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Informe 2 - Permeabilidad DEL Tejido Membrana Citoplasmatica (

Difusion Y Dialisis)
Biología celular

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FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y
LA SALUD
CARRERA DE MEDICINA HUMANA
Taller Práctico de Biología Celular
Informe N° “02” Tema:

GRUPO N°:
“05”
Porcentaje
Integrantes Apellidos y nombres
de
participació
n1
1 Vanessa Arias 100%
2 Lizzet Xiomara Vargas Torres 100%
3 Rita Villacorta 100%

Sección y horario: 1B1 – 07:00 am – 09:00 am

Docente: Vladimir Camel y Ángel Hernández

Nota:
1. El porcentaje de participación de cada integrante debe ser asignado por el grupo y colocado en un rango de 0% a
100%. La nota de cada integrante será calculada de acuerdo con el porcentaje de participación y la nota del
informe. Por ej.: Si la nota del informe es 20 y el porcentaje de participación del integrante es del 100%, la nota
que le corresponde al integrante es de 20.
2. En caso no completar correctamente los diversos ítems de la carátula, se descontará 1 punto de la nota obtenida
en el informe.

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I. INTRODUCCIÓN
El siguiente informe habla sobre la permeabilidad del tejido membrana
citoplasmática (difusión y diálisis). En esta oportunidad veremos una de
las principales funciones de la membrana celular, la cual es proteger a la
célula, y controlar todo lo que sale y entra. Hablaremos acerca de la
difusión, que es básicamente la velocidad con la que las moléculas se
disuelven completamente dependiendo de las temperaturas a las cuales
están sometidas cada tubo de ensayo con azul de metileno. También
hablaremos acerca de la diálisis, que es básicamente la difusión de las
moléculas a través de la membrana semipermeable. Utilizaremos al
buche del pollo como membrana celular, con el cual realizamos distintas
pruebas para determinar la permeabilidad. Finalmente, utilizaremos
reactivos para identificar las biomoléculas.
Fuente: A. ARRAZOLA. (1994). Biología de la membrana celular. Sociedad española de
Nefrología, 14(4), 0-511.
https://www.revistanefrologia.com/es-biologia-membrana-celular--articulo-X0211699594
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II. MARCO TEÓRICO


DIFUSIÓN
La difusión es el flujo neto de moléculas desde una región de alta
concentración a una región de baja concentración. Esta diferencia
en la concentración de una sustancia en el espacio se denomina
gradiente de concentración. La difusión se debe al movimiento
aleatorio de las partículas. Este fenómeno fue observado por
primera vez por Robert Brown en 1827 y se llama movimiento
browniano. Todos los objetos en movimiento tienen energía
cinética o energía de movimiento. Las partículas de materia se
mueven en líneas rectas hasta que colisionan con otras partículas.
Después de colisionar, las partículas se reblandecen, se mueven en
línea recta hasta la siguiente colisión. No hay pérdida de energía.
La difusión continuará hasta que no haya un gradiente de
concentración.
En difusión, las moléculas se mueven aleatoriamente colisionando
entre sí hasta que se distribuyen uniformemente. Por ejemplo, si
uno pone una cucharadita de un tinte púrpura, permanganato de
potasio, en un vaso de precipitados con agua, entonces las
moléculas de tinte o soluto (moléculas disueltas) colisionarán
aleatoriamente con las moléculas de agua o solvente. Estas
colisiones aleatorias dentro de la solución dispersarán las
moléculas

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de soluto y solvente hasta que estén uniformemente mezcladas. Sin
embargo, las moléculas seguirán colisionando entre sí y se moverán
aleatoriamente. En este punto, no hay un cambio general en la
concentración. Esta condición se conoce como equilibrio dinámico.
Un sistema es más estable cuando ha alcanzado el equilibrio. Un
sistema tenderá a ir al equilibrio (estado energético más bajo y
accesible) en ausencia de energía añadida.
Fuente:
https://www.bioted.es/protocolos/DIFUSION-OSMOSIS.pdf

Fuente:
http://www.geocities.ws/ciencia_basica_i/ejm_difusion.html
Difusión de moléculas. El movimiento aleatorio de soluto (partículas
disueltas) y solvente (moléculas de agua) dará como resultado una
solución distribuida uniformemente.
DIALISIS
La diálisis es una forma de filtración molecular. Es un proceso que separa
moléculas de acuerdo con su tamaño, mediante el empleo de membranas
semipermeables que contienen poros de dimensiones inferiores a las
macromoleculares. Estos poros permiten que moléculas pequeñas, tales
como las de los disolventes, sales y metabolitos pequeños, se difundan a
través de la membrana pero bloqueen el tránsito de moléculas mayores.
La diálisis se emplea rutinariamente para cambiar el disolvente en el que
se encuentran disueltas las macromoléculas. Una disolución
macromolecular se introduce en el saco de diálisis, que se sumerge en un
volumen relativamente grande de disolvente nuevo. Las moléculas
pequeñas pasan a través de la membrana al fluido externo hasta que se
alcanza el equilibrio, las macromoléculas permanecerán en el interior de
saco de diálisis. El proceso puede repetirse varias veces a fin de sustituir
completamente un sistema disolvente por otro.

