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• Biología•

ADN
Recombinante

Ing. Bioquímica T2L


Bueno Olivas Dayanna Maria 21440267
Córdoba Orduño Kattia Marbella 21440647.
Orduño Montero María José
Soto Torres Vanessa
¿Podemos alterar el
ADN?

Puede que pienses que el ADN es


estable y que no se puede
cambiar. En gran parte puede que
estés en lo cierto. Sin embargo,
hay tecnologías nuevas que nos
permiten alterar el ADN de los
humanos y otros
organismos.

¿Qué es el ADN
recombinante?
El ADN recombinante es una molécula como resultado de la unión
artificial de dos fragmentos de ADN. Así, la tecnología de ADN
recombinante consiste en un conjunto de técnicas que permiten
aislar un gen de un organismo, para su posterior manipulación e
inserción en otro diferente. Cuando se introduce un ADN
recombinado en algún organismo, ocurre una modificación genética
que se traduce en un cambio de rasgos ya existentes o en la
expresión de rasgos nuevos.
Es posible poner un gen humano en un ADN bacterial. La
tecnología de ADN recombinante es útil para la clonación
genética y para identificar la función de un gen.

Esta técnica constituye la base de biotecnología y la


ingeniería genética y tiene múltiples aplicaciones que van
desde la agricultura a la biomedicina. Por ejemplo, permite el
estudio de la expresión de un gen determinado, la obtención
de especies vegetales que muestren resistencia a ciertas
plagas o la obtención de insulina humana a partir de fuentes
animales.
Proceso de recombinación del ADN
Las etapas de la obtención de ADN son las siguientes:

1 Aislamiento y purificación
del gen de interés

2 Formación del ADN


recombinante

3
Introducción del ADNr en
la célula anfitriona

4 Cultivo de las células


anfitrionas

5
Detección y selección de células
que contienen el ADN
recombinante
1- Aislamiento y purificación del gen de interés
En este primer paso, se trata de aislar el gen a recombinar ( por ejemplo el gen
de la insulina humana o de un factor de crecimiento, etc.)

• Obtención de ADN celular: Para ello es necesario el ADN liberar el ADN de las


células, que deben ser rotas mediante lisis celular. Al romperse las células liberan
su material genético (ADN) junto con otras moléculas como proteínas o RNA,
por lo que es necesario aislar y purificar el ADN celular.

• Obtención del gen aislado: Una vez parificado y concentrado el ADN celular es


necesario, cortar el ADN mediante enzimas de restricción (enzimas muy
específicos que capaces de romper la secuencia de ADN en puntos
determinados). La acción de enzimas de restricción adecuados liberan el gen que
puede ser aislado mediante técnicas de centrifugación o cromatografía.
2- Formación del ADN recombinante
El vector es el material genético que incorporará el gen aislado y lo
transportará al interior de la célula huésped.
El vector suele ser un plásmido (ADN circular propio de procariotas), un
virus o un cromosoma creado de forma artificial, que debe cumplir las
siguientes características:

• Debe ser fácil de aislar y de pequeño tamaño.

• Debe contener secuencias que sean reconocidas por los factores de introducir
el gen deseado.

• Tiene que poder introducirse en la célula huésped para replicarse en su


interior de forma independiente al ADN celular.

• Debe contener un marcador genético que permita identificarlo y aislarlo con


facilidad, como por ejemplo un gen de resistencia a antibióticos.
Las etapas de esta segunda fase del proceso del
ADN recombinante son dos:

1 2
Cortar el vector:  Insertar el gen:
Los extremos libres provocados por la acción de los
Utilizando los mismos enzimas de enzimas de restricción son el punto donde se insertará
restricción utilizados para obtener el el gen previamente aislado en la primera etapa de
gen que se quiere insertar, se realiza un aislamiento y purificación del gen. La unión entre el
corte en el ADN del vector dejando dos vector y el gen (que una vez introducido en el vector
extremos del ADN libres. recibe el nombre de inserto), se produce por acción de
la enzima ligasa que cataliza la unión covalente entre
el vector y el inserto dando lugar a la molécula de
ADN recombinante.
3- Introducción del ADNr en la célula anfitriona

Este paso puede realizarse por distintas técnicas como la de


alterar por medios físico-químicos la permeabilidad de la
membrana de la célula huésped para que permita el paso del
ADNr, la microinyección del ADNr mediante una micropipeta, la
introducción del ADNr en liposomas capaces de fusionarse con
la membrana celular para liberar su contenido en el citoplasma
de la célula huésped.

