Determinación de nitrógeno y proteína por el método Kjeldahl

La proteína es el nutriente mas importante en la dieta en una operación comercial: su

adecuada evaluación nos ayuda a controlar la cantidad de insumos proteicos que están
siendo adquiridos en un alimento. Su análisis se realiza mediante el método de Kjeldahl,
mismo que ayuda a determinar el contenido de nitrógeno total de la muestra, después de
titularse con acido sulfúrico en presencia de un catalizador de mercurio o silicio.
(Novoa, Palacias, & Leon, 2022).

El método Kjeldahl consta de tres etapas bien definidas según (Gomez, 2020)

1. Digestión: se va a tratar la muestra con ácido sulfúrico, para lo cual se va utilizar

balón digestión Kjeldahl.
2. neutralización y destilación: para esta etapa se va a utilizar el equipo de
destilación de Kjeldahl. En el cual se neutraliza para recolecta el amoniaco y la
solución de ácido bórico.
3. Titulación: La titulación del acido bórico con un ácido concentrado del
indicador, de esta manera se calcula la concentración de nitrógeno, para luego
expresar como porcentaje proteína

Método simple propuesto por (Herrero et al, 2020)

Reactivos

 Ácido sulfúrico 95-98 %

 Disolución NaOH 35%
 Indicador acido base (rojo de metileno)
 Catalizador Kjeldahl K2SO4 sulfato de potasio Y CuSO4 Sulfato de Cobre o
sulfato cúprico
 Disolución ácido bórico al 4%.
 Disolución acido coloridito 0.1 N

Materiales y reactivos

 Unidad de digestión y destilación Kjeldahl.

 Matraces Kjeldahl de 500ml.
 Matraces Erlenmeyer de 250 ml.
 Perlas de ebullición.
Procedimiento

1. Pesar con precisión de miligramos 1g de muestra y colóquelo en el matraz

Kjeldahl; agregar perlas de vidrio y una pastilla de catalizador, agregar 10ml de
ácido sulfúrico concentrado.
2. Se coloca el tubo en el digestor y destilación Kjeldahl para luengo destilar a
400ºc
3. Se deja enfriar la muestra a temperatura ambiente.
4. Se dosifica 50ml de agua destilada en cada tubo de muestra dejando caer el agua
por las paredes del tuvo.
5. Se introduce 25 ml de acido bórico en un matraz Erlenmeyer de 250 ml y 2 y 3
gotas de indicador.
6. Se agrega a una perla de ebullición y 40 ml de solución de hidróxido de sodio al
35 % y se procede con la destilación.
7. Se hace la valoración con ácido clorhídrico 0.1 N
8. Por último, se hacer el cálculo aplicando la siguiente ecuación:

1.4 ( V 1−V 0 ) N
N %=
P
Donde:
 P(g)=peso de muestra.
 V1(ml)=Volumen del HCL consumido en la valoración (ml)
 Vo(ml)=volumen de HCL consumido en la valoración de un blanco (ml).
 N=normalidad de HCL

Bibliografía
Gomez, J. (2020). Determinacion de proteina total en alimentos por metodo de kjeldahl.

Hemero. (2020). determinacion de proteinas en pasta por le metodo Kjedahl.

Novoa, O. M., Palacias, M. C., & Leon, E. (2022). MANUAL DE TECNICAS PARA LABORATORIO
DE NUTRICION DE PECES CRUDOS.