Se denomina ADN recombinante al que se ha formado al intercalar un segmento de ADN extraño en un ADN

receptor. La tecnología del ADN recombinante nos permite obtener fragmentos de ADN en cantidades
ilimitadas, que llevara además el gen o los genes que se desee. Por lo tanto, en la tecnología del ADN
recombinante podemos diferenciar cuatro etapas:
1. Corte especifico del ADN mediante enzimas de restricción:

Cada enzima de restricción reconoce una secuencia específica de nucleótidos y corta en ese punto cada una de las
cadenas de ADN.
» Los extremos libres que quedan se llaman extremos pegajosos, porque pueden unirse a otros fragmentos de ADN que
hayan sido cortados por la misma enzima de restricción.

2. Vector de transferencia

Los vectores de transferencia son pequeñas moléculas de ADN, que tienen capacidad para autorreplicarse dentro de las
células hospedadoras. Se utilizan con frecuencia dos tipos de vectores de clonación: plásmidos y virus.

3. ADN ligasas

⚫ La unión del ADN que contiene el gen que se desea clonar con el vector de transferencia, se realiza por medio de
otras enzimas, denominadas ADN-ligasas, que unen ambos trozos de ADN. El resultado es una molécula de ADN
recombinante, ya que contiene fragmentos de ADN de distinta procedencia.

4. Inserción del vector con el ADN recombinante en la célula hospedadora

E siguiente paso será introducir el vector de clonación que contiene el gen que se quiere clonar en la célula
hospedadora, para que ésta, al multiplicarse, origine un clon celular que lleve el gen concreto. Existen varios métodos
que dependerán del tipo de célula fundamentalmente. En bacterias (células procariotas), mediante estos procesos:

tratamientos físicos y químicos

⚫ Transformación. Ocurre espontáneamente en ciertos tipos de bacterias y se consigue artificialmente sometiendo a la
célula bacteriana a

5. Selección de las bacterias transformadas

⚫ Transducción. Este método consiste en introducir el ADN en la célula hospedadora mediante un virus.
Los plásmidos llevan además del gen de interés un gen por ejemplo de resistencia a un antibiótico (por ejemplo, un gen
de resistencia a la ampicilina), por lo que las bacterias que se consideran transformadas, serán aquellas que sobrevivan
en un medio de cultivo que contenga ese antibiótico.

6. Multiplicación del organismo transgénico

Una vez que se ha conseguido la población de bacterias transformadas, el siguiente paso es poner a las bacterias en un
medio de cultivo apropiado para que se multipliquen. A la vez que se reproducen las bacterias lo hace también el
plásmido con el gen que interesa, el resultado es que se obtiene un clon de células que llevan todo ese gen de interés.