Práctica No. 1.

cruzas genéticas

Introducción.

EI gen, Ia unidad funcionaI básica de Ia herencia, es eI foco de atención de Ia

Genética moderna. En todas Ias Iíneas de investigación genética, eI gen constituye
eI hiIo unificador común de una gran variedad de estudios experimentaIes. EI
concepto de gen (aunque no Ia paIabra) fue propuesto por primera vez en 1865 por
Gregor MendeI. Hasta entonces, se habían reaIizado pocos avances en eI
entendimiento de Ios mecanismos de Ia herencia. La noción que prevaIecía era que
eI espermatozoide y eI óvuIo contenían un conjunto de esencias originadas en Ias
distintas partes deI cuerpo deI organismo parentaI; durante Ia concepción, estas
esencias se mezcIaban de aIguna forma para infIuir en eI desarroIIo deI nuevo
descendiente. Esta idea de herencia mezcIada surgió para expIicar eI hecho de que
Ia descendencia muestra normaImente características que son simiIares a Ias de
ambos progenitores. Sin embargo, había probIemas obvios asociados con esta idea,
uno de Ios cuaIes es que Ia descendencia no es siempre una mezcIa intermedia de
Ias características de Ios padres. Los intentos para mejorar y extender esta teoría,
originaImente concebida por AristóteIes, nos IIevaron a un mejor entendimiento de Ia
herencia.

Como resuItado de su investigación con pIantas de chicharos, MendeI propuso una

teoría de herencia particuIada. De acuerdo con esta teoría, Ios caracteres están
determinados por unidades discretas que se heredan intactas a Io Iargo de Ias
generaciones. Este modeIo expIicaba muchas observaciones que no eran expIicadas
por Ia hipótesis de Ia herencia mezcIada. También sirvió como marco para un
posterior y más detaIIado entendimiento de Ios mecanismos de Ia herencia.

La importancia de Ias ideas de MendeI fue reconocida hasta cerca de año 1900
(después de su muerte). Su trabajo escrito fue entonces descubierto de nuevo por
tres científicos, después de que cada uno de eIIos hubiera obtenido de forma
independiente eI mismo tipo de resuItados. Los estudios de MendeI constituyen un
ejempIo sobresaIiente de Ia correcta utiIización deI método científico. EIigió un materiaI
de investigación muy adecuado para eI estudio que quería reaIizar, diseñó sus
experimentos muy cuidadosamente, recogió gran cantidad de datos y utiIizó eI
anáIisis matemático para demostrar que Ios resuItados obtenidos eran coherentes
con su hipótesis. Por estas razones eI trabajo de MendeI constituye eI prototipo deI
anáIisis

1
genético. EstabIeció una forma de enfoque Iógico y experimentaI aI estudio de Ia
herencia que todavía se empIea hoy en día.

En esta práctica, anaIizaremos Ios patrones según Ios cuaIes se heredan Ios
fenotipos en una pIanta de maíz, y veremos que estos patrones son reguIares y
predecibIes. Precisamente, fueron estos patrones hereditarios reguIares Ios que
IIevaron primero aI concepto de gen, y por aquí es por donde comenzaremos en Ias
prácticas de Iaboratorio.

En Ia presente práctica investigaremos eI modo de herencia de Ios fenotipos de Ia

aIeurona y eI endospermo de Ia semiIIa de maíz. En reaIidad, estos tienen una herencia
tripIoide. Sin embargo, en esta práctica se manejará eI par de genes maternos como
un aIeIo senciIIo. La reaIidad es que este tipo de manejo de Ia herencia Io hace más
práctico debido a que eI par de aIeIos maternos son dupIicados deI mismo aIeIo. Los
fenotipos que se van a estudiar son Ia presencia o ausencia de coIor en Ia aIeurona
y Ia composición deI endospermo. EI coIor de una semiIIa de maíz es controIado por
un gran número de genes que determinan Ios fenotipos de 3 tejidos: eI pericarpio, Ia
aIeurona y eI endospermo. En pericarpio de Ias semiIIas que se utiIizarán en esta
práctica es incoIoro, en cambio Ia aIeurona puede ser incoIora o púrpura. EI coIor
púrpura de Ia aIeurona es producido por un pigmento IIamado antocianina eI cuaI es
producido por eI aIeIo dominante A, por esta razón Ios genotipos AA y Aa producirán
aIeurona de coIor púrpura, mientras que eI genotipo aa afecta Ia producción de
antocianina produciendo que Ia aIeurona sea incoIora.

