento de

Staphylococcus aureus ........................................................................................40

Figura 6: Comparación del diámetro del halo de inhibición de crecimiento de

Staphylococcus aureus ........................................................................................43
Figura 7. Comparación de las concentraciones del extracto etanólico de A. gayana
(%) y control negativo ...........................................................................................45

X
 ÍNDICE DE ANEXOS

Anexo 1: Clasificación taxonómica de Aristeguietia gayana (asmachilca)………55

Anexo 2: Recolección de la planta Aristeguietia gayana (asmachilca) ................56

Anexo 3: Cepa de Staphylococcus aureus ATCC 25923 .................................... 57

Anexo 4. Plaqueo con agar Müeller-Hinton ........................................................ 58

Anexo 5. Obtención de la Solución madre del extracto de Aristeguietia gayana 59

Anexo 6. Originalidad de Trabajo-Antiplagio.. .......................................................... 60

XI
 INTRODUCCIÓN

La Organización Mundial de la Salud (OMS) considera y recalca que hay una serie
de infecciones prioritarias y completamente resistentes a los antibióticos debido al
daño que pueden causar en la salud de las personas. Uno de los problemas que se
plantea sobre estos microorganismos Staphylococcus aureus es, que muchas cepas
han desarrollado resistencia a los antibióticos. Además de ser muy frecuentes en los
hospitales, las cepas de SARM Staphylococcus aureus (resistente a meticilina) son
cada vez más habituales en las infecciones adquiridas en la comunidad. La OMS ha
declarado que la resistencia a los antimicrobianos es una de las diez principales
amenazas de salud pública a las que se enfrenta la humanidad. El uso indebido y
excesivo de los antimicrobianos es el principal factor que determina la aparición de
patógenos farmacorresistentes, los encargados del sector salud deben de invertir en
el descubrimiento de nuevos fármacos antimicrobianos (1).

En estos años últimos se ha realizado investigaciones dirigidas a buscar alternativas

y nuevas terapias antimicrobianas como opciones alternas a los tratamientos con
antibióticos conocidos debido a la alta tasa de resistencia que presentan los
patógenos microbianos en todo el mundo. Es importante buscar soluciones a este
problema porque se trata de la salud de las personas e involucra a todos los países
y estamentos mundiales debido a su impacto en la salud pública, como en el costo
beneficio que implica tratar estas patologías que causan finales dolorosos (2).

Nuestro Perú es uno de los países con la mayor biodiversidad en el mundo, muchas
de sus especies vegetales pueden ser aprovechadas de forma sostenible por las
industrias, uno de los géneros cuyo uso se ha extendido a casi todas las 8 regiones
del Perú. La planta de Aristeguietia gayana (asmachilca) es endémica lo cual solo
crece aquí en las zonas andinas de nuestro país y fue usada desde los tiempos
incaicos para tratar problemas del sistema respiratorio, preparado como un
cocimiento, y tiene acción expectorante y se trata el asma (3).

El incentivar a seguir estudiando los extractos de las plantas y examinar sus

principios activos nos permitirá conocer aún más los recursos naturales que nos
rodea, invertir tiempo y dedicación ayudará a darnos cuenta que somos un país que

12
podemos dar materia de significativo gran valor terapéutico con grandes beneficios
para la salud de las personas (4).

La finalidad de nuestro proyecto de investigación, es determinar la actividad

antibacteriana del extracto etanólico de Aristeguietia gayana sobre la cepa de
Staphylococcus aureus. Esta planta es recolectada en faldas del volcán Ubinas en
el departamento de Moquegua, donde existe una variedad de plantas, es muy
interesante investigar esta planta por su emanación muy notable. Al comprobar que
tiene efecto antibacteriano, será un indicador para poder seguir haciendo
investigaciones, e incentivando a que A. gayana, tiene mucho que dar y sobre todo
a hacer saber a los pobladores quienes son los que viven en estas zonas y ver la
probabilidad de poder cultivarla. Así de esta forma, se aportará a la población datos
actuales y reales, que servirán a futuros estudios.

13
 CAPÍTULO I

EL PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN

1.1. Descripción de la realidad problemática

El Perú es un país que posee ocho regiones naturales: costa o chala, Yunga,
Quechua, Suni, Jalca o Puna, Janca o Cordillera, Rupa Rupa o Selva alta, y Omagua
o Selva baja, donde alberga flora y fauna en distintas variedades, también tiene una
gran biodiversidad (plantas, animales, hongos y microorganismos) y experiencia en
la utilización tradicional de plantas medicinales, fuente de recursos naturales para la
investigación y desarrollo de fitomedicamentos por ello diversos pueblos indígenas
del Perú utilizaron desde tiempos inmemoriales las plantas medicinales,
asignándoles nombres comunes o vulgares, esto origina que, en el saber popular, a
una planta se le otorgue más de un nombre de acuerdo a la región, idioma o dialecto
que se use. Toda planta o especie vegetal posee sustancias que pueden ser
empleadas para intereses terapéuticos y cuyos principios activos pueden servir de
precursores para la síntesis de nuevos fármacos (5).

Desde hace miles de años, las plantas tuvieron gran importancia para el ser humano,
en diferentes maneras de uso, tales como alimenticio, medicinal, ritual, entre otros.
Es por eso que se dio a que sea uno de los primeros organismos en ser domesticados
y cultivados para el cual brinde compuestos que actúen con efectos antimicrobianos,
aromatizantes, relajantes, estimulantes, etc. (6).

Por ello, la importancia de investigar plantas medicinales se aumentó notablemente,

en el transcurso de los años, haciendo que estas prácticas ancestrales sirvan para
tratar afecciones: fiebre, resfriados, alergias, infecciones urinarias, hemorragias, etc.
Empleando procedimientos terapéuticos como baños de hierbas, sahumerios,
infusiones, emplastos en fracturas óseas, bebidas, brebajes, infusiones, entre otros.

En el presente trabajo nos centramos en Aristeguietia gayana (asmachilca), planta

medicinal que fue muy usada en los tratamientos de enfermedades respiratorias, por
sus excelentes propiedades curativas (7).

14
Se ha comprobado el efecto antibacteriano de Aristeguietia gayana (asmachilca),
sobre la cepa de Staphylococcus aureus, ya que en estudios sobre asmachilca
presentan componentes y propiedades beneficiosas, para tratar afecciones
musculares y resfrío común.

1.2. Formulación del problema

1.2.1. Problema principal
 ¿Cuál será la actividad antimicrobiana del extracto etanólico de Aristeguietia
gayana (asmachilca) sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923?

1.2.2. Problemas Secundarios

 ¿Cuál será la concentración mínima inhibitoria (CMI) del extracto etanólico de
hojas y tallos de Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre Staphylococcus
aureus ATCC 25923?
 ¿Cuál será la concentración mínima bactericida (CMB) del extracto etanólico
de Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre Staphylococcus aureus ATCC
25923?
 ¿Cuál será la sensibilidad antibacteriana del extracto etanólico de
Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre las cepas Staphylococcus aureus
ATCC 25923?

15
 1.3. Justificación

Asmachilca, es una planta utilizada por los pobladores de los andes y valles
interandinos, tiene usos medicinales como expectorante, contra la tos y
antiasmática, se conoce también como estimulante de la función diurética. También
se recomienda en problemas dérmicos, inflamaciones y esguinces. La hoja suele
utilizarse en cuadros de asma bronquial, crisis asmática, el tallo es utilizado en
cuadros de asma bronquial, broncodilatador y expectorante. El uso tradicional es la
vía oral, en cocimiento de 15 – 20 gr. De hojas y tallos en un litro de agua. Con esta
investigación se pretende rescatar, contribuir y preservar el conocimiento tradicional
sobre las plantas con propiedades medicinales para tratar diversas enfermedades
a los pobladores de las zonas alto andinas, de esta manera transmitir a las nuevas
generaciones las propiedades antibacterianas de la asmachilca (6).

