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Manual del

Laboratorio de Farmacología

Elaboró Revisó Autorizó


Nombre: Nombre: Nombre:

MCS. Hermelinda de la Cruz Durán

Puesto: Puesto: Puesto:

Profesor Lab. Farmacología

Firma: Firma: Firma:

Fecha: Fecha: Fecha:

Ene. 09 de 2019
Facultad de Ciencias Químicas e Ingeniería Plan de Estudios: 2014-2
Químico Farmacobiólogo Versión: 1.0

Manual del Laboratorio de Farmacología Semestre 2019-1

Contenido
Práctica No. 1 .............................................................................................................................................................5
Variabilidad Biológica .............................................................................................................................................5
Competencia .......................................................................................................................................................5
Fundamento Teórico ...........................................................................................................................................5
Proceso ...............................................................................................................................................................6
Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño ....................................................................................6
Cuestionario Complementario .............................................................................................................................6
Bibliografía ...........................................................................................................................................................7
Anexos .................................................................................................................................................................7
Práctica No. 2 .............................................................................................................................................................8
Vías de Administración de Medicamentos .............................................................................................................8
Competencia .......................................................................................................................................................8
Fundamento Teórico ...........................................................................................................................................8
Proceso ...............................................................................................................................................................8
Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño ....................................................................................9
Cuestionario Complementario ...........................................................................................................................10
Bibliografía .........................................................................................................................................................10
Anexos ...............................................................................................................................................................10
Anexo I: Esquema de las diferentes vías de administración parenterales. ......................................................11
Práctica No. 3 ...........................................................................................................................................................12
Fármacos Antihistamínicos...................................................................................................................................12
Competencia .....................................................................................................................................................12
Fundamento Teórico .........................................................................................................................................12
Proceso .............................................................................................................................................................12
Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño ..................................................................................14
Cuestionario Complementario ...........................................................................................................................14
Bibliografía .........................................................................................................................................................14
Anexos ...............................................................................................................................................................14

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Manual del Laboratorio de Farmacología Vigente a partir de 01 Febrero de 2019
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Práctica No. 4 ...........................................................................................................................................................15


Absorción de Fármacos ........................................................................................................................................15
Competencia .....................................................................................................................................................15
Fundamento Teórico .........................................................................................................................................15
Proceso .............................................................................................................................................................15
Mecanismos de evaluación y Evidencia de desempeño...................................................................................18
Cuestionario Complementario ...........................................................................................................................19
Bibliografía .........................................................................................................................................................20
Anexos ...............................................................................................................................................................20
Práctica No. 5 ...........................................................................................................................................................21
Distribución de Fármacos .....................................................................................................................................21
Competencia .....................................................................................................................................................21
Fundamento Teórico .........................................................................................................................................21
Proceso .............................................................................................................................................................22
Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño ..................................................................................24
Cuestionario Complementario ...........................................................................................................................25
Bibliografía .........................................................................................................................................................25
Anexos ...............................................................................................................................................................25
Práctica No. 6 ...........................................................................................................................................................26
Estimulación e Inhibición del Metabolismo Farmacológico ..................................................................................26
Competencia .....................................................................................................................................................26
Fundamento Teórico .........................................................................................................................................26
Proceso .............................................................................................................................................................26
Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño ..................................................................................27
Cuestionario Complementario ...........................................................................................................................27
Bibliografía .........................................................................................................................................................28
Anexos ...............................................................................................................................................................28
Práctica No. 7 ...........................................................................................................................................................29
Determinación de Dosis Efectiva al 50 (DE50) y Dosis Letal al 50 (DL50) ............................................................29
Objetivo .............................................................................................................................................................29
Fundamento Teórico .........................................................................................................................................29
Proceso .............................................................................................................................................................30

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Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño ..................................................................................30


Cuestionario Complementario ...........................................................................................................................31
Bibliografía .........................................................................................................................................................31
Anexos ...............................................................................................................................................................31
Práctica No. 8 ...........................................................................................................................................................32
Influencia del pH Urinario en la Excreción de Fármacos .....................................................................................32
Competencia .....................................................................................................................................................32
Fundamento Teórico .........................................................................................................................................32
Proceso .............................................................................................................................................................32
Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño ..................................................................................35
Cuestionario Complementario ...........................................................................................................................35
Bibliografía .........................................................................................................................................................36
Anexos ...............................................................................................................................................................36
Anexo I: Hoja de Registro .................................................................................................................................37
Anexo II: Carta de Consentimiento Informado ..................................................................................................38
Control de Cambios ..................................................................................................................................................40

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Práctica No. 1
Variabilidad Biológica

Competencia
Diferenciar los diferentes aspectos que pueden modificar el efecto de un fármaco, midiendo los cambios en la
temperatura corporal después de la administración de un medicamento, para considerar esta variabilidad inter- e
intraindividual en la interpretación de la respuesta farmacológica, con curiosidad científica, respeto al individuo y
al medio ambiente..

