Universidad Autónoma de Nuevo León

Facultad de Ciencias Biológicas

Fisiología Microbiana
Docente: Yaraymi Ortiz Reyes

Practica 1 y 3

Andrea Montserrat Valdés Peña

1732440
Grupo: 262

26 de agosto 2022
Resultados

Tinción inicial

Tinción con lisis química Tinción con lisis

física
Observando y comparando las dos tinciones en la tinción inicial podemos observar
muchos y de forma muy clara los bacilos de C. perfringens, después de realizar el
procedimiento de la lisis química al momento que volvimos a observar el frotis
pudimos darnos cuenta de que la mayoría de los bacilos ya no podían ser vistos,
ya no se veían de la forma en la que se veían en el frotis inicial, sólo pudimos
observar muy pocos y grandes manchas de tinta. Mientras que en la prueba con
lisis física observamos que quedaron algunos bacilos en su forma inicial que
quiere decir que no fueron afectados por el método utilizado para la lisis, sin
embargo, sí se ve una gran diferencia con la estructura que antes presentaban,
ahora se pueden ver de forma mucho más alargados y muy delgados.
Discusión
La intensidad ultrasónica se puede nivelar mediante el ajuste de los parámetros
del proceso, la intensidad de sonicación óptima desde muy suave a muy duro se
puede configurar individualmente para que cada sustancia y medio cumplan los
requisitos específicos de la aplicación. (Hielscher, 2015). La sonicación es una
herramienta muy eficaz y fiable para la desintegración celular que permite un
control completo sobre los parámetros de sonicación. Esto asegura una alta
selectividad sobre la liberación de los materiales y la pureza del producto.
(Balasundaram et al. 2009). Es adecuado para todos los tipos de células y
fácilmente aplicable en pequeña y gran escala. Sin embargo, en los resultados
que nosotros obtuvimos vimos que puede que no sea tan eficaz o que el
procedimiento, tiempos o la temperatura no haya sido lo adecuado
Los detergentes (o tensioactivos) se utilizan en las soluciones de lisis celular
porque alteran la interfaz distintiva entre los sistemas hidrofóbicos e hidrofílicos.
Ayudan a solubilizar las proteínas y los lípidos de la membrana, lo que hace que la
célula se lise y libere su contenido. Es un método popular para la ruptura de
células. Es bastante fácil de realizar y no requiere ningún equipo especial.
(Tecnotelefonia, 2022). Es un método sencillo de realizar y no empleamos de
ningún equipo extra, como lo tuvimos que hacer con el sonicador, aparte que
resultó muy buena la ruptura celular.
Conclusión
La lisis química es un muy buen método para lograr la ruptura de partes de la
pared celular, ya que la mayoría de los bacilos fueron destruidos. Por otro lado, la
lisis física también es buena, pero tiene menos efectividad que la lisis química,
podría decirse que en los dos métodos utilizados la que presenta mayor
efectividad en la lisis química.
Cuestionario
Describe el mecanismo de acción por lo cual los componentes químicos
provocan lisis
Se aplica directa o indirectamente, dependiendo del tipo de célula de que se trate
y con qué propósito se somete a dicho proceso, en estas se emplean detergentes
con distintas propiedades.
Los detergentes se encargan de romper la barrera lipídica esto lo hacen
solubilizando las proteínas e interrumpiendo la interacción lípido-lípido, lípido-
proteína y proteína-proteína.
Los detergentes, al igual que los lípidos, se asocian entre ellos y se unen a
superficies hidrofóbicas. Se componen de una cabeza polar hidrofílica y una cola
no polar hidrofóbica.

Explicar el principio básico por el cual el funciona el sonicador.

Rompen las células por medio de ondas de ultrasonido de alta frecuencia. La
vibración ejerce un fuerte impacto en las soluciones, rompiendo las moléculas y
rompiendo las células.
Bibliografía
Parada Puig, Raquel. (2020). Lisis celular. Lifeder. Recuperado
de https://www.lifeder.com/lisis-celular/. Consultado el 26/08/22
Velázquez, Martínez, Romero, Laura, Maria, Amelia (2014). Extracción y
purificación de ADN. Herramientas moleculares aplicadas en ecología: aspectos
teóricos y prácticos. Consultado el 26/08/22
Hielscher. (2015). Lisis por sonicación: Disrupción y extracción celular de
Hielscher Ultrasonics Sitio web: https://www.hielscher.com/es/ultrasonic-lysis-cell-
disruption-extraction.htm. Consultado el 26/08/22
Balasundaram, B.; Harrison, S.; Bracewell, D. G. (2009): Los avences en las
estretegias de lanzamiento de productos y el impacto en el diseño de bioprocesos.
tendencias en Biotecnología. Consultado el 26/08/22
Jessie Wong. (2014). Como funciona la sonicación, de ULTRASONIC
TECHNOLOGY Sitio web: https://www.bjultrasonic.com/es/how-does-a-sonicator-
work/. Consultado 26/08/22
Tecnotelefonia. (2022). Detergentes que se usan para la lisis celular, de
Universidad de la Rioja Sitio web: https://tecnotelefonia.com/celular/detergentes-
que-se-usan-para-la-lisis-celular/. Consultado el 26/08/22