Las infecciones bacterianas son algunas de las enfermedades responsables de un

gran número de muertes en el mundo, muchas de estas afecciones pueden ser
tratadas con preparados herbarios, la mayoría de estos se elaboran a base a las
hojas de las plantas (31,34%), planta entera (18,66%), flores (12,69%) y tallos
(17,16%) que usan con menos frecuencia (8).

Las infecciones, en particular, por las cepas de Staphylococcus aureus son muy
comunes y cada vez más difíciles de tratar debido a la formación generalizada de
resistencia a los medicamentos (8).

Los Staphylococcus aureus es uno de los seis microorganismos más comunes en la

práctica médica diaria, que causa un sin número de enfermedades, (simples hasta
muy graves), con alto grado de patogenicidad, coloniza piel, fosas nasales, región
inguinal, axilas, región del periné y faringe (9).

Con esta investigación se pretende demostrar el efecto antibacteriano de los

extractos etanólico de Aristeguietia gayana (asmachilca) que son utilizados en la
medicina tradicional de algunas localidades aledañas a la ciudad de Moquegua. La
planta en mención podría ofrecer un buen efecto antibacteriano frente a
Staphylococcus aureus ATCC 25923, responsable de infecciones tanto en infantes,
niños y personas adultas (9).

16
Estudios en el Perú muestran que existe una frecuencia de infección por MRSA,
sobre todo en hospitales de atención compleja como UCI, Unidades de Quemados,
centros de terapia de Cáncer y Unidades de Cirugía compleja. Es lo cual nos lleva
a que trabajemos con esta cepa de Staphylococcus aureus ATCC 25923, porque
también se ha demostrado que son muy resistentes a otros antibióticos.

Con respecto a nuestra metodología de extracción por el método de maceración

alcohólica (asmachilca), se decidió este método ya que a consecuencias en
pandemia no se puede asistir a laboratorios presencialmente por temor al contagio
del virus COVID-19, nuestro método de maceración es factible y económicamente
menos costoso.

1.4. Objetivos
1.4.1. Objetivo general
 Determinar la actividad antibacteriana del extracto etanólico de Aristeguietia
gayana (asmachilca) sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923.

1.4.2. Objetivos Específicos

 Determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) del extracto etanólico de
Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre Staphylococcus aureus ATCC
25923.
 Determinar la concentración mínima bactericida (CMB) del extracto etanólico
de Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre Staphylococcus aureus ATCC
25923.
 Determinar la sensibilidad antibacteriana del extracto etanólico de
Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre las cepas Staphylococcus aureus
ATCC 25923.

17
 CAPÍTULO II
MARCO TEÓRICO
2.1. Antecedentes investigativos
2.1.1. A nivel internacional
Colegate S.; et. al. 2015, Estados Unidos, en su investigación titulada “Pro-toxic
dehydropyrrolizidine alkaloids in the traditional Andean herbal medicine asmachilca”.
La asmachilca es una hierba medicinal peruana, Aristeguietia gayana (asmachilca)
de familia (Asteraceae). Esta planta se hizo por decocción, mostrando su acción
broncodilatadora, en el tratamiento de alergias respiratorias, resfriados comunes y
asma bronquial. Pero de todas las muestras realizadas de asmachilca y las
preparaciones en infusiones de té tienen concentraciones toxicológicamente
relevantes y se plantea la no disponibilidad de dicha planta en el mercado peruano
e internacional (10).

Corzo D. 2018, México, presentó su investigación titulada “Evaluación de la actividad

antimicrobiana del extracto etanólico de Cestrum buxifolium Kunth”. La
preocupación es la proliferación de enfermedades causadas por microorganismos
patógenos, lo que constituye un factor de riesgo para la salud pública, es por esto
que se buscan fuentes naturales que inhiban el crecimiento bacteriano;
descubriendo en las plantas compuestos bioactivos para tal fin. Se evalúa la
actividad antimicrobiana de los diferentes órganos de la especie frente a
Staphylococcus aureus, preparando el extracto etanólico de los frutos y hojas de
Cestrum buxifolium Kunth, donde ninguno de los extractos evaluados presentó
inhibición frente Staphylococcus aureus (11).

Pino N. y Stashenko E. 2009 Colombia, en su trabajo de investigación titulada

“Validación antibiótica de plantas medicinales del noroeste de Colombia contra
Staphylococcusaure. Recolectaron plantas para hacer los extractos etanólicos y
buscar el efecto antibacteriano frente Staphylococcus aureus intentando buscar
nuevos medicamentos antibacterianos para tratar enfermedades infecciosas ante la
comprobada resistencia de Staphylococcus aureus, en este trabajo se evaluaron
extractos de 27 plantas usadas contra infecciones producidas por esta bacteria.

18
De las 27 especies agrupadas en 4 familias botánicas (Gesneriaceae 9 spp,
Melastomataceae 3 spp, Piperaceae 9 spp, y Rubiaceae 6 spp), donde 14 (52%)
produjeron inhibición total de Staphylococcus aureus y 10 (37%) produjeron resistencia
de Staphylococcus aureus (12).

2.1.2. A nivel nacional

Espinoza T. et al. del 2014 en su Tesis titulada “Marcha Fitoquímica de Aristiguietia
Gayana, ‘asmachilca’’. Del departamento de química de la Universidad Agraria de
la Molina nos dejan en su estudio realizado que, las hojas, suele utilizarse en
cuadros de asma bronquial y crisis asmática, y el tallo, en cuadros de asma
bronquial, broncodilatador y expectorante, también se recomienda en problemas
dérmicos. (asmachilca) aparte de ser considerado un broncodilatador y
antiasmático, se le conoce como estimulante de la función diurética. Nos muestran
una dosificación como cocimiento de 15 - 20 gr. de tallos y hojas en un litro de agua,
hervir por cinco minutos, tomar una taza tres veces al día, y las hojas poner como
parches sobre la piel para tratar esguinces de tobillos o golpes (13).

Bonilla P. et al. año 2006, en su investigacion “Efecto Relajante del Extracto

Alcohólico de las Hojas de Eupatorium gayanum (asmachilca), sobre Órganos
Aislados de Rata”. Del Instituto de Ciencias Farmacéuticas y Recursos Naturales de
la UNMSM. Realizaron la extracción alcohólica de 200 gr de polvo de las hojas de
(asmachilca) en un litro deetanol puro, por 7 días, filtrándose y concentrándose a
sequedad en una estufa con aire circulante a 38 °C obteniéndose un extracto
alcohólico nos da como evidencia que el extracto etanólico de las hojas de
(asmachilca) ha presentado efectos relajantes sobre el músculo liso endotraqueal,
lo cual ayudaría a explicar el efecto antiasmático y también se ha observado el efecto
relajante sobre la aorta, duodenoe íleon de ratas (14).

Frizzi J. 2020, en su investigacion titulada “Asmachilca: Vernacular name of

Eupatorium triplinerve Vahl, Aristeguietia discolor R.M. King & H. Rob.,
Aristeguietia gayana Wedd, Baccharis sp. (Asteraceae), Peru”. De la Universidad
Nacional de Trujillo, departamento de Farmacotecnia, nos dice en sus resultados
que la planta de Aristeguietia gayana (Asmachilca) en la revisión de 66 documentos,
tiene efecto beneficioso para tratar problemas respiratorios como el asma
bronquial, debido a su efecto

19
broncodilatador, en tratamiento adicional para tos, resfriados, incluso como
antiinflamatorio (15).

Rivas E. et al 2012, en su trabajo de investigación “Estudio de la actividad analgésica

de extractos metanólicos de Aristeguietia discolor (pulmonaria) en ratones frente
al ibuprofeno” de la Universidad USMP, en su investigación se evaluó el efecto
analgésico y encontrando una actividad positiva del extracto metanólico de
Aristeguietia discolor(pulmonaria) a las dosis de 750 mg/kg, del extracto metanólico
dándose por vía oral; luego de lapso de tiempo de una hora de administración se
encontró que los efectos analgésicos de pulmonaria eran comparables al Ibuprofeno
control (16).

