INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE

INGENIERÍA CAMPUS GUANAJUATO

Laboratorio de Biorreactores

Profesores
Rodríguez Sierra Juan Carlos
Juan Manuel Salgado Román

Practica 1
“Introducción a los Biorreactores”

Integrantes
Ayala Sánchez Adrián Arturo
García Hernández José Guadalupe
Medina Maldonado María de la Luz
Ortega Huerta Daniela Elizabeth
Reyes Zamora Diana

Equipo #2
5BM1

Silao de la Victoria, 22 de Septiembre de 2022.

ÍNDICE

Resumen........................................................................................................................................... 3
Introducción....................................................................................................................................... 3
Objetivos............................................................................................................................................ 8
Descripción del Sistema..................................................................................................................... 9
Materiales y equipo.......................................................................................................................... 11
Metodología..................................................................................................................................... 11
Resultados y discusión.................................................................................................................... 11
Conclusión....................................................................................................................................... 23
Referencias...................................................................................................................................... 23
Resumen
Existen diferentes tipos de bioprocesos, los cuales, se llevan a cabo en equipamientos específicos
denominados biorreactores o fermentadores. Los biorreactores deben de tener una producción
aséptica, es decir, se debe de evitar la contaminación durante largos periodos de tiempo, cumplir
las normas locales de contención, ser controlable y monitoreable con ciertos parámetros, como lo
son el pH, temperatura, oxígeno disuelto y tener una capacidad de muestreo estéril. A
continuación, se describen y clasifican los biorreactores encontrados en el laboratorio de
bioconversiones y de operaciones unitarias, ubicados en Pesados 2 de UPIIG.

Introducción
Un biorreactor es aquel dispositivo que proporciona un medio ambiente controlado que permite el
crecimiento eficaz de las células y la formación de algún producto de interés comercial. El medio
ambiente que proporcione el biorreactor debe tener niveles óptimos de Temperatura, pH, sustrato,
sales y oxígeno para convertir la materia prima en metabolitos de interés (Rodríguez et al., 2003).
Las características básicas de un biorreactor incluyen volumen de espacio de cabezal, sistema
agitador, sistema de suministro de oxígeno, control de espuma, sistema de control de temperatura
y pH, puertos de muestreo, sistema de limpieza y esterilización, así como líneas para cargar y
vaciar el contenido del reactor (Alaghlavi, 2013).
Todo biorreactor debe cumplir con dos requisitos fundamentales:
1. Mantener un medio homogéneo sin zonas muertas (zonas donde no haya un buen
mezclado)
2. Transferir el O2 disuelto al medio con el mínimo consumo de energía posible en la menor
cantidad de tiempo.
Existen un sinfín de clasificaciones de biorreactores por lo que en esta práctica nos centraremos en
las siguientes clasificaciones según su:

 Forma de Operación
 Configuración geométrica
 Tipo de agitación
 Patrones de flujo
 Fase

Configuración geométrica:
La forma de la base del tanque influirá en la eficiencia del mezclado, de manera que se prefiere
que la base del tanque sea redonda para evitar zonas muertas y obtener un medio homogéneo.
Según sea la forma de la base del biorreactor, el tipo de impulsor y el flujo será la energía
requerida para suspender los sólidos en un tanque agitado; esto se aprecia en las geometrías
modificadas de la Figura 1 (b) - (e) donde notamos que se pueden usar para mejorar la suspensión
de partículas comparándolo con el tanque (a) de fondo plano. Además, los lados inclinados o de
base cónica como en (f) promoverán la sedimentación de sólidos y es algo que debería evitarse
(Doran, 1995)
 Figura 1. Configuraciones diferentes para la base de un tanque

Forma de operación:
Cultivo por lote:
El proceso es simple, el recipiente se prepara, se inocula y el proceso se deja correr. El sistema
generalmente requerirá control y monitoreo de oxígeno disuelto, pH, temperatura y mezcla. La
capacidad para tomar muestras también debe estar disponible sin comprometer la esterilidad del
proceso.