Fundamento Teórico
Los valores de las magnitudes biológicas no son constantes: varían en un mismo individuo y entre los individuos.
Este fenómeno, se conoce como variabilidad biológica. Esta variabilidad se divide en variabilidad fisiológica,
causada por las fluctuaciones metabólicas y otros procesos fisiológicos, variabilidad patológica, causada por las
enfermedades, y variabilidad iatrogénica, causada principalmente por los tratamientos farmacológicos. Es
importante subrayar que la variabilidad biológica es un fenómeno absolutamente independiente de la variabilidad
debida a los procedimientos de medida, conocida como variabilidad metrológica.
Las variaciones iatrogénicas están causadas, estrictamente, por medicamentos o actos terapéuticos o
diagnósticos. Sin embargo, no son los medicamentos los únicos xenobióticos que pueden provocar la variación
del valor de alguna magnitud biológica; los xenobióticos de uso más generalizado en nuestra sociedad —
cafeína, nicotina y etanol— y las drogas de abuso también pueden hacerlo.
Así pues, la biología y la práctica clínica indican que no hay dos sujetos iguales, la farmacología demuestra que
la misma dosis de fármaco provoca una intensidad de respuesta diferente en diferentes pacientes. Esta
diversidad, en parte a la farmacocinética (diferente absorción, metabolismo y excreción del fármaco) y a la
farmacodinámia (interacción fármaco-receptor), por causas del tipo genético, ambientales o del curso clínico de
las enfermedades (agudas, crónicas, etc.), hace que la medición de los fenómenos biológicos varíe a causa de
estos factores ingobernables o accidentales.
Los valores obtenidos serán diferentes, sin embargo cada valor se aproxima mas o menos a un valor medio, por
lo que puede decirse que ese conjunto de valores se distribuye en torno a la media (X). Cuando mayor sea el
número total de medidas, el valor de la media se acercara al valor verdadero del fenómeno de referencia y la
distribución de esas medidas será simétrica porque las variaciones positivas o negativas se equilibran
mutuamente. El valor verdadero lo es teóricamente en un conjunto infinitamente grande o universo, pero ante la
imposibilidad de obtener ese conjunto o universo, podemos obtener un valor cercano al verdadero si estudiamos
una parte de tal universo, o sea efectuar un número finito de medidas, experimentos u observaciones, que
constituyen lo que se llama una "muestra" colección de ensayo o tanteo.

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Proceso

Criterios de Inclusión y/o exclusión


a. Tomar el medicamento con al menos 200 ml de agua.
b. Sexo: pueden participar hombres o mujeres.
c. Edad, entre 18 y 35 años.
d. Peso ideal
e. Ayuno de al menos 2 horas previas a la toma del medicamento.
f. No estar enfermo
g. No estar tomando fármacos terapéuticos, sociales o de abuso.
h. No tener antecedentes de Reacciones Adversas a Medicamentos (RAM´s)
i. No ser alérgico.

Equipo, Instrumental, Material e Insumos

Termómetro oral 6
Aspirina Tabletas de 500 mg 6
Agua Potable 1 Lt

Procedimiento
1. Nombrar dos voluntarios por equipo, siguiendo los criterios de inclusión establecidos.
2. Determinar la temperatura corporal basal de cada individuo.
3. Administrar una dosis de aspirina de 500mg a cada uno y determinar la temperatura en los siguientes
intervalos de tiempo: 5, 10, 15, 20, 25, 30 y 60 minutos postadministración.
4. Concentrar en una tabla los resultados de cada equipo.
5. Con los datos de todo el grupo determinar las variables: media (X) y desviación estándar ( σ) a cada
intervalo de tiempo.
6. Hacer una gráfica con los resultados, con un margen de ± una desviación estándar.

Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño


1. Anota tus observaciones durante el experimento.
2. Entregar reporte por escrito con los resultados obtenidos.
3. Elaborar y entregar grafica con promedios ± desviación estándar, en papel milimétrico.
4. Elabora tus conclusiones con base en los resultados obtenidos

Cuestionario Complementario
1. Que es la desviación estándar.
2. Cuáles son los factores más comunes que interfieren en la respuesta de un fármaco.
3. Como puede interferir la variabilidad biológica en un régimen terapéutico con medicamentos.

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Bibliografía
Terrés-Speziale AM. Incertidumbre y variabilidad total en el laboratorio clínico. Rev Mex Patol Clin, Vol. 53, Núm.
4, pp 185-196 • Octubre - Diciembre, 2006.
http://www.qualitat.cc/sitebuildercontent/sitebuilderfiles/variabilidad_total.pdf

Anexos
N/A

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Práctica No. 2
Vías de Administración de Medicamentos

Competencia
Diferenciar las ventajas y desventajas entre vías de administración, poniendo en práctica las diferentes técnicas
de administración parenteral, para seleccionar la más adecuada a las condiciones del paciente, demostrando
compromiso y respeto al individuo y/o al paciente.

Fundamento Teórico
Existen diversos medios por los que el medicamento puede introducirse en el organismo. Es posible que un
mismo medicamento esté preparado para utilizar más de una vía, del mismo modo que existen fármacos
diseñados para acceder al organismo por un único camino. Existen varias vías de administración para los
medicamentos como la oral, sublingual, bucal, tópica, transdérmica, inhalación, instilación ocular, rectal, vaginal o
parenteral (subcutánea, intramuscular, intravenosa). Cada medicamento está preparado para ser administrado
por vía determinada y que ejerza su acción de la forma más conveniente. Para cada vía de administración
existen diferentes formas farmacéuticas. Por ejemplo, para la vía oral se preparan cápsulas, comprimidos,
comprimidos recubiertos, comprimidos efervescentes, comprimidos masticables, suspensiones, soluciones,
jarabes, elixires, etc.
La elección depende de diversas variables. Algunas son: el tipo de medicamento, es decir, sus particularidades.
La absorción del mismo: en qué lugar del organismo (estómago, duodeno, piel, etc.) conviene que se produzca y
a qué velocidad. El propio paciente; hay que tener en cuenta los condicionantes fisiológicos (como el estado de
su aparato digestivo, necesidad de una acción más o menos rápida, etc.) y condicionantes psicológicos (es
frecuente que a los niños les entre mejor un jarabe que una grageas).
Las razones pueden ser múltiples y van desde una simple imposibilidad para administrar por determinada vía
debido a solubilidad, distribución, biotransformación y excreción, que pueden provocar daño, que inclusive puede
llegar a ser fatal a nuestro paciente o animal de experimentación. La farmacológica experimental utiliza animales
de laboratorio y la aplicación de fármacos por diversas vías de administración a los mismos. Es conveniente por
lo tanto que el alumno se familiarice con dichas vías, por lo que a continuación se hará una evaluación de cada
una de ellas. El conocimiento de estos factores determina en todos los casos la vía de administración que
permite los mejores resultados. Teniendo en cuenta el concepto anterior, se llega a la conclusión de que: NO SE
PUEDE, NI SE DEBE UTILIZAR CUALQUIER VIA DE ADMINISTRACION.

