Actividad 19: Cálculo de la dispersión

proteica en electroforesis
Los docentes del laboratorio de biotecnología molecular desean incluir dentro de
sus actividades del curso una demostración del proceso de electroforesis de
proteínas para los estudiantes que cursan la asignatura de maneta virtual. Para lo
anterior solicitan el espacio temporal dentro de las instalaciones de la unidad y se
les proporciona el acceso por 1h, con lo cual se desea diseñar la practica para que
se realice en ese intervalo de tiempo. En el almacén del laboratorio se cuenta con
muestras de3 albumina de huevo (PM=45kDa) ImG (PM=150) y de colágeno
(PM=345kDa); pero no saben cuál de ellas seria la adecuada para que durante este
tiempo de la demostración los alumnos aprecien el movimiento sensible a la misma
dentro del gel. Si se sabe que la viscosidad del sistema de electroforesis es
aproximadamente 0.001 Kg/m*s y que el experimento se llevara a cabo a
temperatura ambiente
A) Determine la difusividad de cada proteína bajo dichas condiciones.
𝑇
𝐷𝐴𝐵 = 9.4𝑥10−11 ( 3 ) ; 𝑇: 25°𝐶 ; 𝜇 = 0.001𝑘𝑔/𝑚𝑠 ; 𝑃𝑀𝐴 = 45𝑘𝐷𝑎
𝜇 √𝑃𝑀
= 45000𝐷𝑎

𝑃𝑀𝐼 = 150𝑘𝐷𝑎 = 150000𝐷𝑎 ; 𝑃𝑀𝑐 = 345𝐾𝐷𝐴 = 345000𝐷𝑎

298.15 298.15
𝐷𝐴𝐵 = 9.4𝑥10−11 ( 3 ) ≅ 9.4𝑥10−11 ( 3 )
0.001 √𝑃𝑀 0.001 √45000
298.15
≅ 9.4𝑥10−11 ( ) ≅ 7.8725𝑥10−7 𝑐𝑚2 /𝑠
0.001 ∗ 35.5689

298.15 298.15
𝐷𝐼 = 9.4𝑥10−11 ( ) ≅ 9.4𝑥10−11 (
3 3
)
0.001 √𝑃𝑀 0.001√150000
298.15
≅ 9.4𝑥10−11 ( ) ≅ 5.2779𝑥10−7 𝑐𝑚2 /𝑠
0.001 ∗ 53.1329
 298.15 298.15
𝐷𝐶 = 9.4𝑥10−11 ( 3 ) ≅ 9.4𝑥10−11 ( 3
)
0.001 √𝑃𝑀 0.001 √345000
298.15
≅ 9.4𝑥10−11 ( ) ≅ 3.998𝑥10−7 𝑐𝑚2 /𝑠
0.001 ∗ 70.1357

a) La difusividad de la albúmina es de ≅ 7.8725𝑥10−7 𝑐𝑚2 /𝑠, 𝑙𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑔𝑀 𝑒𝑠 𝑑𝑒 ≅

5.2779𝑥10−7 𝑐𝑚2 /𝑠 𝑦 𝑙𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑐𝑜𝑙𝑎𝑔𝑒𝑛𝑜 𝑒𝑠 𝑑𝑒 ≅ 3.998𝑥10−7 𝑐𝑚2 /𝑠 para las
condiciones electroforéticas del experimento.

B) Estime la función de dispersión de cada proteína con respecto al tiempo y

grafique la dinámica de la tendencia.

𝜎 = √2𝐷𝐴𝐵 𝑡

𝜎 = √2𝐷𝐴𝐵 𝑡 = √2 ∗ 7.8725𝑥10−7 𝑐𝑚2 /𝑠 ∗ 𝑡 = √1.5745𝑥10−6 ∗ 𝑡

𝜎 = √2𝐷𝐼 𝑡 = √2 ∗ 5.5770𝑥10−7 𝑐𝑚2 /𝑠 ∗ 𝑡 = √1.1154𝑥10−6 ∗ 𝑡

𝜎 = √2𝐷𝐶 𝑡 = √2 ∗ 3.998𝑥10−7 𝑐𝑚2 /𝑠 ∗ 𝑡 = √7.996𝑥10−6 ∗ 𝑡

 Grafica t vs σ
0.2

Disperción [cm]
0.15

0.1

0.05

0
0 1 2 3 4 5 6 7
Tiempo (h)

σA(cm) σ I(cm) σ C (cm)

La dispersión de la albumina con respecto al tiempo es mayor que las otras bajo
las condiciones electroforéticas del experimento

C) Calcule el tiempo necesario para que cada proteína se desplace al menos el

ancho de la banda inicial que es de 0.08cm.
𝜎 = 0.08𝑐𝑚
6.4𝑥10−3
𝜎𝐴 = √1.5745𝑥10−6 ∗ 𝑡 = 0.08 → 6.4𝑥10−3 ∗ 𝑡 ∴ 𝑡 = = 4064.7824𝑠
1.5745𝑥10−6
≅ 1.1291ℎ ≅ 1ℎ 15𝑚𝑖𝑛
6.4𝑥10−3
𝜎𝐴 = √1.1154𝑥10−6 ∗ 𝑡 = 0.08 → 6.4𝑥10−3 ∗ 𝑡 ∴ 𝑡 =
1.1154𝑥10−6 ∗
= 5737.8515𝑠 ≅ 1.5938ℎ ≅ 1ℎ 40𝑚𝑖𝑛
6.4𝑥10−3
𝜎𝐴 = √7.996𝑥10−6 ∗ 𝑡 = 0.08 → 6.4𝑥10−3 ∗ 𝑡 ∴ 𝑡 = = 8004.002𝑠
7.996𝑥10−6 ∗
≅ 2.2233ℎ ≅ 2ℎ 15𝑚𝑖𝑛
c) El tiempo aproximado requerido por cada proteína para apreciar un
desplazamiento de 0.08cm es de 1 hora 15 min para la albumina, 1 hora 40 min
para el IgM y 2 horas 15 min para el colágeno respectivamente.
D) Con base a lo anterior, elija la proteína que permita a los alumnos apreciar la
movilidad electroforética en el tiempo de clase.
Si tenemos disponible solo una hora dentro del laboratorio, entonces la muestra
más adecuada para llevar a cabo la demostración de la albumina.