Figura 2. Biorreactor de cultivo por lote

Lote alimentado:
El recipiente se prepara inoculado, pero en lugar de dejar que el proceso se ejecute hasta que un
nutriente clave se haya utilizado por completo, se agregan nutrientes concentrados con el tiempo.
Si está bombeando medio a un recipiente, sería recomendable garantizar un método de detección
de nivel para asegurarse de que el recipiente nunca se llene en exceso

Figura 3. Biorreactor de cultivo por lote alimentado

Perfusión/ quimiostato
En un quimiostato las células se eliminan como parte del proceso. En un sistema de perfusión las
células se retienen dentro del vaso. Los organismos de crecimiento rápido, como las bacterias, se
adaptan a una configuración de quimiostato, mientras que los tipos de células de crecimiento más
lento, como las células de mamíferos, se utilizan en una configuración de perfusión. En el proceso
de perfusión el recipiente se prepara nuevamente, se inocula y se alimenta con el tiempo. Un
proceso de perfusión podría continuar indefinidamente. La perfusión requiere de bombas de
alimentación y bombas de recolección que funcionen todas en sincronía. Con un proceso de
alimentación constante también existe un gran riesgo de introducir contaminación.

Figura 4. Biorreactor de perfusión

Configuración geométrica
Tanque agitado
En el biorreactor agitado y aireado la mezcla y dispersión de burbujas es logrado por una agitación
mecánica la cual requiere una entrada con alta energía por unidad de volumen. En cuanto a los
deflectores son usados para evitar la formación de vórtices. En los reactores en la parte de la
cabeza se forman gotas de gas de escape para que esto no sea un problema por lo general el
volumen de los reactores agitados es del 70-80 % de llenado. Para el control de temperatura y
transferencia de calor por lo general se utiliza serpentines de enfriamiento interno.

Figura 5. Biorreactor tipo tanque agitado

Columna de burbujas
En este reactor la agitación, así como la aireación son realizadas por dispersión de gas, lo cual es
conveniente debido a que no requiere tanta energía como la agitación mecánica. Las columnas de
burbujas son vasos cilíndricos con una altura superior al doble del diámetro, las cuales no cuentan
con estructuras internas. Pueden instalarse placas horizontales para redistribuir las burbujas
fusionadas.
Cuando existen condiciones normales de operación, altas velocidades de gas ocasionan un flujo
heterogéneo, cuando se encuentra en este estado las burbujas tienden a ascender por el centro de
la columna, mientras que el líquido desciende por las orillas de las paredes el cual arrastra
burbujas ocasionando una retro mezcla de gas.

Figura 6. Columna de burbujeo

Airlift
En este el mezclado se logra con agitación neumática. Lo que lo distingue de la columna de
burbujeo es que los patrones de flujo del líquido están más definidos, debido a la separación física
de las corrientes de subida (upflowing) y de bajada (downflowing). El gas es introducido en una
única parte de la sección transversal del recipiente llamada riser. La retención de gas resultante y
la disminución de la densidad del fluido provocan que el líquido en el riser se mueva hacia arriba.
Conforme las burbujas se separan del líquido en la parte superior de recipiente, el líquido más
pesado libre de burbujas se recircula a través del llamado downcomer.

Figura 7. Biorreactor tipo Airlift

Lecho empacado
Se utiliza para células inmovilizadas. Consiste en un tubo vertical empacado con las partículas
catalizadoras. El medio puede ser alimentado en la cima o desde el fondo de la columna formando
una fase liquida continua entre las partículas. La transferencia de masa entre las células
inmovilizadas y el medio se facilita con elevados flujos a través del lecho.
 Figura 8. Biorreactor tipo Lecho empacado

Lecho fluidizado
Cuando los lechos empacados son operados en modo de flujo ascendente con partículas
catalíticas de tamaño y densidad apropiados, el lecho se expande a altos flujos de líquido debido al
movimiento ascendente de las partículas.