Proceso

Equipo, Instrumental, Material e Insumos

Jeringas de 1 ml 30
Jeringa de 10 ml 1

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Jeringa de 3 ml 5
Bolsas de solución de cloruro de sodio 0.9% estéril de 250 ml 4
(solución fisiológica)
Equipo de venoclisis estéril 5
Catéteres No. 22 5
Catéteres No. 24 5
Torundas de algodón con alcohol Varias
Venditas adhesivas redondas (curitas) Varias
Tripie para soluciones 2
Torniquete 4

Procedimiento
A. VIA SUBCUTÁNEA (SC)
1. Cargar una jeringa de 1 ml, con 0.5 - 1 ml de solución fisiológica.
2. Limpiar el área del antebrazo a la altura del músculo deltoides.
3. Inyectar en la solución con la jeringa en ángulo recto.

B. VIA TRANSDERMICA (TD)


1. Cargar una jeringa de 1 ml, con 0.5 ml de solución fisiológica.
2. Limpiar el área dorsal del brazo.
3. Inyectar la solución con la jeringa en ángulo menor a 10° de tal manera que la aguja apenas atraviese la
epidermis.
4. Retirar la jeringa al momento de formarse una “burbuja” sobre la piel.

C. VIA INTRAVENOSA (IV)


1. Unir el sistema de venoclisis con la bolsa de solución fisiológica.
2. Limpiar el área a puncionar.
3. Puncionar la vena con un catéter estéril y verificar la permeabilidad de la vena.
4. Unir el sistema de venoclisis al catéter y fijarlo de manera segura.
5. Abrir la llave para permitir el flujo de la solución.
6. Al finalizar la administración del contenido de la bolsa cerrar la llave y retirar el catéter.

D. VIA INTRAMUSCULAR (IM)


1. Cargar una jeringa de 10 ml con 5 ml de solución fisiológica.
2. Limpiar el área del cuadrante superior externo del glúteo del paciente.
3. Inyectar en la solución con la jeringa en ángulo recto.

Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño


1. Elaborar y entregar un reporte escrito que incluya:

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a) Un álbum gráfico (fotos, imágenes o dibujos) con la secuencia de pasos para cada vía de administración.
b) Preguntas contestadas del cuestionario incluido en la práctica.
2. Disponer los RPBI generados de manera adecuada evidenciándolo con fotos del evento y etiquetas.

Cuestionario Complementario
1. Cuáles son las principales vías de administración de fármacos?
2. Explique ventajas y desventajas en la terapéutica con fármacos en las siguientes vías de administración:
oral, sublingual, rectal, inhalación, subcutánea, intravenosa, intratecal y tópica.
3. Define administración parenteral y menciona todos los tipos que conozcas.
4. Mencione dos fármacos que se apliquen por cada vía de administración.

Bibliografía
Bertram G. Katzung; Farmacología Básica y Clínica, 13a Edición, Mcgraw Hill 2017
Joel G. Harman y Lee E. Limberd, Bases Farmacológicas de la Terapéutica, 12a Edición, Mcgraw Hill-
Interamericana, México, 2015
Medical Rodríguez Carranza. Rodolfo, Guía de Farmacología y Terapéutica, Ed. ELSEVIER, 3ra edición, México,
2014.

Anexos
Continua siguiente hoja ….

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Anexo I: Esquema de las diferentes vías de administración parenterales.

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Práctica No. 3
Fármacos Antihistamínicos

Competencia
Comprender los mecanismos de acción de los fármacos, a través de la administración de medicamentos
antihistamínicos y midiendo la respuesta de histamina después de su aplicación dérmica, para explicar los
efectos de los fármacos en los sistemas biológicos, con exactitud, limpieza, respeto al individuo y al medio
ambiente.

Fundamento Teórico
Los antihistamínicos han sido usados durante los últimos 50 años y se han convertido en unos de los
medicamentos de mayor prescripción en México. La denominación actual es “antagonistas de los receptores
de la histamina”, su acción consiste en evitar el efecto de la histamina en los diferentes tejidos del cuerpo. La
histamina o b-aminoetilimidazol fue aislada por vez primera en 1907 por Windaus y Vogt; en 1910, Daley y
Laidlow estudiaron su efecto biológico y descubrieron que estimulaban a diversos músculos lisos. En 1940, se
desarrolló el primer antihistamínico antagonista H1 para uso en el humano: fenobenzamina con buenos
resultados. En 1944 se comercializa el maleato de pirilamina; en 1946, la difenhidramina y tripelenamina y, en
1949, la clorfeniramina. Todos estos antihistamínicos H1 han sido denominados de “primera generación, clásicos
o sedantes” por ser los primeros. En los últimos 15 años se han sintetizado antihistamínicos con alto potencial
inhibitorio; a éstos se les denomina antihistamínicos H1 de “segunda generación”. Con el advenimiento de
nuevas técnicas de investigación se fueron descubriendo nuevos receptores de la histamina: el receptor H1 en
1966, el receptor H2 en 1972, el receptor H3 en 1983 y el receptor H4 en 2000. Cuando la histamina es liberada
de mastocitos, basófilos, neuronas histaminérgicas u otras células, se debe unir a cierto receptor de histamina:
H1, H2, H3 o H4. Los antihistamínicos H1 de primera y segunda generación antagonizan al receptor H1,
utilizandose en la clínica contra rinitis, urticaria, lagrimeo, o como antialérgicos. Los antagonistas del receptor H2
se utilizan en la clínica para reducir la secreción de ácido gástrico en el tratamiento del paciente con enfermedad
ácido péptica. Hasta el momento no existen antagonistas del receptor H3 y H4 para uso clínico; sin embargo,
dentro del campo de estudio de estos receptores se ha descubierto que participan, respectivamente, en la
regulación de la neurotransmisión y en procesos inflamatorios.

