UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

TÉCNICAS DE INVESTIGACIÓN EN BIOQUÍMICA:

CENTRIFUGACIÓN DIFERENCIAL
*Francisco Abanto Zamora

INTRODUCCIÓN

Desde hace ya algunos años el perfeccionamiento de varias técnicas ha

facilitado un conocimiento mejor sobre el origen, la estructura y la
función de un gran número de organoides presentes en el citoplasma
de la mayoría de las células, así como de sus constituyentes. Dentro de
estos avances técnicos se mencionan los siguientes:

1. Métodos para preparar células y tejidos que permiten observar la

ultraestructura, con el microscopio electrónico, a nivel de unidades
angstrom (A°) (diezmilésima parte de una micra). El poder de resolución
de un microscopio electrónico moderno alcanza hasta 2.5 A°

2. Una mejoría en las técnicas

Figure 1 CENTRIFUGA
de aislamiento y preparación
de varios componentes
subcelulares, que facilita el estudio posterior in vitro (por
ejemplo, centrifugación diferencial en sacarosa).

3. Un desarrollo en las técnicas con el empleo de isótopos

radiactivos para localizar diversos compuestos químicos y
Figure 2 EL HOMOGENEIZADO SECENTRIFUGA establecer su función e interrelación en el interior de la
PARA OBTENER EL SEDIMENTO célula.

4. Se dispone, además, de un buen número de técnicas fisiológicas y bioquímicas

(cromatográficas, espectrofotométricas, centrifugacionales, electroforéticas, etc.) que permiten
el estudio detallado de los variados biopolímeros (como proteínas, lipoproteínas, ácidos
nucleicos y polisacáridos) y moléculas pequeñas (como aminoácidos, azúcares, ácidos grasos,
etc.).

Como son muchos los métodos que se emplean a la fecha y que sirven para abordar el
estudio de la célula, consideraremos solamente y de una manera muy somera algunas
de las técnicas más usuales. (ONDARZA, 2010)

PARA DISGREGAR CÉLULAS Y AISLAR MOLÉCULAS INTRACELULARES Y ORGANELOS

SUBCELULARES SE USAN TÉCNICAS FÍSICAS

Para estudiar con profundidad la función de cualquier organelo, es necesario primero aislarlo en
forma relativamente pura, sin contaminación importante de otros organelos. El proceso habitual
para conseguirlo se llama fraccionamiento subcelular y, por lo general, comprende tres
procedimientos: extracción, homogeneización y centrifugación. Gran parte de los trabajos
iniciales en esta área utilizaron hígado de rata. (Murray, 1997)
 Ver Anexo 1
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

ANEXO 01
MAPA CONCEPTUAL
LA CELULA: ORGANELO, BIOMOLECULA MARCADOR, FUNCION

BIOMOLECULA
ORGANELO FUNCION
MARCADOR

UBICACION DE
NUCLEO ADN
CROMOSOMAS

CICLO DEL
MITOCONDRIA GLUTAMICO DH
ACIDO CITRICO

APARATO DE GALACTOSIL GLUCOSILACION

GOLGI TRANSFERASA Y SULFATACION

SINTESIS DE
RETICULO GLUCOSA 6 LIPIDOS Y
ENDOPLASMICO FOSFATASA PROTEINAS
(R.E.R.)

FOSFATASA ENZIMAS
LISOSOMA ACIDA DEGRADATIVAS

 Docente del Departamento de Bioquímica

Universidad Nacional de Trujillo (PERU).
Mayo, 2020.