Figura 9. Biorreactor tipo lecho fluidizado

Tipo de agitación
Mecánica: operación de mezclado mediante el uso de algún dispositivo con aspas; existen
distintos tipos de impulsores como la propela marina, de palas inclinadas o el más común tipo
Rushton (6-flat-blade disc turbine). Se debe elegir el mejor de acuerdo a los patrones de corte y
flujo del fluido, su viscosidad, entre otros factores.
 Figura 10. Tipos de impulsores

Neumática: consiste en aplicar en el fondo del estanque un tubo con perforaciones por las cuales
se libera una presión de aire obtenida de un compresor adicional que debe tener el equipo.
Patrones de flujo:
Se refiere a la dirección de los vectores de velocidad a través de un recipiente en agitación. La
dirección y magnitud de velocidad ayudaran a predecir como responderá el fluido al impulsor. Por
tal motivo se pueden clasificar en

 Impulsores de flujo axial: Su movimiento va de arriba hacia abajo cuando el agitador se

monta en el centro del tanque, provocando que las células permanezcan suspendidas.
Generan bajos esfuerzos de corte.
 Impulsores de flujo radial: Cuenta con palas paralelas al eje vertical del agitador y del
tanque. Incrementan la transferencia de oxígeno, pero generan gran esfuerzo de corte
trayendo consigo problemas de ruptura celular.
 El flujo circular de líquido alrededor del eje es desfavorable porqué crea vórtices lo que evita
un mezclado correcto del medio. Para evitar esto, se añaden baffles o deflectores que
interrumpen este flujo circular y crean turbulencias. Esto es válido tanto para impulsores
axiales como radiales.

Fase de reacción:

 Homogénea: Se da cuando la concentración y temperatura en todo el sistema es uniforme.

 Heterogénea: Es aquella que sucede en presencia de gradientes de temperatura y
concentración. Su análisis requiere de principios de transferencia de masa en conjunto de la
teoría de reacción.

Objetivos
General
Identificar, clasificar y describir los diferentes tipos de biorreactores presentes en el laboratorio de
acuerdo con sus características. Así como relacionarlos con las aplicaciones que cada uno tiene.

Específicos
 Describir los componentes y características de los biorreactores de tanque agitado, Air-lift,
LAMBDA y planta piloto.
 Clasificar los biorreactores según sus características.
 Mencionar las aplicaciones de cada uno de los biorreactores.

Descripción del Sistema

En la figura 11, se observa el esquema general de los biorreactores. Donde vemos que se cuenta
con una entrada y salida que puede ser de vapor y/o de medio. Es importante recalcar que no es lo
mismo tener una válvula de alivio de presión que la salida; se considera que la entrada puede ser
de vapor porque al ser un fluido este puede ser el producto que se quiere recuperar o el medio.
Contrario a la válvula de presión, la cual ayuda a liberar el exceso de gas que es alimentado o
producido. Las válvulas de presión generalmente van acompañadas de un condensador, para
evitar la salida de otros productos.
También se ve que al tanque ingresan corrientes de bombeo de ácido y bases, así como
antiespumante. Estas entradas están reguladas por bombas peristálticas que se activan por os
sensores de pH, o de espuma.
El sistema también puede tener ingreso de aire, o de O 2, dependiendo de los requerimientos del
microrganismo.
La agitación puede ser generada por deflectores, bafles o por la misma inyección del gas desde la
parte inferior.
Finalmente tenemos que el biorreactor debe contar con un conjunto de sensores que ayuden a
monitorear las variables controladas del proceso. Estos valores posteriormente van a ser enviados
a una consola de control que los analizará y determinará si es necesario realizar algún ajuste en los
valores recibidos.

Figura 11. Esquema general de un biorreactor

Tabla 1: Sistema del Biorreactor de tanque agitado

 Funcionamient Se puede configurar para adaptarse a cualquier aplicación de
o cultivo microbiano o celular. Permite escalar un bioproceso
desde el descubrimiento inicial hasta la producción a gran
escala. Garantiza una transferencia fluida de los procesos a la
siguiente báscula de volumen.
Cuenta con placas deflectoras, sistema de calentamiento por
chaqueta, intercambiador de calor en donde pasa agua para
calentar el sistema, difusor de aire que suministra al sistema y
contiene un sensor de oxígeno
Características  Marca: Applikon
 Capacidad: 1 a 20L
 Material del tanque: Cristal

Tabla 2: Sistema del Biorreactor tipo Air-lift

Funcionamient Reactores sumergidos en los que el suministro de energía se

o realiza mediante absorción de gas, para la cual se utiliza aire
comprimido. Posee sistema de calentamiento por chaqueta
eléctrica.
En la parte inferior es donde se agregan los
controladores/sensores para variables como
pH, oxígeno o temperatura y también se introducen gases como
aire. Cuenta con una mirilla en la parte superior que permite
monitorear el estado del cultivo.
Características  Marca: Applikon
 Capacidad: 3L
 Material del tanque: Acero inoxidable