Proceso

Equipo, Instrumental, Material e Insumos

Balanza granataria 1
Lancetas estériles 10

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Gotero 1
Regla 6
Matraz volumétrico de 10 ml 1
Histamina Solución 10% 10 ml
Agua estéril 25 ml
Torunda alcoholada 10
Agua potable 1 Lt
Medicamentos antihistamínicos varios

Criterios de Inclusión y/o exclusión


a. Tomar el medicamento con al menos 200 ml de agua.
b. Sexo: pueden participar hombres o mujeres.
c. Edad, entre 18 y 35 años.
d. Peso ideal
e. Ayuno de al menos 2 horas previas a la toma del medicamento.
f. No estar enfermo
g. No estar tomando fármacos terapéuticos, sociales o de abuso.
h. No tener antecedentes de Reacciones Adversas a Medicamentos (RAM´s)
i. No ser alérgico.

Procedimiento
1. Formación de equipos de trabajo.
2. Preparación de soluciones.
✓ Pesar exactamente 1 gr de histamina.
✓ Disolver en 3cc de agua estéril.
✓ En Matraz volumétrico llevar a un volumen de 10cc con agua estéril.
3. Administración de medicamentos antihistamínicos.
✓ Nombrar un voluntario por equipo y administrarle el medicamento antihistamínico que señale el
instructor.
✓ Nombrar un equipo para que el voluntario sea el “individuo control”.
✓ Administrar cada medicamento de acuerdo a la dosis usual del antihistamínico que se trate.
Asegurando de tomar 200 ml de agua.
4. Administración de histamina.
✓ Después de transcurridos 30 minutos de la administración del medicamento antihistamínico,
asear con una torunda alcoholada el antebrazo del voluntario.
✓ Colocar una gotita de histamina al 10% sobre la piel, evitar que esta se derrame.
✓ Sobre la gota de histamina, pinchar con una lanceta estéril.
✓ Tomar lecturas del diámetro de la pápula y del eritema (inflamación y enrojecimiento) a los 15,
30, 45, 60 y 90 minutos post aplicación de la histamina.
5. Con el individuo control proceder igual que en 4; pero sin haber tomado algún fármaco antihistamínico.

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Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño


1. Elaborar una tabla con los resultados de todo el grupo, registrando por tiempo el diámetro de la pápula y
del eritema.
2. Elabora tus conclusiones.
3. Entregar reporte por escrito.

Cuestionario Complementario
1. Menciona los tipos de receptores histamínicos?, con que efectos están comúnmente relacionados en
nuestro cuerpo?
2. Que efecto(s) tiene la histamina en nuestro cuerpo?
3. Cuál es la fórmula desarrollada de la histamina?
4. Qué tipo de enlaces químicos puede formar con su receptor biológico?
5. Menciona los fármacos antihistamínicos que se utilizan con fines terapéuticos?
6. Menciona al menos un medicamento para cada fármaco de los mencionados en la pregunta anterior.

Bibliografía

Anexos

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Práctica No. 4
Absorción de Fármacos

Competencia
Medir los cambios de biodisponibilidad de un medicamento, mediante un ensayo con varias dietas, para
comprender el proceso de absorción de fármaco, desarrollando el pensamiento crítico, trabajando en equipo y de
manera ordenada.

Fundamento Teórico
La absorción se define como el paso de fármaco desde el sitio de depósito hasta el torrente sanguíneo,
obviamente la absorción no existe cuando el medicamento se administra por vía intravenosa. La absorción se
puede estimar en forma cuantitativa calculando la biodisponibilidad (F) a partir de los datos de concentración
plasmática máxima alcanzada, el tiempo al que alcanza esa concentración y el área bajo la curva de las
concentraciones plasmáticas. En ese sentido la biodisponibilidad se define como cantidad y la velocidad con la
que un fármaco ingresa a la sangre y está disponible para ser distribuido a los diferentes compartimentos
corporales. La importancia de conocer la biodisponibilidad de los fármacos radica en que puede ser determinada
la mejor forma farmacéutica y la dosis optima que se debe administrar por determinada vía para lograr las
concentraciones deseadas. En el caso particular de la administración oral, la absorción ocurre principalmente a
nivel de intestino delgado, el cual representa un espacio compartido con los alimentos y por lo tanto existe la
posibilidad de que estos ejerzan cierta influencia sobre la absorción de los de los medicamentos, lo cual es objeto
de estudio en esta práctica. (Rodríguez, Rodolfo, y col., Guía de farmacología y terapéutica, 2da edición,
McGraw Hill, México 2009).

Proceso

Equipo, Instrumental, Materiales e Insumos


Material por equipo Equipo/Instrumental Insumos
1 pipeta graduada de 5 mL 1 Balanza analítica Salicilato de sodio
1 pipeta graduada de 1 Ml 1 Espectrofotómetro Nitrato férrico - Nonahidratado
2 perillas o pipeteadores 3 Agitador vortex Cloruro mercúrico
1 vaso de plástico de 25 -500 1 matraz volumétrico de 100 ml Ácido clorhídrico 1N
mL
1 matraz volumétrico de 50 ml Agua destilada
1 gradilla
1 matraz volumétrico de 25 ml 2 tabletas de aspirina de 500 mg
20 tubo de ensaye de 13x120 por alumno

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mm 3 pipetas volumétricas de 1 ml
10 cm de papel parafilm

Soluciones
Reactivo para desarrollar color (300 ml): Pesar con exactitud y por separado 4 g de nitrato férrico nonahidratado
y 4 g de cloruro mercúrico, colocarlos en un matraz volumétrico de 100 ml. Adicionar un poco de agua destilada
para disolver, añadir 12 ml de una solución 1 N de ácido clorhídrico y diluir hasta el aforo con agua destilada.