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Fuente:
http://ufq.unq.edu.ar/Docencia-Virtual/BQblog/Dialisis%20y%20ultrafil
tracion.pdf

Fuente:
http://ufq.unq.edu.ar/Docencia-Virtual/BQblog/Dialisis%20y%20ultrafil
tracion.pdf

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III. OBJETIVOS:
● En el laboratorio aprenderemos sobre la permeabilidad de
la membrana citoplasmática (difusión y diálisis).
● Identificar las características de permeabilidad de la membrana
celular.
● Describir mecanismos de difusión y diálisis a nivel molecular.
● Enumerar factores que afectan la velocidad de difusión.
● Desarrollar habilidades en el trabajo de laboratorio.
● Comprender el fundamento de la hemodiálisis por medio de la
experimentación.
● Identificar los factores que afectan la integridad de las membranas.
Fuente:
https://www.uprm.edu/labs3051-3052/wp-content/uploads/sites/
168/2018/09/membranas.pdf

IV. MATERIALES
MATERIALES DEL LABORATORIO

● 40 mil de agua helada


● 40 mil de agua caliente
● 100 mil de Reactivo de Biuret
● 50 mil de Colorante Azul de Metileno
● 100 mil de Nitrato de plata
● 1 L de Solución de Lugol
● 40 mil de solución de Cloruro de Sodio al 30%
● 40 mil de solución de almidón al 1%
● Agua destilada
● 3 Beakers 100 mil
● 4 Beakers 500 mil
● 8 tubos de ensayo 16x150mm
● 1 embudo

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MATERIALES DEL ESTUDIANTE

● 20 cm de pabilo
● 2 palitos de anticucho
● 1 huevo por todo el laboratorio (para preparar solución de albúmina)
● 4 hojas de afeitar
● 2 buches limpios de pollo

V. PROCEDIMIENTO:
1. Difusión (factor temperatura): En este primer experimento, se
estudiará el movimiento browniano. Se colocará en un beacker
40mL de agua a temperatura ambiente; en el segundo se coloca 40
mil de agua helada y un tercero, 40 mil de agua caliente. En cada
uno de ellos agregamos unas gotas de azul de metileno (tratando de
no agitar mucho el agua). Luego anotamos observaciones pasados
unos 5 minutos.
2. Diálisis #1 (de afuera hacia adentro): En un extremo atar el
buche del pollo con pabilo y en otro extremo añadir con un
embudo 40 mil de solución de almidón al 1%. Luego cierre el
orificio del buche con el pabilo colgándolo de un palito de
anticucho, colocarlo en un beaker que contenga 150 mil de agua
con varias gotas de solución de Lugol hasta que tenga un color
dorado. Esperar 30 minutos para que el buche dentro del
recipiente repose con la solución.
3. Diálisis #2 (de adentro hacia afuera): En un extremo atar el
buche de pollo con hilo pabilo, usando un embudo agregamos 40
mil de Cloruro de Sodio al 30% y 40 mil de solución de albúmina al
0.5%. Luego procedemos a cerrar el extremo que quedó abierto,
mezclar y con ayuda de un palito de madera, colocar en un beaker
que contenga 150 mil de agua destilada. Dejar actuar por 30
minutos. Retirar del beaker y proceder a verter 6 mil de la mezcla
de dentro del buche a un tubo de ensayo y adicionar 4 gotas de
reactivo de biuret. Anotar los cambios de color de cada uno de los
tubos. Además a la solución del beaker añadir 5 gotas de nitrato de
plata (AgNO3) y anotar los cambios de color.

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VI. RESULTADOS
EXPERIMENTO # 1 (Difusión - factor temperatura):
● En el tubo de ensayo a 40 °C: Se observa que el azul de metileno
se ha diluido completamente y se observa un color uniforme.
● En el tubo de ensayo a 4 °C: Se observa que el azul de metileno
no se ha diluido completamente, no hay uniformidad, pero si
precipitación.
EXPERIMENTO #2 (Diálisis de afuera hacia adentro):
● Al soltar el líquido que se encontraba en el buche del pollo, se
observa un cambio ligero, un color pálido, no nítido y difícil
de distinguir.
EXPERIMENTO #3 (Diálisis de adentro hacia afuera):
Afuera del buche:
● Podemos deducir que la albumina que extraemos del huevo, no
salió de la membrana del buche del pollo.
● Cuando agregamos 5 gotas de nitrato de plata se observa un
color azul muy claro (bebe).
Dentro del buche:
● En el tubo de ensayo en la parte superficial se puede observar
el color violeta por la presencia de proteínas.