Tabla 3: Sistema del Biorreactor LAMBDA

Funcionamient El biorreactor MINIFOR LAMBDA tiene una geometría

o atípica ya que no es un cilindro sino una especie de semi-
cono invertido, el cual se inserta en la base que es donde se
encuentra la pantalla y controles digitales. En la parte
superior posee bombas peristálticas (de forma cuadrada)
programables para suministrar el líquido para hacer un lote
continuo. Tiene un sensor y controlador de concentración de
oxígeno conectado al control del equipo, exhausto para
liberar sustancias y un sistema de refrigeración para
reutilizar el vapor de agua de calentamiento que pueda ser
también de enfriamiento.
Características  Marca: LAMBDA
 Capacidad: 1 a 20L
 Material del tanque: Cristal

Tabla 4: Sistema del Biorreactor tanque agitado en planta piloto.

 Funcionamient Los biorreactores o fermentadores para planta piloto están
o diseñados con el fin de ser un intermedio para el
escalamiento de bioprocesos de laboratorio a la fase de
producción industrial de la forma más sencilla posible.
Cuenta con un motor y puertos de entrada de controladores
(pH, temperatura) en la parte inferior del biorreactor. En la
parte superior tiene una mirilla rectangular para observar el
cultivo y exhausto para liberar gases innecesarios. Posee un
sistema de esterilización de tipo caldera el cual también tiene
la ventaja de que se usa como controlador de temperatura y
presión.
Características  Marca: Biolafitte
 Capacidad: 20 L
 Material del tanque: Acero inoxidable

Materiales y equipo
 Biorreactor tipo tanque agitado, marca Applikon
 Biorreactor tipo air-lift, marca Applikon
 Biorreactor de geometría no convencional Lambda
 Biorreactor tipo tanque agitado, marca Biolafitte
 Probeta de 2 L
 Flexómetro

Metodología

Resultados y discusión
Se observaron cuatro biorreactores distintos, tanque agitado Applikon, Air-lift Applikon, LAMBDA y
Biolafitte para planta piloto. Por lo que se va a hacer la descripción de cada uno de ellos de forma
individual. Posteriormente se analizarán las posibles clasificaciones que pueden tener cada uno.

Tanque agitado
Tipo de Biorreactor Tanque Agitado
Marca Applikon
Geometría Su geometría es cilíndrica. Con medidas D=15.7cm; h= 35cm.
Capacidad 6L
Material Biorreactor de Vidrio; Tapa de acero inoxidable.
 3 bafles (D=6cm) para la agitación mecánica.
 Sparger.
 Sensor de temperatura.
Componentes
 Intercambiador de calor.
 Sensor de pH
 Dispositivos de adición.
 Sensor de oxígeno disuelto
 Toma de muestra.
Método de El biorreactor, así como la mayoría de sus componentes se esterilizan por medio
esterilización de la autoclave. Excepción del sensor de temperatura.
Ancho del deflector: 1.5 cm

Relaciones Di 6.3 cm HL 12.4 cm Ci 1.5 cm

= =0.406 = =0.789 = =0.095
geométricas DT 15.7 cm DT 15.7 cm DT 15.7 cm

Figura 12. Biorreactor tipo tanque agitado

Ensamble para motor

Suministro ácido, base o

antiespumante

Toma de muestra

Exhausto

Difusor de aire

Intercambiador de calor
 Bafles

Impulsor
Termopozo

Empaque

Figura 13. Componentes de un biorreactor tipo tanque agitado

Figura 14. Biorreactor de tanque agitado Applikon con su consola EZ-2

De acuerdo con el fabricante, el tanque de 7 L debe tener un volumen total de 6.8 L, un volumen de
trabajo de 5.4 L, y un volumen mínimo 1.5 L; y con dimensiones internas de 16 cm de diámetro y
350 cm de alto. Una velocidad de agitación mecánica de 50 a 1250 rpm con propelas Rushton o
Marina, además de un aspersor de gas en el fondo en forma de L para la agitación neumática.