Solución patrón de salicilato de sodio de 100 mcg/ml: Pesar con exactitud 50 mg de salicilato de sodio y
depositarlos en un matraz volumétrico de 50 ml, disolver totalmente en 20 ml de orina libre de medicamentos
(diluida 1:1 con agua) y llevar hasta el aforo con la misma orina. De esta solución tomar con exactitud una
alícuota de 2.5 ml y depositar en un matraz volumétrico de 25 ml, llevar al aforo con agua destilada.

Procedimiento

I.- Organización
a) El grupo se dividirá en tres equipos.
i. Equipo No.1. Estudiará la influencia de la dieta: A-Ayuno
ii. Equipo No.2: Estudiará la influencia de la dieta: B-Lípidos
iii. Equipo No.3: Estudiará la influencia de la dieta: C-Carbohidratos
b) Cada equipo nombrará un voluntario, quien se tomará dos tabletas de aspirina de 500 mg vía oral y se
procederá de acuerdo al protocolo experimental.

II.- Criterios de inclusión y/o exclusión.


Jóvenes sanos mayores de 18 años de edad.
Sexo masculino o femenino.
No padecer ningún tipo de enfermedad crónica.
No estar enfermos al momento del experimento.
No consumir bebidas alcohólicas, fármacos terapéuticos, social o de abuso, durante al menos una semana antes
y durante el experimento.
Respetar el protocolo experimental, mismo que se le dará a leer y entenderá antes de iniciar el estudio.
Firmar carta de consentimiento informado, antes de iniciar el estudio. (Ver Anexo al final del manual).

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III.- Protocolo experimental:


Los voluntarios permanecerán en ayuno a partir de las 22:00 h del día anterior al estudio, para ello, pueden
ingerir una cena ligera a más tardar a las 10:00 de la noche anterior al día del estudio.
El día del estudio al despertarse deberán vaciar la vejiga.
Ingerir 250 ml de agua, 1.5 horas antes de la toma del medicamento.
La administración del medicamento con o sin alimento al inicio del estudio, corresponde al tiempo cero o inicio
del estudio.
La administración del medicamento y la ingestión del alimento al inicio del estudio se realizarán de acuerdo a la
Tabla 2.
Tomar 200 ml de agua cada media hora durante las primeras 4 horas del estudio.
Recolectar muestras de orina a los siguientes tiempos: 0, 0.5, 1, 1.5, 2, 2.5, 3, 4, 5, 8, 12, 16, 24 y 30 horas,
medir con exactitud en probeta de plástico el volumen de orina colectado en cada intervalo de tiempo. Guardar
un volumen aproximado de 10 ml y desechar el volumen sobrante, EN EL FORMATO INCLUIDO EN
RESULTADOS ANOTAR EL VOLUMEN TOTAL DE MICCIÓN Y LA HORA EXACTA EN QUE SE TOMO CADA
MUESTRA.

**NOTA: No se deberá desechar ninguna porción de orina y en cada intervalo de muestreo superior a 3 horas se
recolectará toda la orina de ese intervalo en un solo recipiente y de ahí se tomara la muestra de 10 ml.

Cuantificar cada una de las muestras utilizando el método descrito más adelante.

Tabla 2. Administración del medicamento y alimentos.


Tiempo Tratamiento
Dieta A: Ayuno Dieta B: Lípidos Dieta C:
Carbohidratos
10 min Ingesta de alimento: Ingesta de alimento:
2 huevos fritos con 100 30 g de cereal
g de tocino [Zucaritas]
2 rebanadas de pan 1 vaso de leche
con 30 g de descremada
mantequilla
2 rebanadas de pan
1 vaso de leche entera
tostado
20 g de mermelada de
fresa

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1 gelatina
2 ciruelas pasa
0 minutos Administración del Administración del Administración del
medicamento medicamento medicamento
4 Horas después de la 1 vaso de jugo de manzana
administración del
1 coctel de frutas
medicamento
2 sándwich de jamón con queso
1 gelatina
1 vaso de leche entera

IV: Método analítico para la cuantificación de salicilatos en muestras.


En un tubo de ensaye colocar 1 ml de muestra de orina y adicionar 5 ml del reactivo para desarrollar color, agitar
el tubo en vortex durante 1 min.
Para obtener una solución transparente; si hay precipitado decantar la solución a un tubo de ensaye limpio.
Determinar absorbancia a una longitud de onda de 540 nm, ajustando a cero con un blanco de orina (primera
orina del voluntario, hora cero) preparado a las mismas condiciones que la muestra.
De igual manera proceder con 5 ml de la solución patrón de referencia de salicilato de sodio a 100 mcg/ml.

Mecanismos de evaluación y Evidencia de desempeño

1.- Formato para el registro de la toma de muestras y resultados calculados.


Cantidad
Numero Intervalo Volumen de Orina
Hora Absorbancia Concentración Excretada
Muestra (h) (ml)
(mg)
Justo antes
1 de tomar Blanco Blanco Blanco
medicamento

2 0 – 0.5

3 0.5 – 1.0

4 1.0 – 1.5

5 1.5 – 2.0

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6 2.0 – 2.5

7 2.5 – 3.0

8 3.0 – 4.0

9 4.0 – 5.0

10 5.0 – 8.0

11 8.0 – 12

12 12 – 16

13 16 – 24

14 24 - 30

2.- Ecuaciones

(Absorbancia de la Muestra) (Concentración Solución Patrón)


Concentración de la Muestra =
Absorbancia Solución Patrón

Cantidad Excretada = (Concentración de la muestra) (Volumen)

3.- Evidencias
a) Anota tus observaciones durante el experimento,
b) Elaborar tablas y graficas con los resultados obtenidos.
c) Elabora tus conclusiones con base en los resultados obtenidos.
d) Disponer los residuos generados de manera adecuada.

Cuestionario Complementario
1. Menciona las causas por las que el alimento afectan a la absorción de fármacos.

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2. Menciona al menos 3 fármacos que se ve modificada su cinética de absorción por interacción con los
alimentos.