2.1.3. A nivel local

Neira J. 2018, en su Tesis titulada “Evaluación de la Actividad Antimicrobiana de los
Extractos Etanólico de las Plantas Medicinales Utilizadas por los Pobladores de
Tuctumpaya, Quequeña y Chiguata, Frente a Bacterias Gram positivas:
Staphylococcus aureus,- Streptococcus pneumoniae causantes de infecciones
de importancia médica” en la facultad de Ciencias Biológicas UNSA realizaron su
investigación sobre el efecto antibacteriano de los extractos etanólicos de cuatro
plantas utilizadas por los pobladores de las zonas de Quequeña, Tuctumpaya y
Chiguata. Dando como resultado que todos los extractos poseen efecto
antibacteriano ante las especies bacteriana Staphylococcus aureus, pero que las de
mayor eficacia son los extractos de Origanum vulgare y Rosmarinus oficinalles (17).

Huamani E. y Huaypar L. 2020, en su Tesis titulada “comparación del efecto

antibacteriano del extracto etanólico de tres ecotipos de senecio nutans
(chachacoma) sobre la cepa de “Staphylococcus aureus” de la universidad
autónoma del sur, en sus resultados obtenidos de su investigación muestra
claramente que la actividad antibacteriana de acuerdo al lugar donde se cultivan las
especies vegetales, ya que en esta investigación se encontró que la chachacoma
extraída de la ciudad de Arequipa presentó mayor actividad antibacteriana y halo
inhibitorio frente a Staphylococcus aureus. Este efecto podría deberse a la diferencia
en la composición química y metabolitos de cada ecotipo (18).

20
Calachua O. 2019, en su tesis titulada “Efecto antibacteriano in vitro de extractos
de Ruta graveolens sobre Staphylococcus aureus” de la UNSA, el presente estudio
se desarrolló la prueba de sensibilidad en placas de agares diferentes, los cuales
tenían una concentración de 100% y 80% y presentaron un halo de inhibición
promedio de 20.5 y 18.3 mm, lo que nos determina el efecto antibacteriano del
extracto etanólico de Ruta graveolens sobre Staphylococcus aureus (3).

21
 2.2. Base Teórica

2.2.1. Aristeguietia gayana (asmachilca)

Frizzi J. Ganoza, autora correspondiente de “(Asmachilca) Nombre vernacular de

Eupatorium triplinerve Vahl, Aristeguietia discolor R.M. King & H. Rob., Aristeguietia
gayana Wedd, Baccharis sp. (Asteraceae), uso tradicional (Asma bronquial) y otros
usos en el Perú” de la Facultad de Farmacia y Bioquímica, Trujillo-Perú. En sus
resultados de tres especies que comparten el nombre de ¨asmachilca¨ las cuales
son: Eupatorium triplinerve/Ayapana, triplinervis/Eupatorium ayapana, Aristeguietia
gayana/Eupatorium gayana y Baccharis sp. mientras que Aristeguietia
discolor/Eupatorium discolor, tiene otro nombre vernacular ¨Huamanchilca¨,
¨Chilca¨ o ¨Chilca negra¨, Las cuatro especies (Asteraceae) poseen el mismo efecto
beneficioso para el tratamiento de problemas respiratorios como el asma bronquial,
debido a su efecto broncodilatador, además tratan la: tos, resfríos, inclusive como
antiinflamatorio.

Rainer B. y Douglas S. 2016, “Plantas medicinales de los Andes y la Amazonia la

Flora Mágica y Medicinal del Norte del Perú”, Aristeguietia gayana, es clasificada
como una planta de la familia Asteraceae, se la considera una hierba o arbusto, que
puede crecer tanto en los andes como en la costa, generalmente la encontramos
entre 2000-3000 msnm. Esta planta es usada para tratar diferentes afecciones como
tos, bronquitis, dolor de cabeza, resfrío, asma, y enfermedad pulmonar, utilizándose
flores, hojas y tallos, fresco o seco. Los pobladores suelen hervir 5g en un litro de
agua por 3-4 minutos, tomando un litro de esta cocción cada día hasta que se
manifieste la mejoría (19).

22
 Figura 1. Aristeguietia gayana (asmachilca) fotografía tomada en las faldas
del volcán Ubinas, departamento de Moquegua.
Fuente: Elaboración propia.

2.2.1.1. Descripción

Es una planta herbácea de 1 m de altura, sus hojas presentan vellosidades, olor

fuerte y penetrante. Presenta corolas regulares, con cinco dientes o lóbulos o bien
son tubulosas y regulares las del centro o del llamado botón central, en forma de
lengüecitas de tres dientes en la periferia.

23
 2.2.1.2. Taxonomía

Tabla 1: Ubicación taxonómica de Aristeguietia gayana (asmachilca).

Categoría taxonómica Descripción

Reino Plantae

División Magnoliophyta

Clase Magnoliopsida
Subclase Asteridae

Orden Asterales

Familia Astereaceae

Subfamilia Asteroideae

Tribu Eupatorieae

Género Aristeguietia

Especie Aristeguietia gayana (Wedd) R.M. King

H. Rob

Fuente: Herbarium Arepvipense (HUSA) de la Universidad Nacional de San

Agustín de Arequipa.
Fuente: Elaboración propia.

2.2.1.3. Hábitat

La planta Aristeguietia gayana (asmachilca) es una planta endémica peruana que

florece en verano, su hábitat está próxima a fuentes de agua. Sólo sobrevive por
encima de los 2000 a 3000 msnm. En el Perú se ubica en la vertiente occidental de
los andes y valles interandinos (7)

Normas Básicas de Recolección de Plantas Medicinales

Nociones generales de anatomía vegetal que debemos seguir con el fin de no alterar
los componentes de las partes empleadas para su uso, estas son:

Se deben escoger solamente plantas sanas y bien limpias, que no estén

deterioradas. No lavar las hojas a excepción de las raíces y tubérculos.
24
No deben recogerse cuando llueve, nieva o el medio ambiente está húmedo. El
mejor momento para la recolección son las primeras horas de la mañana, de 5 a 8
a.m. y en la tarde de 5 a 7 p.m. Teniendo especial cuidado que los ejemplares
elegidos estén secos del rocío matutino.

La edad de los vegetales influye de una manera particular en la composición de su

contenido en "complejos biológicos activos", y por consiguiente en las propiedades
que nos van a ser útiles

La recolección debe realizarse en canastas y/o sacos, bolsos de papel, etc.

2.2.2. Extractos vegetales

Los extractos vegetales son productos extraídos directamente de los frutos, hojas,
semillas o raíces de una planta, los cuales contienen componentes que pueden
realizar una función beneficiosa en el organismo y se han definido como un
concentrado obtenido pro tratamiento de productos vegetales con solventes
apropiados, tales como agua, etanol o éter, de elementos solubles, constituidos por
una mezcla de principios activos y sustancias inertes que se producen de la totalidad
o de partes de una planta fresca o seca (20).

Los extractos son preparados desde una consistencia sólida, líquida o intermedia,
pero generalmente de un material vegetal desecado, y obtenido al evaporar parcial
o totalmente el disolvente en los líquidos extractivos de origen vegetal (17).

- Infusión: Consiste en someter la materia vegetal en contacto con el solvente a una

temperatura igual al de ebullición del agua por cinco minutos (21).

- Decocción o Cocimiento: Este procedimiento consiste en llevar la materia

vegetal más menstruo a la temperatura de ebullición del agua, manteniendo esta
temperatura durante un tiempo de 15 a 30 minutos (21).

- Maceración: La maceración se entiende al poner en contacto prolongado durante

cierto tiempo la materia vegetal con el menstruo, en el cual el menstruo actúa
simultáneamente sobre todas las proporciones de la droga, circulando a través en
todas las direcciones y sentidos y disolviendo sus principios activos hasta producirse
una concentración en equilibrio con la del contenido celular. Este tipo de

25
extracto se protege de la luz, para evitar posibles reacciones y debe agitarse
continuamente, el tiempo de maceración va entre cuatro y diez días, cuanto mayor
sea la relación entre el líquido extractivo y la droga, más favorable será el
rendimiento (21).