El cuerpo del contenedor que alberga el cultivo o microorganismo está hecho de vidrio de
borosilicato que reposa sobre un trípode de metal (Applikon Biotechnology, 2008).
De acuerdo con el fabricante (Applikon Biotechnology, 2008), el tanque de 6 L debe tener un
volumen total de 6.8 L, debido a los componentes de monitoreo que se van a ingresar al
biorreactor; un volumen de trabajo de 5.4 L, y un volumen mínimo 1.5 L. Con dimensiones internas
de 16 cm de diámetro y 35 cm de alto. En las medidas que nosotros realizamos observamos una
ligera variación, esto se puede deber a que las medidas con el flexómetro pueden no ser exactas
del todo. Además, que la forma de la base del tanque no es totalmente plana, lo que puede hacer
que nuestro punto de referencia no sea el adecuado.
La agitación que presenta es mixta, ya que cuenta con los sistemas de agitación mecánica y
neumática, que pueden operar de manera simultánea o independiente. Para la agitación mecánica
se cuenta con bafles y 3 impulsores (D=6cm) que, por medio de un motor, giran y permiten el
movimiento del líquido. Para la agitación neumática se cuenta con un sparger, o difusor de aire el
cual se incorpora mediante un compresor y es inyectado por el difusor, que consiste en un tubo con
agujeros por la parte inferior del biorreactor cerca de las paletas de agitación. Esta configuración
aumenta la disponibilidad del oxígeno y realiza el mezclado durante alguna fermentación, dentro de
este sistema se encuentran los motores e impulsores (Pérez, 2013).
Cuenta con varios puertos para la adición, extracción y control de las variables del sistema:
Permiten la adición de antiespumantes, ácidos y bases. Así mismo, tiene un puerto que permite la
toma de muestra.

Se hace uso de un termómetro que se coloca en un termopozo para monitorear la temperatura de

nuestro bioproceso. En caso de ser necesario modificar la temperatura se usan 2 sistemas. El
primero es un intercambiador de calor, el cual principalmente se usa para enfriar el líquido; el
segundo es una chaqueta o mantilla que sirve por medio de resistencias calentando el medio.
Ambos sistemas ayudan a mantener el biorreactor a una temperatura óptima para lograr un
eficiente desarrollo de los microorganismos (Pérez, 2013).

El pH es una de las características fisicoquímicas de los microorganismos, es por eso por lo que
mantener un control de esta variable en nuestro proceso es importante. Para poder tener un
monitoreo se usan sensores de pH. La cual es una sonda o probeta electroquímica que mide la
acidez o basicidad e informa al controlador de pH la situación del medio (Applikon Biotechnology,
2008).
Para poder tener control de esta variable se hace uso de sustancias concentradas para modificar el
pH, al valor deseado. Se usa NaOH como agente básico, y HCl como ácido. Ambos al ser una
base y un ácido fuertes respectivamente, con la adición de un volumen pequeño se puede
modificar en gran medida el pH, sin tener que afectar de manera significativa el volumen del medio.

Otra variable importante por controlar es la cantidad de oxígeno presente en el medio. Esta se
puede manipular por medio de un dispersor de aire o de oxígeno. Para cualquier fluido que se
ingrese, el biorreactor cuenta con un sensor de oxígeno disuelto, el cual, como su nombre lo indica,
mide la cantidad de oxígeno disuelto para la reducción química de un equivalente en iones sulfito a
la cantidad de materia orgánica presente en el medio líquido que se debe oxidar (Pérez, 2013)

Las principales aplicaciones de este biorreactor son la optimización de las condiciones de

operación para un proceso específico, la validación de protocolos y la producción a pequeña escala
(Palomares & Ramírez, 2009) debido a su capacidad, así como el material del que está hecho.

Airlift

Tipo de Biorreactor Airlift

Marca Applikon
Geometría Forma de torre. En la parte de adentro es el tubo concéntrico llamado tubo draft
que pasa el aire y al no estar pegado a la base el movimiento es descendente y
luego ascendente por fuera del tubo.
Capacidad 4L
Material. Acero inoxidable
Componentes.  Toma de muestra.
 Adaptador para termómetro,
 Manguera donde pasa un gas por la membrana.
 Camisa de calentamiento,
 Resistencia
 Adaptadores para sensor de pH, oxígeno disuelto,
 Sparger o Inyector de aire.
 Mirilla izquierda para observar la reacción.
 Sensor de volumen o espuma
 Tres puertos de inyección de las sustancias de pH ácido o base o inyección de
medios de cultivo.