Bibliografía
1. NOM 177-SSA1-1998.
2. Helgi Jung Cook y Enrique Jong Chong (2003). Biodisponibilidad y Bioequivalencia. Tópicos Selectos de
Tecnología Farmacéutica, AFM.
3. Manual de laboratorio de Biofarmacia, Facultad de Química, UNAM.
4. Manual del Laboratorio de Farmacología básica. Facultad de Medicina y Psicología, UABC.

Anexos

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Práctica No. 5
Distribución de Fármacos

Competencia
Determinar la distribución de un fármaco por medio del análisis cualitativo y cuantitativo en los diferentes
compartimentos del organismo.

Fundamento Teórico
La distribución es un proceso farmacocinética en el que tiene lugar el transporte del fármaco desde su lugar de
absorción hasta el órgano donde va a ejercer su efecto. No obstante, es importante considerar que una vez
absorbido el fármaco es distribuido no solo hasta el sitio donde va a actuar, si no que al mismo tiempo llega a
otros órganos en donde va a ser eliminado, metabolizado o acumulado.
La mayoría de los fármacos se unen a proteínas plasmáticas para circular en el organismo. La albúmina es la
principal de estas proteínas acarreadoras; tiene dos sitios de unión para fármacos, uno para fármacos de
carácter ácido, y otro para fármacos de carácter básico. Los esteroides corticales y algunos otros fármacos de
carácter básico se unen también a las alfa-1-globulinas.
La unión de los fármacos a las proteínas depende esencialmente de la afinidad que tengan los fármacos, y
constituye una cifra estable para cada fármaco. Esta unión es reversible, encontrándose siempre un determinado
porcentaje libre y cuando éste se elimina del plasma una nueva cantidad de fármaco se desprende de su unión a
proteínas y toma su lugar, de tal modo que las fracciones libre y unida a proteínas permanecen constantes.
Ocasionalmente, cuando se sobrepase la capacidad de fijación de la albúmina, aumenta la fracción libre.
Solamente el fármaco libre es activo, puesto que es el único capaz de atravesar barreras y difundir a los tejidos.
Una vez que el fármaco se encuentra en plasma, la concentración que alcanza en los diferentes tejidos depende
esencialmente de dos factores: el flujo sanguíneo regional, y la salida del fármaco del interior vascular.
La unión del fármaco a las proteínas y la salida del fármaco del interior vascular condicionan un parámetro que
conocemos con el nombre de volumen de distribución (Vd). Se define como Vd el volumen de agua corporal en
el que el fármaco se encuentra realmente disuelto. Pero este parámetro de “Vd real” no es fácilmente medible,
por lo que recurrimos al “Vd aparente” que corresponde a:

DOSIS
Vd = Cp

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Decimos que este volumen de distribución es aparente por que no refleja con exactitud donde se encuentra el
fármaco. Por ejemplo, Si la Cp es muy baja el Vd será muy alto, indicándonos que esta acumulado en algún
tejido; por el contrario, si el fármaco esta muy unido a proteínas la Cp será alta y el Vd será bajo. A pesar de ello
nos sirve para conocer la distribución corporal de un fármaco:

Vd 3 Litros --------------------- Fármaco en plasma


Vd 12 Litros --------------------- Fármaco en plasma + intersticio
Vd 40 Litros --------------------- Fármaco en plasma + intersticio + células

Proceso

Equipo, Instrumental, Material e Insumos

Espectrofotómetro UV-VIS Matraz volumétrico de 500 cc (1)


Balanza analítica Matraz volumétrico de 100 cc (1)
Balanza granataria Matraz volumétrico de 25 cc (8)
Balanza para roedores Matraz volumétrico de 10 cc (5)
Mesa de cirugía para roedores Pipeta volumétrica 0.5 cc (1)
Equipo de disección completo Pipeta volumétrica 1 cc (3)
Jaula metabólica Pipeta volumétrica 2 cc (1)
Centrífuga Pipeta volumétrica 3 cc (1)
Agitador Vortex Pipeta volumétrica 5 cc (1)
Portaobjetos (6) Pipeta graduada 20 cc (1)
Jeringa de 1cc (2) Pipeta graduada de 10 cc (2)
Tubo de ensaye 16x100 con tapón de rosca (10) Pipeta graduada 5 cc (1)
Tubo de ensaye 16x125 con tapón de rosca (10) Pipeta graduada 1 cc (1)

Soluciones y Reactivos

Pentobarbital sódico Sulfacetamida 4 mg/cc (10cc)


Ácido tricloroacético (TCA) Hidróxido de sodio 0.1 N ( 60cc)
Nitrito de Sodio Ácido tricloroacético 15% (25cc)

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Sulfacetamida Ácido clorhídrico 4 N (10 cc)


Cloroformo Nitrito de sodio 0.1% (10cc)
Hidróxido de sodio Sulfamato de amonio 0.5% (10cc)
Alfa-naftiletilendiamina Alfa-naftiletilendiamina 0.1% (10cc)
Sulfamato de amonio
Ácido clorhídrico

Procedimiento

Sesión 1 (primera parte)

1. Se administra a la rata sulfacetamida en dosis de 10 mg/Kg de peso.


2. Se coloca el animal en una jaula metabólica por espacio de 30 minutos.
3. Si no se ha colectado orina en este intervalo de tiempo, induzca al animal presionándole levemente la
parte inferior del abdomen.
4. Anestesie al animal y prepárelo en la mesa de cirugía. Abra la cavidad abdominal (en este momento
puede obtener orina por insición directa en la vejiga, si no se logro anteriormente).
5. Abra además la cavidad toráxico y craneana. Obtenga 1cc de sangre por punción directa al corazón del
animal.
6. Obtenga también muestras de 0.5-1.0 gr de los siguientes órganos: hígado, riñón, intestino, corazón,
cerebro y músculo de la región glútea.
7. Coloque las muestras obtenidas en un portaobjetos y péselo, después de esto proceda a desmenuzarlas
con la ayuda de una navaja de bisturí y transfiéralas a un tubo de ensaye que contenga 10cc de NaOH
0.1 N, lave el portaobjetos y péselo de nuevo por diferencia conocerá el peso de la muestra.
8. Procese cada una de las muestras de acuerdo al procedimiento indicado.