- Digestión: Es un tipo de maceración que se da a una temperatura suave de 50 o

60° C. Al aumentar medianamente la temperatura se consigue un mayor rendimiento
de la extracción, haciendo que el solvente pueda ingresar más rápidamente al
interior de las células y así extraer los principios activos (21).

- Lixiviación o Percolación: Es el método oficial de extracción, descrito en la

Farmacopea Americana, USP XXX. Consiste en que el menstruo atraviese la masa
de materia vegetal pulverizada en un solo sentido, alcanzando concentraciones altas
de tal modo que el equilibrio entre el solvente dentro y fuera del marco nunca se
alcanza, por lo que la droga bañada siempre por nuevas proporciones de menstruo
acaba por ceder todos sus componentes solubles de manera progresiva. Este tipo
de extracción se realiza en recipientes cilíndricos o cónicos (percoladores), que
poseen dispositivos de carga y descarga, lográndose una extracción total de los
principios activos (21).

- Soxhlet: Este recurso de extracción es una técnica basada en la separación

sólido-líquido, en continuo, empleando un disolvente, con posterior evaporación de
éste y pesada final del residuo. Se usa para la especificación del contenido graso en
muestras de diferente naturaleza (21).

2.2.3. Staphylococcus aureus

2.2.3.1. Descripción

Staphylococcus aureus están conformados por cocos Gram positivos, con un

diámetro de 0.5 a 1.5 μm, agrupados como células únicas, en pares y cadenas
cortas. El médico cirujano Alexander Ogston introdujo el nombre de Staphylococcus,
del griego Staphyle que significa racimo de uvas, para describir a los cocos
responsables de inflamación y supuración. Son organismos bacterianos no móviles,
no poseen cápsula, aunque existen algunas cepas que desarrollan una cápsula de
limo, son anaerobias facultativas. La mayor parte de los estafilococos

26
producen catalasa (enzima capaz de desdoblar el peróxido de hidrógeno en agua
y oxígeno libre) (17).

Staphylococcus aureus es el causante de un gran número de infecciones graves

como infecciones por heridas, septicemias, endocarditis y osteomielitis. El correcto
diagnóstico de los gérmenes causantes de infecciones en pacientes, tanto
hospitalizados como ambulatorios es importante al abordar el tratamiento adecuado
para su eliminación (22).

2.2.3.2. Patogenicidad

Staphylococcus aureus, son colonizadores en pacientes hospitalizados y en

pacientes inmunodeprimidos que producen patologías desde un simple absceso
dérmico hasta una septicemia mortal en mayoría los más sobre expuestos son los
niños y adultos con una enfermedad degenerativa como cáncer, VIH, diabetes y
diálisis (23).

2.2.4. Actividad antimicrobiana

Para la evaluación preliminar de la actividad antimicrobiana dependen de los

factores y métodos de difusión en disco y difusión del pozo en agar, mediante los
cuales se determina en forma cualitativa el efecto antimicrobiano de los extractos de
plantas sobre los microorganismos de interés, los resultados obtenidos se expresan
midiendo el diámetro de los halos de inhibición producido por los extractos (24).

2.3. Conceptos básicos

2.3.1. Metabolito secundario

Los metabolitos secundarios en plantas representan mecanismos de defensa
contra la presencia de microorganismos patógenos y la depredación por insectos o
herbívoros, otros son responsables de virtudes culinarias, medicinales o venenosas
(2).

27
 2.3.2. Medio de cultivo
Es una forma muy general que nos permite el crecimiento de microrganismo en el
laboratorio porque se le aporta un medio con nutrientes y condiciones fisicoquímico
adecuadas para su desarrollo. Un medio de cultivo es aquel que contiene agua,
nutrientes esenciales para su metabolismo, usualmente se utilizan las placas (25).

2.3.3. Crecimiento bacteriano

Implica la división celular llevando a un aumento exponencial de una población de
células se puede considerar al incremento de células individuales, por un lado, y por
el otro se considera (proliferación de la población) (2).

2.4. Hipótesis
2.4.1. Hipótesis general
 Dado que existen referencias que nos indican que Aristeguietia gayana
(asmachilca) ha presentado efecto antibacteriano, es probable que exista
efecto antibacteriano sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923.

2.4.2. Hipótesis Específicas

 Es probable determinar la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) del extracto

etanólico de hojas y tallos de Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre
Staphylococcus aureus ATCC 25923.
 Es probable determinar la Concentración Mínima Bactericida (CMB) del
extracto etanólico de hojas y tallos de Aristeguietia gayana (asmachilca)
sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923.
 Es probable evaluar la sensibilidad antibacteriana del extracto etanólico de
Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre las cepas Staphylococcus aureus
ATCC 25923.

2.5. Variables
2.5.1. Identificación de Variables
Variable independiente: Extracto etanólico de hojas y tallos de Aristeguietia
gayana (asmachilca).

28
Variable dependiente: Crecimiento microbiano de Staphyloccus auerus ATCC
25923.

Tabla 2. Operacionalización de Variables

VALORES DEL
VARIABLES INDICADOR
INDICADOR

Variable Independiente Concentración del

extracto etanólico de
Extracto etanólico de hojas hojas y tallos de %
y tallos Aristeguietia gayana Aristeguietia gayana
(asmachilca) (asmachilca)

Concentración - Sí presenta turbidez

mínima inhibitoria - No presenta turbidez

Variable Dependiente
- Sí presenta
Concentración
crecimiento de UFC
mínima bactericida
- No presenta
Actividad antibacteriana
sobre Staphylococcus crecimiento de UFC
aureus ATCC 25923
mm de diámetro del
Sensibilidad
halo de inhibición
bacteriana método de
Kirby-Bauer

Fuente: Elaboración propia.

29
 CAPÍTULO III

METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN

3.1. Planteamiento metodológico

3.1.1. Nivel de la Investigación:
Experimental
3.1.2. Tipo de Investigación
Según manipulación de variables: Experimental.

Según número de mediciones: Transversal.

Según la temporalidad: Prospectivo.

Enfoque: Cuantitativo.

Por el propósito o finalidad: Aplicada.

Paradigma: Positivista.

3.1.3. Diseño de la investigación

Diseño experimental completamente al azar.

Tratamiento: extracto etanólico de Aristeguietia gayana a las concentraciones de

60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 0.5%, 0.25%, 0.125%.

3.2. Descripción del ámbito de la investigación

3.2.1. Ubicación espacial
La presente investigación se llevó a cabo en las instalaciones del Laboratorio
Industrias Médicas y Farmacéuticas S.R.L de la ciudad de Arequipa.

3.2.2. Ubicación temporal

El presente trabajo de investigación se llevó a cabo en los meses de agosto,
septiembre, octubre, noviembre y diciembre del 2021.

30
 3.3. Población, muestra y muestreo
3.3.1. Población

Planta de Aristeguietia gayana (asmachilca) recolectadas en las faldas del volcán

Ubinas, distrito de Ubinas departamento de Moquegua.

3.3.2. Muestra

Corresponde a 500 gr hojas y tallos de Aristeguietia gayana (asmachilca).

3.3.3. Muestreo

El muestreo fue no probabilístico.

3.4. Identificación de la unidad de estudio.

Tubos y placas con medio de cultivo inoculados con Staphylococcus aureus
ATCC 25923.
3.4.1. Criterios de Inclusión
Hojas y tallos en buen estado de conservación.