Figura 15. Biorreactor Airlift Figura 16. Componentes del biorreactor Air-lift

Tapa

Mirilla

Toma de muestra

Suministro
ácido, base o
 Figura 17. Componentes del biorreactor Air-lift

El tanque tipo airlift se agita únicamente de forma neumática y es usado frecuentemente en

bioprocesos donde el contacto gas-líquido es muy importante. El rol de gas es entrar en contacto
con el líquido para llevar a cabo procesos como la absorción y la desorción, proveer energía a
través de la expansión del gas o por la flotabilidad de las burbujas para la agitación del líquido. El
flujo en el airlift es un tipo loop cíclico.

Cuenta con un difusor en el fondo, que, al introducir el aire, va directamente a la zona de flujo
ascendente haciendo que el líquido vaya hasta la parte superior donde el aire se separa del líquido
causando que la mezcla circule entre dos zonas interconectadas por la densidad de la dispersión
gas-líquido en la zona de flujo descendente, brindando así una recirculación más vigorosa (Chisti,
2003).

Su geometría consta de un recipiente cilíndrico, está diseñado con una altura total a las relaciones
de diámetro (h/d) entre tres y diez (Morales, 2008).
De acuerdo con Rigan, 2011 volumen máximo de operación para este biorreactor es de 80% y un
inóculo de 10%, para volúmenes totales varía de 3-15 L y volúmenes útiles de 2 L / 5 L / 10 L y una
temperatura de trabajo de Fluido refrigerante 7°C hasta 60°C.

De las características más atractivas del airlift son su bajo consumo de energía, la simplicidad en
construir sus piezas al no ser parte movibles, una alta tasa de transferencia de calor y masa y una
distribución uniforme de esfuerzo de corte (Chisti Y, et al, 1989, Merchuk JC, et al, 1994)

La ventaja de su bajo consumo de energía es de particular importancia en el tratamiento de

efluentes donde el valor del producto es bajo, por lo tanto, el costo operacional es fuertemente
considerable desde el punto de vista a escala industrial. El esfuerzo de corte homogéneo es
importante para procesos biológicos donde el organismo es sensible, a diferencia de los tanques
agitados donde hay gradientes de esfuerzo de corte y puede ocasionar cambios en la morfología
celular o dañarlas (células animales o plantas). La construcción simple del Airlift sin ejes elimina la
contaminación asociada con los tanques agitados convencionales. Por otro lado, tiene que
esterilizarse por partes debido a su tamaño, no tiene sistema de bombas para regular los flujos y es
un poco más difícil de manejar que el convencional tanque agitado. (Martínez, A. M M., et al, 2013)

Lambda

Tipo de Biorreactor LAMBDA

Marca Minifor Laboratory fermentor
 Capacidad 2L
Geometría Su geometría es no convencional, es en forma de trapecio invertido o de corazón.
Características  Sensor de temperatura
 Intercambiador de calor
 Resistencia que generar calor
 Sensor de oxígeno disuelto.
 Difusor de aire
 Exhausto
 Sensor pH
 Puerto para ingreso de ácido, base y/o antiespumante.
 Bombas peristálticas
 Sensor de nivel
 Puertos de muestreo

Figura 18. Biorreactor tipo lambda

Motor con acople

Bombas Preciflow
magnético unido a la
Adición de ácido o base
flecha

Intercambiador de
calor
Vaso de fermentación

Control de parámetros
Temperatura
Agitación Calentamiento infrarrojo
pH
Velocidad de flujo
pO2
Entre otros
 Figura 19. Principales componentes del biorreactor tipo Lambda

Inyección de
ácido base y
espumante Sensor de pH

Flecha

Toma de
muestra

Figura 20. A la izquierda diferentes sistemas con los que cuenta el biorreactor Lambda; a la derecha una
representación de la forma de movimiento que realiza la flecha.