Procesamiento de las muestras:


Sangre: Lleve 1cc de sangre a un tubo que contenga 9cc de agua y agite en vortex. Tome 1cc de esta dilución y
transfiérala a otro tubo, adicione 12cc de agua y agite de nuevo. Agregue 4cc de ATC al 15% y agite por 1
minuto. Centrifugue a 3,000 rpm por 3 min. Del sobrenadante tome una muestra de 5cc y pásela a un tubo limpio.
Etiquetar el tubo especificando fecha, laboratorio, número de equipo y contenido. Guardar en congelación para la
segunda parte de esta práctica.

Orina: Tome 100 mcl de orina y agregue a un tubo que contenga 1.9cc de agua. Agite y tome 1cc de esta orina
diluida y transfiérala a otro tubo conteniendo 11cc de agua. Adicione 4cc de TCA al 15% agite y centrifugue a
3,000 rpm por 3 minutos. Del sobrenadante tome una muestra de 5cc y pásela a un tubo limpio. Etiquetar el tubo
especificando fecha, laboratorio, número de equipo y contenido. Guardar en congelación para la segunda parte
de esta práctica.

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Tejidos y Órganos: En el tubo que contiene la muestra y la solución de NaOH deberá agitarse en vortex por 1
minuto en 3 ocasiones, en un período de 10 minutos. Después se dejará reposar por 15 minutos. Se toman 2cc
del sobrenadante y se adicionan 2cc de TCA al 15%, agitar por 30 seg. Adicionar 6cc de agua y agitar de nuevo.
Centrifugar por 5 minutos a 3,000 rpm. Tomar del sobrenadante una muestra de 5cc y pasar a un tubo limpio.
Etiquetar el tubo especificando fecha, laboratorio, número de equipo y contenido. Guardar en congelación para la
segunda parte de esta práctica.

Sesión 2 (segunda parte)


Para iniciar con esta sesión, permita que las muestras se descongelen a temperatura ambiente, o en baño de
agua a temperatura ambiente.

Cuantificación de Sulfacetamida por la técnica analítica de Bratton-Marshal


1. A 5cc del sobrenadante se le adicionan 1cc de HCl 4N, 1cc de Nitrito de sodio al 0.1% y se agita en
vortex por 5 minutos.
2. Posteriormente agregar 1cc de Sulfamato de amonio al 0.5% y agite de nuevo por 3 minutos,
manualmente de manera vigorosa.
3. Por ultimo adicione 1cc de alfa-naftiletilendiamina al 0.1%, agite y repose en la oscuridad por 10 minutos.
4. Lea la absorbancia en espectrofotómetro a una longitud de onda de 546 nm.
5. Hacer exactamente este mismo procedimiento a un blanco que consiste en 5cc de agua, que se trata a la
par con las muestras.

Curva patrón de sulfacetamida:


Solución patron de Sulfacetamida (100 mcg/cc): Pesar en balanza analítica 50mg de Sulfacetamida, colocarla
en un matraz volumétrico de 500cc. Llevar al aforo con agua.

Soluciones estándar de Sulfacetamida: Tomar la alícuota necesaria de la solución patrón de sulfacetamida y


preparar 25 cc de cada una de las concentraciones descritas a continuación: 1, 2, 4, 6, 8, 12 y 16 mcg/cc.

Tomar 5 ml de cada una de las soluciones estándar de sulfacetamida y colocar en un tubo de ensaye y proceder
de acuerdo a la técnica de Bratton-Marshal. Hacer este procedimiento por duplicado para cada una de las
concentraciones. Incluir un blanco con 5cc de agua.

Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño


Con los resultados de la curva estándar calcular el promedio, desviación estándar y el coeficiente de variación de
las absorbancias obtenidas para cada concentración.
Elaborar una gráfica de concentración de sulfacetamida (mcg/ml) vs Absorbancia promedio; calcular por mínimos
cuadrados el coeficiente de correlación.

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Con la gráfica obtenida hacer interpolaciones con los valores de absorbancias de las muestras y calcular las
concentraciones de sulfacetamida en sangre, orina y en los diferentes órganos y tejidos.
Reporte sus resultados en una tabla donde se especifiquen los valores de absorbancia y concentraciones
obtenidas, y la gráfica correspondiente.
Elabora tus conclusiones.

Cuestionario Complementario
1. Que propiedades deberá tener un fármaco para poder encontrarse en el eritrocito?
2. Cuál es el componente proteico más importante en la distribución de fármacos.
3. La distribución será un proceso reversible?

Bibliografía

Anexos

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Práctica No. 6
Estimulación e Inhibición del Metabolismo Farmacológico

Competencia
Estudiar la influencia de la inducción del metabolismo por medio de daño hepático y la estimulación del
metabolismo por medio de la administración crónica de un fármaco utilizando animales de laboratorio.

Fundamento Teórico
El metabolismo es uno de los principales mecanismos por medio del cual la acción de un fármaco se puede
concluir. La mayoría de los fármacos pasan por un proceso metabólico, que los convierte en productos más
polares (metabolitos). Esto es de suma importancia en el manejo global de un fármaco, ya que al pasar por esta
biotransformación no solo se diminuye su actividad biológica, si no que lo hace más susceptible a ser excretado.
La intensidad y duración de la acción de un fármaco es determinada por el grado de biotransformación que sufre
y la velocidad con que sea eliminado del cuerpo. Este grado de transformación o metabolismo puede ser
afectado por varios factores como edad, sexo, raza, dieta, aspectos genéticos, exposición a sustancias químicas,
etc. A través de estudio cinéticos esta demostrado que una sustancia puede ser capaz de modificar el patrón
metabólico de otra. Ejemplos de ello son el Ketoconazol (antimicótico) que es capaz de inhibir el metabolismo de
Diacepam (anticonvulsivo), pudiendo presentarse síntomas de intoxicación por elevación de niveles plasmáticos
de Diacepam.
Mientras que por otro lado Fenobarbital es capaz de inducir el metabolismo de muchos otros fármacos
disminuyendo su concentración, lo que podría hacer que se presenten niveles subterapéuticos.