3.4.2. Criterios de exclusión

Placas y tubos contaminados

3.5. Materiales y Métodos

3.5.1. Materiales y reactivos
 Balanza analítica Alexander MOBBA EXCELL SI-130
 Autoclave marca “GREETMED” YX-280D
 Espectrofotómetro “BOECO” Germany
 Incubadora
 Refrigerador
 Mortero
 Pipetas
 Micropipetas
 Lancetas de micropipetas amarilla y azul.
 Matraces
 Probetas
 Embudo Erlenmeyer
 Vaso de precipitados

31
  Tubos de ensayo
 Baquetas
 Balón
 Mechero Bunsen
 Gasas y algodón estériles
 Placas Petri S/DIV. 90x15mm-BIODES producto estéril
 Gradillas
 Agar Müeller Hinton
 Agar manitol salado
 Caldo peptonado
 Alcohol etílico 70°
 Agua destilada
 Purificador de osmosis inversa “AQUAPRO”
 Frascos
 Cocinas eléctricas “Finezza”
 Papel filtro de paso rápido y lento
 Papel aluminio
 Regla Vernier

3.5.1.1. Material biológico

 Cepa de Staphylococcus aureus ATCC 25923

2.5.2. Obtención del extracto etanólico de Aristeguietia gayana (asmachilca)

La planta recolectada del distrito de Ubinas, Aristeguietia gayana (asmachilca) una

vez recolectada es llevada al laboratorio fue sometida a un lavado con agua
destilada para eliminar polvo y tierra, posteriormente, es extendida sobre una mesa
en papel kraft a temperatura ambiente bajo sombra para su desecación por 20 días.

El extracto etanólico de asmachilca fue obtenido por maceración, para lo cual se

pesa 500 gr. de planta pulverizada y es colocada dentro de un frasco, a continuación,
se le añade 1 L de etanol de 70°, se dejó macerar por 20 días en un lugar fresco con
agitación diaria. Al término de los 20 días se procedió a filtrar con papel filtro rápido
y lento.

32
Obtuvimos de la solución madre 241.8 gr. Luego realizamos las concentraciones de
(60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 0.5%, 0.25%, y 0.125%).

Figura 2. Obtención del extracto etanólico de Aristeguietia gayana. (asmachilca)

Fuente elaboración: propia.

3.6. Evaluación de la actividad antimicrobiana

3.6.1. Reactivación de la cepa de Staphylococcus aureus ATCC 25923

La cepa de Staphylococcus aureus ATCC 25923 fue solicitada al laboratorio

GENTLAB del Perú S.A.C. con su respectiva cadena de frío de 2° a 8°C. Para la
reactivación de la cepa hemos aclimatado a temperatura ambiente por 30 minutos,
mediante hisopado se contactó con caldo peptonado, luego se sembró en placasPetri
con agar manitol salado para su posterior proliferación, se sembró en dos placas y
fueron llevadas a incubación, por 24 horas a temperatura de 37°C.

3.6.2. Preparación de inóculo

Para la preparación del inóculo, se tomó una colonia aislada de la cepa

Staphylococcus aureus ATCC 25923, la cepa en estudio se llevó a un tubo con suero
fisiológico hasta alcanzar una turbidez similar a la escala de McFarland de es decir a
una concentración de 1,5 x 108 UFC (unidades formadoras de colonias) /mL.

33
 3.6.3. Determinación de la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI)

Para evaluar la CMI se trabajó con 10 tubos de ensayo con 5 ml de caldo peptonado
y se inoculó 1 mL de Staphylococcus aureus cepa ATCC 25923 preparado
previamente en el tubo de la suspensión, después se añadió 1 mL del extracto de
Aristeguietia gayana a las concentraciones de 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%,
0.5%, 0.25%, 0.125%, utilizando una micropipeta, se agitaron los tubos y se llevaron
a incubadora por 24 horas a 37° C, lo cual presentó turbidez en los tubos de
concentraciones de (0.5%, 0.25%, 0.125%) y nos indica el crecimiento de la cepa,
que a menor contracción del extracto la turbidez es más notoria.

3.6.4. Determinación de la Concentración Mínima Bactericida (CMB)

En el procedimiento de CMI de los tubos de ensayo estudiados, se procede a

sembrar en placas Petri, a un volumen de 20 mL de agar Müeller-Hinton para
Staphylococcus aureus ATCC 25923. Se sellarán las placas Petri y se dejará
incubando por 24 horas a una temperatura de 37°C. para luego evaluar el
crecimiento bacteriano, a fin de determinar el efecto antibacteriano del extracto
etanólico de hojas y tallos de Aristeguietia gayana (asmachilca) capaz de destruir
el 99.9% de una muestra inoculada en condiciones estandarizadas.

3.6.5. Determinación de la sensibilidad antimicrobiana por el

método dedifusión en disco (Kirby-Bauer)

El aislamiento e identificación de agentes infecciosos a partir de una muestra clínica

proveniente de un paciente, no es suficiente para el tratamiento, porque muchos
microorganismos han desarrollado múltiples mecanismos de resistencia, este
método de (Kirby-Bauer) o de difusión en disco, es el método más utilizado para
determinar la sensibilidad de un agente bacteriano frente a un antibiótico (4).

Se dispone de discos de papel whatman de aproximadamente 5 mm de diámetro,

los cuales deben ser esterilizados en la autoclave por 20 minutos a 121° C
posteriormente fueron almacenados en un frasco previamente esterilizado. Después
se impregno del extracto de Aristeguietia gayana (asmachilca) en sus diferentes
concentraciones (60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%) más el control o blanco
que fue impregnado con el solvente de etanol 70°, el cual toma contacto

34
con la superficie húmeda del agar Müeller-Hinton. Es así, que se evaluaron las
concentraciones del extracto etanólico de hojas y tallos de Aristeguietia gayana
(asmachilca) midiendo los halos usando una regla vernier.

El Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio (CLSI), anteriormente conocido

como “El Comité Nacional de Estándares de Laboratorio Clínico (NCCLS),” es una
organización sin fines de lucro con miembros que representan múltiples disciplinas.
Su misión es promover el desarrollo y el uso voluntario de estándares y guías
consensuados de laboratorio. Nos muestra en su cuadro de referencias (26).

Tabla 3. Criterios de interpretación para difusión de disco de Oxacilina (mm) para

la inhibición de crecimiento de Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Organismo Sensible Intermedia Resistente

(mm) (mm) (mm)

Staphylococcus ≥ 13 11-12 ≤ 10

aureus

Fuente: Elaboración propia.

35
 CAPÍTULO IV

RESULTADOS

En nuestro trabajo de investigación determinamos la actividad antibacteriana del

extracto etanólico de Aristeguietia gayana sobre la cepa de Staphylococcus aureus
ATCC 25923, para lo cual obtuvimos 241.8 g de extracto etanólico de hojas y tallos
de esta planta mediante maceración, luego lo reconstituimos con etanol a 70°,
constituyéndose en muestra madre.

Para la Concentración mínima inhibitoria (CMI) que produce el extracto etanólico de

Aristeguietia gayana a las concentraciones de 60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%,
5%, 0.5%, 0.25% y 0.125%, obteniéndose los siguientes resultados:

Tabla 4: Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) del extracto de la planta

Aristeguietia gayana frente a Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Descripción TUBOS

T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10

Concentración 60 50 40 30 20 10 5 0.5 0.25 0.125

porcentual (%)

Solución madre (mL) 1 1 1 1 1 1 1 0.5 0.25 0.125

Caldo peptonado (mL) 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5

Inóculo (mL) 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1

Crecimiento - - - - - - - + + +

Fuente: Elaboración propia.

36
Figura 3: Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) frente a Staphylococcus aureus
ATCC 25923.

Fuente: Elaboración propia.

Como apreciamos en la tabla 4 y la figura 3, nos muestra los resultados de inhibición

de crecimiento que el extracto de Aristeguietia gayana (asmachilca) produce sobre
Staphylococcus aureus ATCC 25923, es decir la CMI, donde se observa que en los
tubos del 1 (60%) al 7 (5%) no hay crecimiento bacteriano, y a partir del tubo 8 en
adelante sí encontramos crecimiento bacteriano, lo que corresponde al 0.5%,0.25%
y 0.125% de concentración del extracto, determinando que la ConcentraciónMínima
Inhibitoria es de 5%.