Está diseñado para operaciones específicas, ideal para operaciones en laboratorio y está
disponible para volúmenes desde 30 mL a 7 L con forma de matraz invertido, de acuerdo con el
fabricante, elimina el disco superior (placa principal o plato de cabeza en biorreactor de tanque
agitado) completamente ya que suele ser costoso y el diseño de puertos laterales permite el
acceso de forma facilitada (Instrumentos de laboratorio LAMBDA, s.f.).

Para el control de la temperatura, cuando es necesario calentar el medio, se utiliza una resistencia
que está en la base del soporte; esta se enciende y apaga según sea necesario para mantener la
variable en el rango deseado. Los rayos de calor son concentrados por el reflector parabólico
dorado con una eficiencia del 98% en el fondo del recipiente, donde aproximadamente el 50% es
absorbido por el vidrio y aproximadamente el 50% es absorbido directamente por el medio. El
resultado es un calentamiento extremadamente suave sin puntos calientes, ni siquiera en los
niveles medios más bajos. Debido a la baja capacidad calorífica de los metales, la dosificación
precisa del calor suministrado permite un control muy preciso de la temperatura en el medio
(Lehky, 2021)
Para el monitoreo y control del oxígeno disuelto se utiliza un electrodo de oxígeno tipo Clark. Este
es esterilizable con una respuesta rápida, calibración semiautomática de dos puntos, y control de
oxígeno disuelto (OD) a través de la regulación del flujo de aire (Lehky, 2021). Para modificar la
cantidad de oxígeno se suenta con un difusor de aire en donde se generan las burbujas y estas
ingresan al medio; in embargo el ingreso constante de gas haría que la presión del tanque
aumente, para evitar esto se utiliza un exhausto, el cual sirve para sacar todo el gas que entra al
sistema.

De igual forma el biorreactor cuenta con puertos de muestreo en donde se obtienen la muestras y
puertos de adición en donde se le pueden inyectar diferentes medios ácidos o básicos según el
requerimiento

Para el monitoreo del pH se cuenta con un electrodo que trabaja con la escala 1-14, esterilizable,
con corrección automática de la temperatura, calibración semiautomática de dos puntos y conector
(Variopin Lehky, 2021). Y para su control se hace uso de bombas peristálticas (cuadradas) que se
programan para ver cuánto líquido se tiene que suministrar, la sustancias que se ingresan son
NaOH y HCl, debido a que son una base y ácido fuerte respectivamente. Otra de las funcione de
las bombas es que pueden utilizarse para suministrar de forma continua medio, lo que podría
facilitar que la operación sea lote alimentado o continuo.

Sensor de nivel que indica que el nivel de operación está por arriba de lo esperado, por lo que si se
empieza a generar espuma se debe administrar antiespumante, este también se puede ingresar
por medio de las bombas peristálticas.
El sistema tiene la opción de conectarse a una consola para la manipulación de variables y la
recolección de datos, mencionado anteriormente. En este biorreactor el sistema de control es la
base cuadrada que está junto al soporte.

Al medir el tamaño del tanque, encontramos que su volumen es de 2L sin embargo la capacidad
con la que operan, según el fabricante es:

➢ Capacidad de volumen: escala de laboratorio de 35 mL a más de 5 L. El recipiente estándar

tiene un volumen total de 1 litro.
➢ Frasco fermentador: Vasos de 0.3, 0.4, 1.3, y 7 L de vidrio de borosilicato Pyrex con 6-8
cuellos con roscas (LAMBDA, 2021).
 Fig
ura 21: Diferentes características del Biorreactor LAMBDA (Frescos fermentadores)

Las características físicas del fermentador se pueden observar en la figura 18.

Dentro de las aplicaciones que tiene el biorreactor tipo Lambda encontramos:

- Fermentación microbiana de alta densidad (Bacterias, Levaduras, Hongos)
- Cultivos en modos de operación continuo/ perfusión/ incrementado y lote
- Fermentaciones aeróbicas y anaeróbicas.
- Producción de Proteínas, Vacunas y Anticuerpos Monoclonales
- Cultivo de células de Animales, de Mamíferos e Insectos
- Cultivo Controlado de Células Madre
- Ingeniería de Tejidos
- Cultivo celular de algas/ Plantas
- Universidades de Ciencias de la Vida & Escuelas Técnicas

Tanque Agitado en Planta piloto

Tipo de Biorreactor Tanque agitado para planta piloto.