Las células anfitrionas deben ser células que reproduzcan de


forma muy rápida, y se utilizan o bien células bacterianas, de
levaduras o bien células cancerosas.
4- Cultivo de las células
anfitrionas

Una vez introducido el ADNr en las células


anfitrionas estas se cultivan induciendo su
división para obtener un gran número de
células que contengan el ADNr . Las células
se cultivan en placas de Petri que permiten
aislar colonias que posteriormente se cultivan
en medios líquidos obteniendo de esta forma
una gran cantidad de clones (células
genéticamente idénticas ).
5- Detección y selección de células que contienen el ADN
recombinante

En esta última etapa se trata


de identificar las células con
ADNr. Para la identificación de
dichas células se utilizan marcadores
que permiten detectar la presencia
del ADNr. Estos marcadores
genéticos pueden ser diversos, un
ejemplo sería el cultivo de las
células anfitrionas en presencia de
un antibiótico. Cuando ha sido
incorporado previamente al ADNr el
gen de resistencia al antibiótico
presente en el cultivo.
Plásmidos

Las bacterias tienen pequeños anillos de ADN en el citoplasma,


llamados plásmidos ( Figura siguiente ). Cuando se le introduce ADN ajeno a
una bacteria, se usan los plásmidos como vector. También se pueden usan virus
 como vector.
• Historia•
En la década de 1950 se descubrió que los genes no eran nada más y nada
menos que cadenas de nucleótidos. Un descubrimiento que parece tan
sencillo desencadenó, sin embargo, el nacimiento de una nueva era: la de
la tecnología del ADN recombinante.
En 1970, Hamilton Smith y Daniel Nathans logran el Aislamiento de la
primera restrictasa, que es una enzima capaz de reconocer y cortar el
ADN en una secuencia específica.
La invención de la tecnología del ADN recombinante es el resultado de una
serie de descubrimientos importantes realizados durante la década de los
70’s y 80´s.
Su importancia radica en el hecho de que tal hallazgo impulso nuevas
metodologías de investigación que ampliaron los horizontes de estudio
de disciplinas como: la medicina, bioquímica, fisiología, genética
molecular, fisicoquímica y biotecnología, entre otras áreas no menos
importantes y más específicas como la fertilización de óvulos “in vitro”,
la prevención y el tratamiento del cáncer y el diagnóstico prenatal, por
citar algunas. Este trabajo les valió el Premio Nobel de Medicina en
1978.
• Historia•
En 1973 la primera molécula de ADN recombinante fue creada por Paul
Berg.
Para aquella época, los biólogos moleculares habían aprendido a alterar
genes individuales, cortar y pegar pedazos de ADN de diferentes
organismos y moverlos de uno a otro.
Otros pioneros de esta tecnología fueron Stanley Cohen, un genetista
estadounidense, y Herbert Boyer, un bioquímico de la misma
nacionalidad . Cohen estaba interesado en aprender cómo los genes de
plásmidos otorgan resistencia a las bacterias y Boyer trabajaba con
enzimas de restricción, por lo que decidieron trabajar juntos en la
combinación de dos plásmidos resistentes a antibióticos diferentes para
crear una bacteria resistente a ambos.
• Riesgos

A pesar de todas las ventajas y los avances que ha permitido la tecnología del ADN
recombinante, ésta no está exenta de riesgos en salud asociados. Los múltiples
peligros que podría suponer dicha tecnología a largo tiempo aún no están
conocidos del todo. Este hecho ha llevado a varios debates entre los investigadores
que integran la comunidad científica y han originado diversas propuestas de
autorregulación por cuestiones éticas.