37
 Figura 4: Concentración Mínima Bactericida (CMB) en placas Petri con agar
Müeller-Hinton frente a Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Fuente: Elaboración propia.

Como apreciamos en la figura 4 y la tabla 5, nos muestra los resultados de la CMB

de Ariesteguietia gayana (asmachilca) sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923,
donde las placas procedentes de los tubos con concentraciones del extracto de
0.5%, 0.25% y 0.125% presentaron crecimiento de UFC de Staphylococcus aureus,
determinando que la Concentración Mínima Bactericida es de 5%.

38
Tabla 5: Concentración Mínima Bactericida de planta Aristeguietia gayana frente a
Staphylococcus aureus. ATCC 25923.

PLACAS PETRI

Descripción

P1 P2 P3 P4 P5 P6 P7 P8 P9 P 10

Concentración porcentual 60 50 40 30 20 10 5 0.5 0.25 0.125

(%)

Agar Müeller Hinton (mL) 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20

Inóculo (µL) 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100

Crecimiento - - - - - - - + + +

Fuente: Elaboración propia.

39
Figura 5: Estimación del diámetro del halo de inhibición para la determinación de
la sensibilidad de Staphylococcus aureus ATCC 25923 frente al extracto etanólico
de Aristeguietia gayana.

Fuente: Elaboración propia.

Para la prueba de sensibilidad bacteriana se empleó la técnica de Kirby-Bauer,

mediante la cual embebimos discos de papel Whatman con las concentraciones de
60%, 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, se obtuvo los siguientes resultados:

40
 Tabla 6: Diámetros del halo de inhibición que produce el extracto etanólico de
Aristeguietia. gayana a diferentes concentraciones sobre Staphylococcus aureus
ATCC 25923 en la Prueba de sensibilidad bacteriana, técnica de Kirby-Bauer.

REPETICIONES DEL DIÁMETRO DEL HALO DE INHIBICIÓN DE S. aureus DE

LAS PLACAS PETRI CON AGAR MÜELLER HINTON

TRATAMIENTOS: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
concentraciones
del extracto de A.
gayana

60% 16mm 15mm 16mm 14mm 15mm 15mm 15mm 13mm 14mm 14mm

50% 14mm 13mm 14mm 15mm 14mm 15mm 14mm 14mm 14mm 13mm

40% 12mm 11mm 13mm 13mm 13mm 12mm 12mm 12mm 13mm 11mm

30% 13mm 12mm 12mm 13mm 12mm 12mm 12mm 14mm 13mm 13mm

20% 12mm 11mm 12mm 12mm 11mm 12mm 12mm 14mm 12mm 13mm

10% 12mm 11mm 12mm 12mm 11mm 11mm 12mm 12mm 11mm 10mm

5% 10mm 11mm 9mm 8mm 8mm 7mm 8mm 10mm 9mm 8mm

Control negativo 5mm 5mm 5mm 5mm 5mm 5mm 5mm 5mm 5mm 5mm

Fuente: Elaboración propia.

Como podemos apreciar en la tabla 6, vemos la sensibilidad bacteriana de

Staphylococcus aureus ATCC 25923, donde podemos observar, aunque presentan
halos de inhibición estos no sobrepasan los 16 mm estando entre 7 y 16 mm.

41
 Tabla 7. Descriptivos estadísticos principales: media, desviación estándar y
límites inferior y superior de los tratamientos (concentraciones de extracto de
Aristeguietia gayana, con acción inhibitoria del crecimiento de
Staphylococcusaureus).

95% del intervalo de confianza

para la media

Desv.
N Media Desviación Límite inferior Límite superior

Control negativo 10 5,00 0,000 5,00 5,00

5% 10 8,90 1,197 8,04 9,76

10% 10 11,40 ,699 10,90 11,90

20% 10 12,10 ,876 11,47 12,73

30% 10 12,60 ,699 12,10 13,10

40% 10 12,20 ,789 11,64 12,76

50% 10 14,00 ,667 13,52 14,48

60% 10 14,70 ,949 14,02 15,38

Total 80 10,74 4,466 9,74 11,73

42
 16
60%; 14.7mm
Diámetro del halo de inhibición de S. aureus ATCC
14 50%; 14mm
30%; 12.6mm

20%; 12.1mm 40%; 12.2mm

12
10%; 11.4mm

10
5%; 8.8mm
25923

6 Control negativo;
5mm

Figura 6. Comparación de la media del diámetro del halo de inhibición que

produce el extracto etanólico de A. gayana a diferentes concentraciones sobre S.
aureus ATCC 25923.

Fuente: Elaboración propia.

En la tabla 7 y la figura 6 se muestra los resultados del efecto inhibidor del

crecimiento bacteriano de S. aureus cuando se cultiva en agar Müeller-Hinton con
la inserción de discos impregnados con el extracto etanólico de A. gayana a
diferentes concentraciones (5, 10, 20, 30, 40, 50 y 60%), observándose que a mayor
concentración del extracto de A. gayana, ejerce una mayor inhibición del crecimiento
de S. aureus.

Todos los extractos etanólicos de Aristeguietia gayana, que presentaban una acción
inhibitoria (5, 10, 20, 30, 40, 50, y 60%) producen halos de inhibición de crecimiento
de Staphylococcus aureus, que oscilan entre los valores de 7 a 16 mm de diámetro
(figura 6).

43
Tabla 8. Análisis de varianza de un factor que analiza los tratamientos
(concentraciones de extracto de A. gayana con acción inhibitoria del crecimiento de
S. aureus) y el control negativo.

ANOVA
Diámetro del halo de inhibición de S. aureus (mm)
Suma de Media
cuadrados gl cuadrática F Sig.
Entre grupos 679,200 7 97,029 148,640 0,000
Dentro de 47,000 72 ,653
grupos
Total 726,200 79

Fuente: Elaboración propia.

Tabla 9. Comparación de medias de los tratamientos (concentraciones de extracto

de A. gayana con acción inhibitoria del crecimiento de S. aureus) y el control
negativo mediante la prueba de diferenciación de Scheffe.

Diámetro del halo de inhibición de S. aureus (mm)

Scheffea
Concentración del Subconjunto para alfa = 0.05
extracto etanólico
de A. gayana (%) N 1 2 3 4
Control negativo 10 5,00
5% 10 8,80
10% 10 11,40
20% 10 12,10
40% 10 12,20
30% 10 12,60
50% 10 14,00
60% 10 14,70
Sig. 1,000 1,000 ,157 ,804
Se visualizan las medias para los grupos en los subconjuntos
homogéneos.
a. Utiliza el tamaño de la muestra de la media armónica = 10,000.

Fuente: elaboración propia.

44
Con un p<0.05 se puede observar en la prueba de ANOVA (Tabla 8) que hay
variabilidad y diferencia entre los tratamientos. Según la prueba de diferenciación de
Scheffe (p<0.05) (Tabla 9), hay diferencia significativa entre el efecto antibacteriano
de los extractos etanólico de A. gayana al 5, 10, 20, 30, 40, 50 y 60% con el control
negativo; además, hay diferencia estadística entre el extracto al 5% con las demás
concentraciones del extracto de A. gayana. Al comparar los diámetros de inhibición
de crecimiento (efecto antibacteriano) de los extractos al 10, 20, 30 y 40% de A.
gayana no se observa diferencia estadística entre ellos sobresu efecto antibacteriano
contra Staphylococcus aureus ATCC 25923; sin embargo, si hay diferencia
estadísticamente significativa de estas concentraciones con los tratamientos al 50 y
60%, los que, entre sí no muestran diferencia estadística. Por lo tanto, hay un efecto
antibacteriano de los extractos etanólicos de Aristeguietia gayana al 5, 10, 20, 30,
40, 50 y 60% frente a Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Figura 7. Comparación de las concentraciones 5, 10, 20, 30, 40, 50 y 60% del
extracto etanólico de A. gayana (%) y control negativo con el criterio de
interpretación para la difusión de disco para la inhibición de crecimiento de S.
aureus ATCC 25923 según el NCCLS (26).
Fuente: Elaboración propia.