Marca BioLafitte
Capacidad 20L
Geometría Cilíndrica. Con medidas D=21.5cm; h= 55.7cm.
Características  Cuerpo de acero inoxidable
 4 impulsores (D= 9cm)
 Temperatura máxima de operación de 133°C
 Presión máxima de operación de 2 bar
 Cuenta con bafles para evitar vórtices
 Diversos puestos rosca para el acoplamiento de sensores
 Cuenta con un filtro de aire para la agitación neumática
  Se puede esterilizar por inyección de vapor con una caldera incorporada
 Contiene un condensador en la parte superior

Figura 22. Tanque agitado en plata piloto

Medidor de presión
Filtro de
aire Intercambiador
de calor.
Puertos de
Temperatura, pH
y oxígeno
disuelto

Mirilla

Caldera

Flecha de agitación
Adaptadores para
sensores.
Toma de
muestra
Figura 23. Principales componentes y sistemas del TA en planta piloto.

Para las operaciones en planta piloto y gran escala, este tipo de biorreactor es el diseño más
utilizado, ya que puede usarse en fermentaciones aeróbicas y anaeróbicas de una amplia gama de
células microbianas, animales y vegetales (Dutta R. 2008).

Al tratarse de un reactor más grande, este debe de ser de un material más resistente y seguro de
operar, el cual es el acero inoxidable.
El término “Planta Piloto” abarca un amplio rango de escalas, desde plantas a escala laboratorio
hasta plantas a escala semi-industrial. Para las operaciones en planta piloto y gran escala, este tipo
de biorreactor es el diseño más utilizado, ya que puede usarse en fermentaciones aeróbicas y
anaeróbicas de una amplia gama de células microbianas, animales y vegetales (Dutta R. 2008).

Posteriormente se realizó una comparación con cada uno de los biorreactores, para tener un mejor
análisis de sus funciones y capacidades que se muestra en la Tabla 1.

Tabla 1. Clasificación de los distintos tipos de biorreactores que hay en los laboratorios de
Pesados 2 en UPIIG según ciertas características.
TANQUE PLANTA
Biorreactor AIRLIFT LAMBDA
AGITADO PILOTO
Reactor por lote,
Tipo de
Reactor por lote. Reactor por lote. Reactor por lote. continuo,
alimentación semicontinuo.
Volumen total:
Volúmenes totales: Volumen total:
Capacidad operación 6.8L:
4L
Volumen total: 2 L
20L
5.4L

Recipiente en Forma no
Recipiente Recipiente
Geometría cilíndrico
forma de torre convencional en
cilíndrico
cilíndrica. forma de corazón.

Mixta. Mixta. Mixta.

Mecánica: Mecánica: Mecánica:
Neumática: Difusor
Agitación. Impulsores. Impulsores. Impulsores.
de aire.
Neumática: Difusor Neumática: Difusor Neumática:
de aire. de aire. Difusor de aire.
Múltiples
Puerto de adición entradas de
Pozos adición de
Entradas de cuádruple, ácido, líquido.
ácidos, bases o
Toma de líquido, para ácido, base, inóculo,
antiespumante. Muestreo
muestra e base, inóculo, antiespumante.
antiespumante. Muestreo regulable, regulable, por
inoculación. por medio de una
Toma de muestra medio de una
1 toma de muestra con dispositivo de llave de paso.
llave de paso.
muestreo estéril.

Esterilizació Con vapor In situ (tipo

En autoclave En autoclave
n sobrecalentado caldera)

Conclusión
Se logró identificar y clasificar adecuadamente los diferentes tipos de biorreactores de acuerdo con
su operación principal, así como sus características, realizando una comparación de los
componentes de los 3 diferentes tipos de biorreactores que se encuentran en el laboratorio, dando
a conocer de forma específica cada uno de ellos, así como su funcionamiento de éstos. Finalmente
se pudo dar un panorama mucho más amplio de las aplicaciones, sobre todo en su especialización
de los bioprocesos para una utilización correcta de los biorreactores.
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