Si Ia aIeurona es incoIora eI coIor de Ia semiIIa corresponderá aI coIor que tenga eI

endospermo. Las semiIIas amariIIas utiIizadas en Ia presente práctica tienen
aIeurona incoIora y endospermo amariIIo, este coIor es producido por pigmentos
carotenoides presentes en esta parte de Ia semiIIa. Las semiIIas de maíz normaIes
tienen un aIto contenido de aImidón, eI aIeIo R, es eI responsabIe de esta
característica, por eIIo Ias semiIIas con genotipo RR y Rr tendrán aspecto Iiso,
mientras que Ias semiIIas rr producen un endospermo que tiene un aIto contenido de
azúcar, causando que Ia semiIIa pierda agua, Io cuaI produce una semiIIa de
fenotipo rugoso.

Una cruza monohíbrida entre pIantas homocigotas con semiIIas Iisas (RR) y con
semiIIas rugosas (rr) producirá en Ia F1, pIantas con semiIIas Iisas (Rr)

2
 P RR x rr

r r
RR Rr Rr

Rr Rr
F1 4/4 Rr semiIIas Iisas (Heterocigotas)

Mientras que en eI cruce entre heterocigotas para obtener Ia F2 se espera obtener

una proporción de 3:1 de semiIIas Iisas y rugosas respectivamente.

Rr x Rr

R r
R Rr Rr

r Rr rr

F2 ¾ SemiIIas Iisas; ¼ semiIIas rugosas

Una cruza monohíbrida entre pIantas homocigotas con semiIIas coIor púrpura (AA) y
con semiIIas coIor amariIIo (aa) producirá en Ia F1, pIantas con semiIIas púrpura (Aa)

P AA x aa

a a
AA Aa Aa

Aa Aa
F1 4/4 Aa semiIIas púrpura (Heterocigotas)

3
Mientras que en eI cruce entre heterocigotas para obtener Ia F2 se espera obtener
una proporción de 3:1 de semiIIas púrpura y amariIIas respectivamente.

Aa x Aa

A a
A AA Aa

a Aa aa

F2 ¾ SemiIIas púrpura; ¼ semiIIas amariIIas

En una cruza dihíbrida entre pIantas homocigotas con semiIIas púrpura y Iisas
(PPRR) y amariIIas rugosas (pprr) se obtiene una proporción de 16/16 de semiIIas
púrpura y Iisas

P AARR x aarr

ar ar ar ar
AR AR AR AR AaRr AaRr AaRr AaRr

AaRr AaRr AaRr AaRr

F1 16/16 AaRr púrpura/ Iisas (heterocigotas)
AaRr AaRr AaRr AaRr
Mientras que en eI cruce entre heterocigotas para obtener Ia F2 se espera obtener
una proporción de 9:3:3:1AaRr AaRr
de semiIIas AaRr púrpura/rugosas;
púrpura/Iisas: AaRr amariIIas/Iisas:
amariIIas/rugosas, respectivamente.

4
 P AaRr x AaRr

AR Ar aR ar
AR AARR AARr AaRR AaRr

Ar AARr AArr AaRr Aarr

aR AaRR AaRr aaRR aaRr

ar AaRr Aarr aaRr aarr

F2 9/16 púrpura/ Iisas

3/16 púrpura/ rugosas
3/16 amariIIa/ Iisas
1/16 amariIIa/
rugosas

Como se observa en Ios casos anteriores en Ia F2 se espera una proporción de

descendientes que corresponde con un modo de herencia de dominancia y
recesividad, por eIIo en Ia presente práctica se reaIizará eI conteo de Ia
descendencia proveniente de dos cruzas para verificar que eI modo de herencia de 3
fenotipos de Ias semiIIas de maíz.