45
 Tabla 10. Comparación de las concentraciones 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50% y
60% del extracto etanólico de A. gayana (%) y control negativo con el criterio de
interpretación para la difusión de disco para la inhibición de crecimiento de S. aureus
ATCC 25923 según el NCCLS (26)

Interpretación para difusión de disco del extracto

de A. gayana sobre S. aureus
Resistente Intermedio Sensible Total
Concentración del extracto Control negativo 10 0 0 10
etanólico de A. gayana (%) 5% 9 1 0 10
10% 1 9 0 10
20% 0 8 2 10
30% 0 5 5 10
40% 0 6 4 10
50% 0 0 10 10
60% 0 0 10 10
Total 20 29 31 80

Fuente: Elaboración propia.

Como se observa en la figura 7 y la tabla 10, cuando se analiza los resultados del
diámetro de los halos de inhibición de crecimiento de S. aureus ATCC 25923 que
produce el extracto etanólico de A. gayana con el criterio de interpretación para la
difusión de disco de Oxacilina para la inhibición de crecimiento de S. aureus ATCC
25923, se muestra que la concentración de A. gayana al 5% presenta un halo de
inhibición en promedio solamente de 8,80 mm, lo que se considera resistente según
el NCCLS (≤ a 10mm de diámetro), y para las demás concentraciones de 10, 20, 30
y 40% mayormente están en la categoría de intermedio (11 y 12mm), y para las
concentraciones al 50 y 60%, los diámetros de inhibición del crecimiento se
encuentran en todas las repeticiones en la categoría de sensibles (≥ a 13mm de
diámetro).

46
 CAPÍTULO V

DISCUSIÓN

Nuestro trabajo de investigación tuvo por objetivo determinar el efecto antibacteriano

del extracto de Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre Staphylococcus aureus
ATCC 25923, debido a que hoy en día a nivel mundial la resistencia a los antibióticos
se ve en incremento ya sea por automedicación o infecciones mal tratadas. Nuestra
planta Aristeguietia gayana (asmachilca) en estudio fue identificado apropiadamente
en el Herbarium Areqvipense (HUSA) de la Universidad Nacional de San Agustín
de Arequipa, realizado por el director del herbario.

En los trabajos realizados por Espinoza y colaboradores nos corroboran que

habiéndose realizado la investigación, de metabolitos secundarios en la marcha
fotoquímica de asmachilca, se determinó la presencia de los siguientes fitoquímicos;
taninos, flavonoides, esteroides, quinonas, alcaloides y leucantocianidinas, quienes
son los principales responsables del efecto inhibitorio sobre el crecimiento de una
bacteria aislada, de igual manera es de recalcar, que para Gram positiva los
fitoquímicos de esta planta serían los responsables de la inhibición sobre
Staphylococcus aureus ATCC 25923.

En su trabajo de investigación de Colegate y colaboradores nos dice que en el

extracto de asmachilca existe la presencia del alcaloide, dehydropyrrolizidine el cual
sería el principal metabolito secundario, que ejerce daño a quienes consuman por
infusión esta planta. Como sabemos los alcaloides son derivados de las plantas, son
estructuras complejas nitrogenadas, que han sido usadas en medicina como
agentes anticancerígenos entre otras enfermedades, además de estos usos
medicinales también se ha reportado actividad antimicrobiana de los alcaloides,
tanto para bacterias y otros microorganismos, los alcaloides presentan elevada
diversidad estructural y serían los causantes de la inhibición sobre Staphylococcus
aureus ATCC 25923.

Nuestros resultados se corroboran con los resultados de Motta (2), en su trabajo

realizado con extracto etanólico de chupasangre sobre Staphylococcus aureus,
donde se observó que la CMI es de 2.5% y las concentraciones mayores si

47
presentaban inhibición. Realizamos la prueba de Concentración Mínima Inhibitoria
por el método de microdilución en caldo, aquí, obtuvimos como resultado que a partir
de la concentración de 5%, no presentaba crecimiento bacteriano, siendo esta la
Concentración Mínima Inhibitoria (CMI), lo que nos indica que las concentraciones
menores a 5% no tienen actividad sobre Staphylococcus aureus.

Daud y colaboradores (27) en su trabajo realizado con (queñoa) sobre

Staphylococcus aureus, encontraron que la Concentración Mínima Bactericida de
esta planta era de 2.5% para dicha bacteria. Obtuvimos también resultados para
CMB del extracto de asmachilca sobre Staphylococcus aureus donde las placas que
provenían de los tubos 8, 9, y 10 presentaron crecimiento, confirmando que la CMB
es de 5%, las concentraciones mayores inhibieron el crecimiento de dicha bacteria.

Así mismo en la investigación de Colegate (10), la mayoría de las partes de la planta

de (asmachilca) cumplen una función broncodilatadora, como uso de tratamiento
para resfríos comunes. Pero que a la misma vez puede ser toxico, sí se ingiere de
forma descontrolada. Nosotros hemos encontrado que Staphylococcus aureus es
sensible a Aristeguietia gayana (asmachilca).

En cuanto al trabajo de Bonilla (14) del extracto de (asmachilca), Sobre Órganos

Aislados de Rata, su resultado fue, que ha presentado efectos relajantes sobre el
músculo liso endotraqueal, lo cual ayudaría a explicar el efecto antiasmático y
también se ha observado el efecto relajante sobre la aorta, duodeno e íleon de rata.
De lo cual también fue uno de los motivos, para realizar esta investigación.

La tabla 6 nos muestra los resultados de sensibilidad de Staphylococcus aureus a

las diferentes concentraciones del extracto de Aristeguietia gayana, donde
observamos que las concentraciones estudiadas de 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%
y 60% presentaron halos de inhibición, cuyos tamaños oscilaron entre 7 y 16 mm,
aunque en todas las concentraciones se presentaron halos de inhibición, según los
parámetros, nos indicaría que en el caso de la mayoría de las concentraciones,
Staphylococcus aureus sería sensible, por presentar halos mayores de 13 mm.

48
Todos los extractos etanólicos de Aristeguietia gayana, realizados sobre la técnica
de Kirby-Bauer han presentado una acción inhibitoria, produciendo halos de
inhibición de crecimiento de Staphylococcus aureus. Nuestros resultados de la Tabla
9 y figura 6 nos indican que existen diferencias estadísticamente significativasentre
las diferentes concentraciones de extracto etanólico de A. gayana (5%, 10%, 20%,
30%, 40%, 50%, y 60%) con el control negativo en el que no se presentó ningún halo
de inhibición. También cabe recalcar que los datos estadísticos muestran que no
hay una diferencia estadísticamente significativa entre las concentraciones al 10%,
20%, 30%, 40%, lo que nos indicaría que tiene un efecto similar sobre
Staphylococcus aureus. Las concentraciones de 50% y 60% si presentan una
diferencia significativa con las otras concentraciones, esto se debería principalmente
a presentan halos de inhibición en promedio de 14 a 14.7 mm de diámetro, lo que
traducimos en un efecto antibacteriano mayor frente a Staphylococcus aureus.

Nuestros resultados de la Tabla 10 se sustentan en el manual de recomendaciones

de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica y la
(NCCSL), donde la evaluación de la actividad antibacteriana de Staphylococcus
aureus ATCC 25923 tiene una estandarización dada como Sensible (S) ≥ 13mm,
Intermedio (I) 11-12mm y Resistente (R) ≤ 10mm y los resultados de nuestra
investigación están en el rango de diámetro que oscila de 7 a 16 mm, recalcando
que a partir de la concentración del 30% se puede afirmar que hay una actividad
antibacteriana efectiva, ya que a esta concentración, el 50% de sus unidades de
estudio dio resultados de diámetro de los halos de inhibición dentro de la categoría
intermedio y el 50% cae dentro de la categoría sensible, al compararse con la
estandarización de la NCCSL (26).