. La alteración del ADN de células somáticas y germinales trataría enfermedades


como anemia falciforme, hepatitis, inmunodeficiencias, infertilidad, cánceres,
fibrosis quística, enfermedad de Huntington, entre otras. Sin embargo algunos
genes tienen funciones múltiples, de tal manera que modificar un gen causante de
patología podría provocar consecuencias adversas. Por ejemplo, la derrota del gen
CCR5 reduce las posibilidades de infección por el VIH, pero hace que la persona
se vuelva más susceptible a contraer el virus de la enfermedad del Nilo Occidental .
• Aplicaciones
¿Qué aplicaciones prácticas tiene el ADN
recombinante?
El ADN recombinante tiene aplicación en
varios campos como en la industria En la Industria farmacéutica
farmacéutica, la industria alimentaria, la El comienzo de la técnica de ADN recombinante en el ámbito de la Industria
farmacéutica comenzó en los años 80 con los estudios realizados con la bacteria
industria agrícola o en la investigación
Escherichia Coli, cuyo ADN fue modificado genéticamente, dando lugar a la insulina
biosanitaria, entre otros. humana (denominada comercialmente Humulin). Con el tiempo, esta insulina ADN
recombinante demostró ser más eficiente y segura que la insulina que se obtenía del
páncreas de vacas y cerdos.
Otra aplicación interesante del ADN recombinante son las vacunas. La última
generación de vacunas biotecnológicas son las conocidas como vacunas ADN (también
llamadas de ADN desnudo). La vacuna de ADN consiste en la inyección directa de
ADN a través de un plásmido bacteriano. Este ADN codifica una proteína viral
antigénica de interés que inducirá la respuesta inmunitaria.
Finalmente, otro ejemplo de la aplicación de la ingeniería genética en la Industria
farmacéutica es la síntesis de nuevos antibióticos.
• Aplicaciones
Industria agrícola
En el campo de la agricultura, la aplicación del ADN
recombinante ha permitido obtener plantas
transformadas más productivas, resistentes a Investigación biosanitaria
herbicidas, o a los virus que destruyen los cultivos y a La Tecnología del ADN recombinante es ampliamente
sobrevivir a condiciones climáticas extremas o con utilizada en el ámbito de la investigación biomédica.
mayor producción de vitaminas (ejemplo del arroz). En este sentido, la ingeniería genética  ha
 A estos productos se les llaman permitido identificar genes implicados en muchas
organismos genéticamente modificados o enfermedades, lo que ha permitido su detección y
transgénicos. tratamiento. Para dar algunos ejemplos, el ADN
recombinante se ha utilizado como técnica
diagnóstica en el virus del VIH. Actualmente, se está
Industria alimentaria investigando también con esta tecnología para el
Actualmente, cada vez más se encuentran en el tratamiento del cáncer.
mercado alimentos desarrollados a partir de
organismos genéticamente alterados. En el campo de
la Industria alimentaria, la tecnología del ADN
recombinante ha logrado reducir costes, aumentar
la producción y diseñar nuevos productos.
Balada, F. (14 de diciembre de 2020). ADN recombinante: definición y proceso. Obtenido de
unprofesor.com:
https://www.unprofesor.com/ciencias-naturales/adn-recombinante-definicion-y-proceso-4535.ht
ml
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https://flexbooks.ck12.org/cbook/ck-12-conceptos-de-ciencias-de-la-vida-grados-6-8-en-
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https://e1.portalacademico.cch.unam.mx/alumno/biologia1/unidad3/ingenieriagenetica
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Fikri-Benbrahim, N. (2019). Tecnología del ADN recombinante: aplicaciones y


riesgos. Canal Biosanitario. Recuperado 1 de mayo de 2022, de
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Furtado, R. N. (2019). Edição genética: riscos e benefícios da modificação do DNA


humano. Revista Bioética, 27(2), 227.
https://www.scielo.br/j/bioet/a/jFptVvKR7RJHWXwmsKpZFrh/?format=pdf&lang=es
• Results analysis

About DNA Adenine


Venus is the second planet from the Jupiter is the biggest
planet
Sun
Thymine
Adenine Thymine Mars is a very cold
planet

Guanine Cytosine Guanine


Earth is where we all
Thymine Adenine live on

Cytosine
Cytosine Guanine Ceres is in the
asteroid belt
• Conclusions

01 02
Signs Symptoms
Despite being red, Mars is Jupiter is a gas giant and
actually a cold place the biggest planet
Gracias por su
atencion!
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• Alternative resources
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of this template

● Researcher conversing laboratory


● Doctor looking blood sample
Fonts & colors used

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