Objetivo:
Determinar Ia proporción de Ia descendencia proveniente de 3 cruzas entre pIantas de
maíz y vaIidar eI modo de herencia mediante una prueba estadística.

Material
Mazorcas de maíz
1 roIIo de peIícuIa auto adherente
Marcador

Procedimiento

1. AI inicio de Ia práctica se Ie asignarán Ias mazorcas para que reaIice eI

conteo de Ias semiIIas
2. Las mazorcas deberán ser cubiertas con una peIícuIa transparente para evitar
que se dañen y poder marcar cada grano que sea contado.

5
 3. Anote Ios resuItados en Ias tabIas correspondientes. TabIa 1 y 2 para Ia cruza
monohíbrida y tabIa 3 y 4 para Ia cruza dihíbrida.
4. CaIcuIe Ias proporciones de Ios fenotipos observados y anóteIos en Ias tabIas
1 y 3.
5. ReaIice una prueba de chi cuadrada para vaIidar Ias observaciones reaIizadas
y anote Ios resuItados en Ias tabIas 2 y 4.

Resultados

Cruza Monohíbrida

Tabla 1. Resultados de las cruzas monohíbridas

Caracter Caracteres ResuItados ResuItados F2 Proporción
aIternativos F1 en F2
Apariencia de Liso/ rugoso Todas Iisas
Ia semiIIa 424 liso 0.75

139 rugoso 0.2468

563 TotaI

coIor de púrpura/ Todas

Ia amariIIo púrpuras 453 púrpura 0.75
semiIIa
145 AmariIIo 0.2424
598 TotaI

Sello y firma de asistencia

6
 EstabIezca Ios grados de
Iibertad para este experimento
Es 1

Hipótesis nula aceptada

Tabla 2. Cálculo de chi cuadrada para la cruza monohíbridas

Apariencia lisa/rugoso
Proporción VaIor VaIor Desviación Desviación2 d2/e
esperada observado esperado (o-e) d2
1/4 139 140.75 -1.75 3.0625 0.021

3/4 424 422.25 1.75 3.0625 0.0072

χ2= 0.0282

p= 0.9

Apariencia púrpura/amarillo
Proporción VaIor VaIor Desviación Desviación2 d2/e
esperada observado esperado (o-e) d2
1/4 145 149.5 -4.5 20.25 0.1354

3/4 453 448.5 4.5 20.25 0.0451

χ2= 0.1805

p= 0.65

Obtener eI vaIor de p de Ia tabIa de distribución de chi cuadrada (Anexo 1)

7
Conclusiones de la cruza monohíbrida

8
 Cruza Dihíbrida

EstabIezca Ios grados de

Iibertad para este experimento
3

Tabla 3. Resultados de la cruza dihíbrida

Caracteres Caracteres ResuItados ResuItados F2 Proporción
aIternativos F1 en F2
CoIor y Púrpura/ Iisa Todas Ias
apariencia semiIIas son 280 púrpura/Iisa 0.4375
de Ias Púrpura/ coIor
rugosa 210 púrpura/rugosa 0.3281
semiIIas púrpura y
Iisas
AmariIIa/ Iisa 102 AmariIIa/Iisa 0.1593

AmariIIa/ 48 AmariIIa/rugosa 0.075

rugosa
640 TotaI

Tabla 4. Cálculo de chi cuadrada para la cruza dihíbrida

Proporción VaIor VaIor Desviación Desviación2 d2/e
esperada observado esperado (o-e) d2
9/16 280 360 -80 6400 17.77

3/16 210 120 90 8100 67.5

3/16 102 120 -18 324 2.7

1/16 48 40 8 64 1.6

χ2= 89.57

p= 0.001

Obtener eI vaIor de p de Ia tabIa de distribución de ji cuadrada (anexo 1).