49
 CONCLUSIONES

Primera: El extracto etanólico de Aristeguietia gayana (asmachilca) presenta

actividad antimicrobiana de nivel sensible sobre Staphylococcus aureus ATCC
25923.

Segunda: la Concentración Mínima Inhibitoria del extracto etanólico de Aristeguietia

gayana (asmachilca) sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923 es al5%.

Tercera: la concentración mínima bactericida (CMB) del extracto etanólico de

Aristeguietia gayana (asmachilca) sobre Staphylococcus aureus ATCC 25923 es al
5%.

Cuarta: Las concentraciones de 30, 40, 50 y 60% del extracto etanólico de

Aristeguietia gayana presentan una actividad bacteriana sobre la cepa
Staphylococcus aureus ATCC 25923 según la comparación de los resultados de la
prueba de sensibilidad antibacteriana con el estándar de la NCCSL.

50
 RECOMENDACIONES

PRIMERA: Se recomienda realizar estudios de actividad antimicrobiana sobre otros

microorganismos como, E. coli, H. pylori, Streptococcus entre otros que no son de
la familia de los Staphylococcus.

SEGUNDA Se recomienda realizar estudios de aislamiento y análisis de los

metabolitos presentes en los diferentes órganos de Aristeguietia gayana
(asmachilca) para ampliar la información de sus compuestos activos.

TERCERA: Se recomienda realizar estudios de inhibición contra Staphylococcus

aureus con aceite esencial de Aristeguietia gayana (asmachilca).

CUARTA: Se recomienda realizar estudios, tales como toxicidad, de Aristeguietia

gayana (asmachilca) a la concentración de 30%, ya que es la mínima concentración
que presenta actividad antibacteriana efectiva, para evitar algún efecto perjudicial
a la salud humana con extractos a mayores concentraciones.

51
 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Salud OMdl. [Online].; 2017 [cited 2021 diciembre 10.

2. Motta F. Efecto Antibacteriano del Extracto Etanolico de Oenothera rosea (CHUPASANGRE)

Staphylococcus aureus ATCC25923 Escherichia coli ATCC 25922. In. Arequipa; 2021.

3. Calachua O. Efecto antibacteriano in vitro de extractos de Ruta graveolens en Pseudomonas

aeruginosa, Escherichia coli y Staphylococcus aureus. In. Arequipa; 2019.

4. Castilla C. Determinación del Efecto Antibacteriano in vitro del Extracto de Hojas Carica
pubescens papaya Arequipeña frente a Bacterias patógenas Arequipa; 2016.

5. Pulgar V. Las Ocho Regiones Naturales Del Perú.; 2014.

6. Arévalo F. Extracción de aceite esencial de Aristiguietia gayana, ‘’asmachilca ’’. In. Lima:
Universidad Agraria la Molina; 2014.

7. Arévalo F. Extracción de aceite esencial de Aristiguietia gayana, Asmachilca. Departamento

de Química, Universidad Agraria la Molina. 2014.

8. Bussmann B. Plantas Medicinales de los Andes y la Amazonia - la flora mágica y medicinal del
Norte del Perú. 2015.

9. Rivera A. Actividad Antibacteriana del Extracto Etanolico de las Hojas de Fragaria x ananassa
Duch. “fresa” Sobre Sthaphylococcus aureus y Escherichia coli Lima: Universidad María
Auxiliadora; 2021.

10. Colegate S. Pro-toxic dehydropyrrolizidine alkaloids in the traditional Andean herbal

medicine “asmachilca”. HHS Public Access. 2015 Agost.

11. Corzo C. Evaluation of antimicrobial activity of ethanol extract of Cestrum buxifolium Kunth.
Revista Mexicana de Ciencias Farmacéuticas. 2012; 43(3).

12. Pino N. Validación Antibiótica de Plantas Medicinales del Noroeste de Colombia. Boletín
Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas. 2009.

13. Arevalo O. Marcha fotoquímica de Aristeguietia gayana asmachilca. Departamento de

Química Universidad Agraria la Molina. 2014.

14. Bonilla P. Efecto Relajante del Extracto Alcohólico de las Hojas de Eupatorium gayanum
(Asmachilca), Sobre Órganos Aislados de Rata. Ciencia e Investigación de Farmacia y
Bioquímica UNMSM. 2006 Dic; 9(2).

52
15. Frizzi J. Asmachilca: Vernacular name of Eupatorium triplinerve Vahl, Aristeguietia discolor
R.M. King & H. Rob., Aristeguietia gayana Wedd, Baccharis sp. (Asteraceae), Perú.
Ethnobotany research and applications. 2020.

16. Rivas E. Estudio de la actividad analgésica de extractos metanólicos de Maytenus krukovii

(chuchuhuasi), Alchornea castaneifolia (hiporuro), Sambucus nigra (saúco) y Aristeguietia
discolor (pulmonaria) en ratones frente al ibuprofeno. Acta Médica Sanmartiniana. 2012 Ene;
1(1).

17. Neira J. Evaluación de la Actividad Antimicrobiana de los Extractos Etanólicos de las Plantas
Medicinales Utilizadas por los Pobladores de Tuctumpaya, Quequeña y Chiguata, Frente a
Bacterias Gram Positivas: Staphylococcus AUREUS – Streptococcus PNEUMONIAE Arequipa:
Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa; 2018.

18. Huamani E. Comparacion del Efecto Antibacteriano del Extracto Etanolico de tres tipos de
Tenecio nutans sobre Staphylococcus aureus 2019 Arequipa; 2020.

19. Rainer S. Plantas medicinales de los Andes y la Amazonia la Flora Mágica y Medicinal del
Norte del Perú Lima; 2015.

20. Huisa K. Tamizaje Fitoquimico y Capacidad Antioxidante de los Extractos Etanólico de Hojasy
Tallos de Thymus vulgaris L. (Tomillo), AREQUIPA- 2020” Arequipa; 2020.

21. Carrion A. Preparación de Extractos Vegetales: Determinación de Eficiencia de Metódica

Cuenca; 2010.

22. Betancourt B. Staphylococcus aureus y su identificación en los laboratorios microbiológicos.

Revisión bibliográfica. Revista archivo medico Camagüey. 2005.

23. Hurtado M. Staphylococcus aureus: Revisión de los mecanismos de patogenicidad y la

fisiopatología de la infección estafilocócica. In Microbiología RdlSVd.. Caracas; 2002.

24. Garcia E. Actividad Antimicrobiana. In Laboratorio Química Analítica FdCBdlUAdNLM..

Mexico; 2016.

25. Laura C. Microbiologia Clínica. In C. LB.. Madrid: Editorial Síntesis; 2016.

26. Cavalieri S. Manual de Pruebas de susceptibilidad antimicrobiana. Library of Congress

Cataloging in Publication Data. 2005.

27. Daud A. Actividad antimicrobiana de extractos alcohólicos de hojas y corteza de polylepis

australis bitter queñoa. Revista cubana plantas medicinales. 2008 Sep; 13 n3.

53
ANEXOS

54
Anexo 1: Clasificación taxonómica de Aristeguietia gayana (asmachilca) según la
facultad de ciencias biológicas departamento académico de biología HERBARIUM
AREQVIPENSE (HUSA), firmado por el Director.

55
Anexo 2: Recolección de la planta Aristeguietia gayana (asmachilca) de las faldas
de volcán Ubinas del distrito de Ubinas del Departamento de Moquegua.

56
Anexo 3: Cepa liofilizada de Staphylococcus aureus ATCC 25923.

57
Anexo 4. Plaqueo con Agar Müeller Hinton.

58
Anexo 5. Obtención de la Solución Madre de Aristeguietia gayana (asmachilca) a
una concentración de 60%.

Anexo 6: Certificado de anti plagio

59
Anexo 6. Originalidad de Trabajo- Antiplagio.

60