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A causa del tamao tan pequeo del tema de estudio, la biologa celular y
molecular depende ms del desarrollo de nuevos instrumentos y tecnologas.
Por consiguiente, es difcil aprender acerca de la biologa celular y molecular
sin aprender tambin respecto a la tecnologa que se requiere para agrupar
datos.
En el presente trabajo se revisan los mtodos que se emplean ms a menudo
en este campo. Los objetivos son los siguientes:
Describir las formas en que se utilizan las diversas tcnicas.
Presentar ejemplos de los tipos de informacin que puedan obtenerse
mediante tales tcnicas.
Se comienza con el instrumento que permiti a los bilogos descubrir la
existencia de clulas, con el que se establece un punto partida para toda
informacin que est presente en este trabajo.
MICROSCOPA
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EL MICROSCOPIO PTICO
Una fuente de luz, que puede ser externa al microscopio o estar incluida en su
base, ilumina la muestra. La lente condensadora subyacente rene los rayos
difusos de la fuente de luz e ilumina la muestra con un pequeo cono de luz
brillante que permite ver las partes muy pequeas de ste despus de la
magnificacin. Los rayos de luz enfocados en la muestra por la lente
condensadora se reciben en la lente del objetivo del microscopio. A partir de
este punto es necesario considerar dos conjuntos de rayos lumnicos que
entran a la lente del objetivo: los que ya alter la muestra y los que no modific.
Permite ver objetos tan pequeos como 0.5 m (bacterias y mitocondrias)
Las muestras pequeas y no teidas, como una clula viva, pueden ser difciles
de observar con un microscopio de campo brillante. El microscopio de
contraste de fase hace ms visibles los objetos muy transparentes
Los microscopios de contraste de fase son ms tiles para examinar
componentes intracelulares de clulas vivas con una resolucin hasta cierto
punto alta. Por ejemplo: la movilidad dinmica de las mitocondrias, los
cromosomas mitticos y las vacuolas pueden seguirse y filmarse con este
sistema ptico.
El mayor beneficio aportado por la invencin del microscopio de contraste de
fase no fue el descubrimiento de nuevas estructuras, sino su empleo diario en
laboratorios de investigacin y enseanza para observar clulas de manera
ms reveladora.
MICROSCOPIA DE FLUORESCENCIA
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Las micrografas electrnicas que se muestran, fueron tomadas con dos tipos
distintos de microscopios electrnicos. Los microscopios electrnicos de
transmisin (TEM) forman imgenes con los electrones que se transmiten a
travs de una muestra, mientras que los microscopios electrnicos de barrido
(SEM) utilizan electrones que rebotan en la superficie de la muestra.
CULTIVO CELULAR
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Se usa mucho para separar cidos nucleicos con masa molecular diferente (o
sea, longitud del nucletido). Las molculas pequeas de RNA o DNA de unos
cuantos cientos de nucletidos o menos casi siempre se separan por
electroforesis en gel de poliacrilamida. Despus de la electroforesis, los
fragmentos de DNA en el gel se visualizan empapando el gel en una solucin
de colorante como bromuro de etidio. ste se intercala en la doble hlice y
hace que las bandas de DNA presenten fluorescencia cuando se observan con
radiacin ultravioleta.
En 1983 Kary Mullis de Cetus Corporation concibi una nueva tcnica que
ahora se emplea mucho para amplificar fragmentos especficos de DNA sin la
necesidad de clulas bacterianas. Esta reaccin se conoce como reaccin en
cadena de la polimerasa (PCR, polymerase chain reaction). Muchos protocolos
diferentes de PCR se usan para una multitud de aplicaciones en las que es
posible amplificar desde uno hasta una gran poblacin de DNA relacionados.
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GENOTECAS DE DNA
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USO DE ANTICUERPOS
Una de las propiedades ms atractivas de los anticuerpos y que los hace tan
tiles para los investigadores en biologa es su especificidad notable. Una
clula puede contener miles de protenas diferentes y aun as una preparacin
de anticuerpos se une slo con las molculas seleccionadas dentro de la clula
que tienen una pequea parte que se adapta a los sitios para unin de
antgeno de las molculas de anticuerpo.
En la estrategia tradicional, un animal (por lo general un conejo o una cabra) se
inyecta varias veces con el antgeno y tras un periodo de varias semanas se
extrae sangre que contiene los anticuerpos deseados. La sangre entera se
trata para eliminar las clulas y los factores de coagulacin a fin de producir un
antisuero, que puede someterse a prueba para cuantificar su ttulo de
anticuerpos y del que pueden purificarse las inmunoglobulinas.
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BIBLIOGRAFIA
molecular.
http://es.slideshare.net/frank1280/1-2-tecnicas-empleadas-en-bc
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