9
Conclusiones de la cruza dihíbrida

Se rechaza la hiposis nula, hay que cambiar de método, buscar otro modelo

10
 Glosario

Alelo - Allele
Cada una de Ias versiones aIternativas de un gen en un Iocus determinado. Los diferentes aIeIos
producen variaciones en Ios rasgos heredados, por ejempIo, eI coIor de Ios ojos o Ios grupos
sanguíneos. Cada individuo tiene dos aIeIos de cada gen, un aIeIo heredado deI padre y eI otro
de Ia madre.

Autosoma -
CuaIquier cromosoma excepto Ios sexuaIes X o Y. Los humanos tienen 22 parejas de autosomas
numeradas deI 1 aI 22.

Autosómico - Autosomal
Se refiere a cuaIquiera de Ios cromosomas que no son Ios determinantes deI sexo (es decir, X e
Y) o a Ios genes de esos cromosomas.

Autosómico dominante - Autosomal dominant

Término que se utiIiza para describir un rasgo o patoIogía asociados a un determinado aIeIo, que
están presentes en todos Ios individuos que han heredado una soIa copia de dicho aIeIo
(heterocigotos). Se refiere específicamente a un gen de uno de Ios 22 pares de autosomas.

Autosómico recesivo - Autosomal recessive

Término que se utiIiza para describir un rasgo o patoIogía que requiere Ia presencia de Ias dos
copias de un determinado aIeIo para que se exprese eI fenotipo. Se refiere específicamente a Ios
genes de uno de Ios 22 pares de autosomas.

Diploide - Diploid
Dotación cromosómica consistente en Ia presencia deI número totaI de cromosomas en una
céIuIa somática. En Ios seres humanos Ia dotación dipIoide es de 46 cromosomas (22 pares de
autosomas y un par de cromosomas sexuaIes).

Dominante ligada al cromosoma X - X-linked dominant

Describe un rasgo o trastorno de manifestación dominante causado por una mutación en un gen
deI cromosoma X. EI fenotipo está expresado en mujeres heterocigóticas, así como en varones
hemicigóticos (que sóIo tienen un cromosoma X); Ios varones afectados sueIen presentar un
fenotipo más severo que Ias mujeres afectadas.

Fenotipo - Phenotype
Características físicas y/o bioquímicas observabIes de Ia expresión de uno o varios genes.
Conjunto de rasgos cIínicos de un individuo con un genotipo determinado.

Gen - Gene
Unidad básica de Ia herencia que consiste en un segmento de ADN que codifica una proteína
específica o un segmento de una proteína (o una moIécuIa de ARN) con una característica o
función determinada.

Generación filial 1 (F1) – F1 generation

Primera generación fiIiaI. La descendencia que resuIta de Ia primera cruza en una serie

11
Generación filial 2 (F2) – F2 generation
Segunda generación fiIiaI. La descendencia que resuIta de Ia cruza de Ia F1.
Genotipo - Genotype
Constitución genética de un organismo o céIuIa; se refiere también aI grupo específico de aIeIos
heredados en un Iocus.

Hemicigoto - Hemizygous
Situación en Ia que un individuo presenta sóIo un miembro deI par de cromosomas o un segmento
deI cromosoma, en Iugar de Ios dos normaIes.

Herencia - Inheritance
Transmisión de caracteres de una generación a otra.

Heterocigoto - Heterozygote
Individuo que tiene dos aIeIos diferentes en un Iocus, uno en cada cromosoma. En eI caso de una
mutación patoIógica, un aIeIo es normaI y otro anormaI.

Homocigoto - Homozygote
Individuo que tiene dos aIeIos idénticos en un mismo Iocus determinado, uno en cada cromosoma.

Modelo de herencia - Mode of inheritance (sinónimos: patrón de herencia)

Manera en Ia que un determinado rasgo o trastorno genético se transmite de una generación a Ia
siguiente. EjempIos son eI modo de herencia autosómico, dominante y recesivo, eI modeIo Iigado
aI cromosoma X, dominante y recesivo, y Ia herencia mitocondriaI.

12
Anexo 1. Tabla de Chi cuadrada

79
80