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VI. DISCUSIÓN:
EXPERIMENTO # 1 ((Difusión - factor temperatura):
Después de los 5 minutos, se observa una reacción lógica, ya que en el tubo de 4
°C al estar en bajas temperaturas no se ve un color uniforme, sin
embargo, en el tubo de 40 °C al estar en altas temperaturas, se observa un
color uniforme, porque se han disuelto todas las partículas.
EXPERIMENTO # 2 ((Diálisis de afuera hacia adentro):
Después de los 30 minutos se observó que dentro del buche no cambio el
color del almidón (polisacárido). Algunas de las posibilidades por lo que
ocurrió esto pueden ser que el Lugol del medio externo no fue suficiente
para teñirlo. Otra de las posibilidades es que no se condujo una buena
difusión porque había mucho tejido colectivo que impedía el paso del
Lugol hacia el interior del buche. Ya que el Lugol reconoce el almidón y
cambia a color azul.
EXPERIMENTO #3 (Diálisis de afuera hacia adentro):
Al verter 4 gotas de biuret al tubo de ensayo que contenía la mezcla dentro
del buche se aprecia que cambio de color a violeta debido a que reconoce
proteínas (cadenas polipeptídicas cortas), una de estas la albúmina.
También se pudo apreciar que el cloruro de sodio pudo atravesar el
buche, ya que al añadir nitrato de plata en el tubo de ensayo con la
solución exterior del beaker, reconoció al cloruro de sodio ya que es un
ion cambiando a color blanco.

VII. CONCLUSIONES:
● La velocidad de difusión se afecta con la
variación de la temperatura a mayor
temperatura el azul de metileno se
esparcirá más rápido y uniformemente,
pero cuando la temperatura es muy baja
el azul de metileno no se esparcirá en
manera no se diluirá entonces el líquido
se precipitará.
● Célula eucariota animal (membrana
semipermeable) tan solo deja pasar a las
moléculas de bajo peso molecular que
fueron en este caso los iones disociados del cloruro de sodio a
través de la gradiente de concentración mediante la diálisis.

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● Moléculas que tienen alto peso molecular tale como la albumina
no pueden pasar por la bicapa siendo impermeables a esta. Por lo
tanto no realiza diálisis.

REFERENCIAS:
● A. ARRAZOLA. (1994). Biología de la membrana celular.
Sociedad española de Nefrologia, 14(4), 0-511. Disponible en:
https://www.revistanefrologia.com/es-biologia-membrana-celular--artic
ulo-X021169959400663X
● BIOTEC. (s.f). DIFUSIÓN Y ÓSMOSIS. Disponible en:
https://www.bioted.es/protocolos/DIFUSION-OSMOSIS.pdf.
● Amorós, Leslie Amaya, Eugenia Errico, Mariana Lambertucci,
Mauro Miers, Jessica Mogro, Ezequiel Quispe, Leonardo Recalt,
Micaela Tocho, Eugenia. (2013). Diálisis y Ultrafiltración.
Bioquimica. Disponible en:
http://ufq.unq.edu.ar/Docencia-Virtual/BQblog/Dialisis%20y%20
ultrafiltracion.pdf
● Miers J, Tocho E, Recalt M. Diálisis y Ultrafiltración
[Internet].Ufq.unq.edu.ar. 2013. Disponible en:
http://ufq.unq.edu.ar/Docencia-Virtual/BQblog/Dialisis%20y%20
ultrafiltracion.pdf
● Pendse S, Singh A, Zawada E. INITIATION OF DYALISIS.
En: Handbook ofdyalisis. 4th ed. New York, 2008: 14-21.
● https://www.uprm.edu/labs3051-3052/wp-content/uploads/sites/
168/2018/09/membranas.pdf

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RÚBRICA PARA LA EVALUACIÓN DE INFORME DE
LABORATORIO
DESEMPE
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Introducci Muy buen uso de las desconexión en la deficiente, pobre o
ón (marco fuentes secundarias. redacción y no débil integración de
1 teórico y Lo presentado están del todo fuentes secundarias.
objetivos de argumenta claras respecto a Redacción insuficiente
la práctica) totalmente el tema. lo desarrollado en de objetivos, se omite
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completamente experimento adecuado de verbos
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práctica de omisiones y errores
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Correcto uso de
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comprensión de lo menores importancia.
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Se exponen con Se exponen todas principales aspectos
claridad, concisión y las conclusiones
estudiados, se
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es conclusiones podría mejorar la
errónea o
ambiguamente. Pobre
importantes. Excelente formulación. Algunos
comprensión. aspectos vagos. comprensión.

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