TAREA DE AMINOACIDOS

1. Estime el punto isoeléctrico de los siguientes aminoácidos; Leu, Glu, His, Arg y Cis

Leucina

pH/aa -NH2 -COOH TOTAL

9.6 2.36
0-2.36 + 0 +1
2.36-9.6 + - 0
9.6-14 0 - -1

Acido Glutámico
pH/aa -NH2 -COOH -R TOTAL
9.67 2.19 4.25
0-2.19 + 0 0 +1
2.19-4.25 + - 0 0
4.25-9.67 + - - -1
9.67-14 0 - - -2

Histidina
pH/aa -NH2 -COOH -R TOTAL
9.17 1.82 6
0-1.82 + 0 + +2
1.82-6 + - + +1
6-9.17 + - 0 0
9.17-14 0 - 0 -1

Arginina
pH/aa -NH2 -COOH -R TOTAL
9.04 2.17 12.48
0-2.17 + 0 + +2
2.17-9.04 + - + +1
9.04-12.48 0 - + 0
12.48-14 0 - 0 -1

Cisteína
pH/aa -NH2 -COOH -R TOTAL
10.28 1.96 8.18
0-1.96 + 0 0 +1
1.96-8.18 + - 0 0
8.18-10.28 + - - +1
10.28-14 0 - - -2

2.- ¿En cuántas fórmulas eléctricas puede presentarse la Lisina? Escriba dichas fórmulas
e indique cual es la isoeléctrica.
 3.- Haga la escala de ionización de la lisina y estime en ella el PI. ¿En qué fórmulas
eléctricas estará lisina en el plasma humano y cuál es la predominante?

pH del plasma sanguíneo=7.4 APROX

Ya que el pH del medio es menor que el pI de la Lis, esta toma sus fórmulas positivas (I y II), siendo la II la
más abundante, pues al tener carga neta +1 es la que tiene el pH más cercano a7.4

4.- Determine la carga neta promedio del aminoácido arginina a los valores de pH 2.0;
7.4, 10.75 y 13

Arginina

Fórmula pH/aa -NH2 -COOH -R TOTAL

eléctrica 9.04 2.17 12.48
I 0-2.17 + 0 + +2
II 2.17-9.04 + - + +1
III 9.04-12.48 0 - + 0
IV 12.48-14 0 - 0 -1
5.- ¿A qué aminoácido podría corresponder la siguiente curva de titulación?
6.- Escriba la fórmula desarrollada del dipéptido glicil-histidina. Utilizando la escala de ionización estime su PI
con aproximación. Puede utilizar los valores de pK para los aminoácidos aislados, no obstante que cuando los
aminoácidos se unen para formar péptidos y proteínas, los valores de pK de sus grupos ionizables, se ven
afectados

❖ APROX Dipéptido glicil-histidina

pH/aa Gli-NH2 His-COOH His-R TOTAL

9.6 1.82 6
0-1.82 + 0 + +2
1.82-6 + - + +1
6-9.6 + - 0 0
9.6-14 0 - 0 -1

Cuántos miliequivalentes de HCl serán necesarios para titular 35 milimoles de histidina que
se encuentran en su forma isoeléctrica a su forma completamente protonada

Fórmula pH/aa -NH2 -COOH -R TOTAL

eléctrica 9.17 1.82 6
I 0-1.82 + 0 + +2
II 1.82-6 + - + +1
III 6-9.17 + - 0 0
IV 9.17-14 0 - 0 -1
7.- ¿Qué aminoácidos serían buenos tampones a los siguientes valores de pH: 2,0; 4,0;
6,0 y 12?

A pH=2 → Prolina (pk -COOH=1.99) A pH=4 → Ácido glutámico (pk -R=4.25)

A pH=6 → Histidina (pk -R=6) A pH=12 → Arginina (pk -R=12.48)

8.- A 50 milimoles de alanina que está en su PI se le añade 25 miliequivalentes de HCl.

Estimar el pH de la solución resultante

9.- En una mixtura se encuentran los aminoácidos: glicina, aspártico, arginina e

histidina. Si se les separa mediante la electroforesis a pH 7.6, indicar:
Glicina----pi=5.97---carga –
Ac. Aspártico----pi=2.77---carga –

Arginina—pi=10.77---carga +

Histidina---pi=7.59----carga 0

Qué aminoácidos migran al ánodo y cuales al cátodo

ÁNODO CÁTODO NO SE MUEVE

Glicina y aspártico Arginina Histidina
Cuál migrará más rápidamente al ánodo

Aspártico

Cuál quedará más cerca del punto de aplicación

Histidina

10.-Teniendo en cuenta las condiciones señaladas en este capítulo sobre la

cromatografía por intercambio iónico, de respuesta a las siguientes preguntas:
a) ¿Por qué el ácido aspártico eluye primero de la columna, incluso antes del ácido
glutámico?

Porque el ácido aspártico tiene el pI más bajo de todos los aa (incluso más bajo que el ácido
aspártico), por ende, tiene tendencia a tener una carga negativa y por lo tanto eluye primero
ya que pasa por la fase estacionaria negativa de la columna sin enlazarse.

b) ¿Por qué los aminoácidos ramificados eluyen posteriormente a los otros

aminoácidos del grupo 1?

Ambos tipos de aa serían débilmente básicos (+), pero los aa ramificados (Leu, Ile, Val) tienen
una mayor densidad (cantidad) de carga, por lo que la fuerza de retención es mayor y su
elusión más lenta.

c) ¿Por qué la cisteína eluye antes que los aminoácidos ramificados?

Porque, al tener un pI menor, tiene más probabilidades de adquirir una carga negativa
(grupo sulfhidrilo) y pasar por la columna más rápidamente.

d) Explicar por qué la tirosina y fenilalanina eluyen después de los aminoácidos

ramificados (valina, leucina, isoleucina)

Porque, al ser aa aromáticos que poseen un grupo polar en su cadena lateral, son
relativamente (+), a comparación de los aa ramificados.

e) ¿Por qué arginina es el último aminoácido en eluir de la columna?

Porque es el aa con mayor pI de todos, es decir adopta una carga positiva (mayor cantidad
de grupos amino) y, al pasar por la fase estacionaria es retenida por las cargas negativas.

11.- Si se mezcla 20 aminoacidos componentes de las proteinas, se aplica sobre una resina de
intercambio catónico, a pH alto (mayor de 11), cuál será el orden de elución de los aminoácidos
al tratar la resina con resoluciones de pH decreciente?

La elución de los aminoácidos en una resina de intercambio catónico a pH alto será en orden decreciente de la
afinidad del aminoácido por la resina. Esto se debe a que a un pH alto, los aminoácidos estarán principalmente
en forma de iones cationes, que son altamente afines por la resina. Al disminuir el pH, los aminoácidos se
ionizan menos y son menos afines por la resina, por lo tanto, se eluyen en orden decreciente de afinidad.