Proceso

Equipo, Instrumental, Material e Insumos

Balanza para roedores


Jeringa 1cc
Pentobarbital sódico
Tetracloruro de carbono
Algodón
Jaula para ratones
Ratones

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Procedimiento
1. Cada equipo tendrá 5 ratones pesados y marcados perfectamente.
2. Los alumnos se dividirán en tres equipos, el equipo numero 1 trabajará con ratones sin pretratamiento
(control); el equipo numero 2 trabajara con ratones inducidos; y el equipo numero 3, con ratones
inhibidos.
3. A cada ratón se le administra pentobarbital a una razón de 50 mg/Kg de peso.
4. Determinar el tiempo de inicio del sueño y duración del mismo. El tiempo de inicio de sueño se determina
por la pérdida del reflejo de enderezamiento. Esto se logra cuando al voltear al animal éste no regresa
instantáneamente sobre sus patas.

Pretratamiento

Los ratones se tratarán por 5 días previos al experimento, como a continuación se describe:

o Inducción enzimática.- cada ratón recibe pentobarbital a una razón de 10 mg/Kg de peso, por vía
intraperitoneal diariamente.

o Inhibición enzimática.- los ratones se introducen en un frasco que contiene algodón impregnado de
tetracloruro de carbono, hasta que el animal muestre algún signo de incoordinación. Sáquelo
inmediatamente para que pueda recuperarse.
Tenga cuidado al utilizar el tetracloruro de carbono; el algodón no debe contener líquido en exceso y la
exposición no debe ser prolongada, pues puede matar al animal o sedarlo por completo, lo cual no es
recomendable. Esto se repite diariamente.

Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño


1. Construya una tabla con los resultados de los tres grupos anotando los tiempos de pérdida del reflejo de
enderezamiento (PRE) y duración del efecto o tiempo de sueño.
2. Calcule los tiempos promedio de cada grupo.
3. Elabore una gráfica de barras y compare los tiempos promedio de inducción (I) y duración (D), obtenidos
para cada grupo.
4. De acuerdo a los resultados y la gráfica obtenidos que puede concluir acerca del experimento?

Cuestionario Complementario
1. Continuará por siempre la inducción enzimática aun cuando se suspenda la administración del fármaco
que la ocasiona?
2. Defina los términos de inducción e inhibición farmacoinducida.
3. De por lo menos tres ejemplos de otros fármacos que sufran este mismo fenómeno.

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Bibliografía

Anexos

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Práctica No. 7
Determinación de Dosis Efectiva al 50 (DE50) y Dosis Letal al 50
(DL50)

Objetivo
El alumno se familiarizara con la metodología experimental y los cálculos necesarios para obtener la Dosis
Efectiva al 50 y Dosis Letal al 50 de un compuesto exógeno.

Fundamento Teórico
Una manera importante de conocer y caracterizar el efecto de un fármaco es la determinación de su curva dosis-
respuesta. En este caso, en la ordenada o eje de las “Y” o eje vertical se especifica la intensidad del efecto
farmacológico hasta su máxima expresión, relacionándola con la dosis o el logaritmo de la dosis en el eje de las
“X” o abscisa o eje horizontal. En General el incremento de la dosis produce un aumento paralelo en la
intensidad de la respuesta, hasta un determinado limite que es el efecto máximo. En Farmacología la respuesta
aumenta hasta ese punto máximo, después del cual el incremento de la dosis no va acompañado de un
incremento de los efectos farmacológicos. El efecto máximo determina ante el aumento de la dosis, el plateau o
la meseta de la curva. En caso de aumentar la dosis después del plateau pueden aparecer efectos tóxicos o la
muerte sin aumentar la intensidad de los efectos farmacológicos. La toxicidad de un fármaco puede medirse con
el conocimiento de la dosis letal 50 (DL 50), que es la dosis capaz de provocar la muerte del 50% de los animales
de laboratorio. La dosis efectiva 50 (DE50) es por otra parte la dosis que produce los efectos deseados o
terapéuticos en el 50% de los pacientes.

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El tratamiento logístico para la transformación lineal de la curva, propuesto por Berkon (1934) consiste en aplicar
logaritmos a las dosis utilizadas y en la transformación de la respuesta en Logit de la siguiente manera:
L = ln (p/q)

Donde: p = probabilidad de acierto.


q = probabilidad de error.

Entonces, graficando L vs ln D, obtenemos la ecuación de la recta L = m lnD + b; donde m = pendiente y b =


intercepto al eje de las “Y”. Y si queremos encontrar ln D50, despejando:
ln D50 = -b/m

D50 = e –b/m

Proceso

Equipo, Instrumental, Material e Insumos

Procedimiento
1. Cada equipo de trabajo utilizará un grupo de 5 ratones. A los cuales se les administrará una misma
dosis.
2. Marcar y pesar cada uno de los ratones.
3. Administrar el volumen de anestésico que le corresponda a cada ratón de acuerdo a su peso y a la dosis
que le toca probar al equipo de trabajo.
4. Las dosis a probar durante el experimento son: 10, 20, 30, 40, 50, 60, 80, 120, y 160 mg/Kg de peso.
5. Determinar el número de animales muertos y vivos.
6. Después de media hora sacrificar los ratones que hayan quedado vivos con una dosis de pentobarbital a
una razón de 200 mg/Kg de peso.
7. Proceder con los ratones muertos de acuerdo a las buenas prácticas de disposición de RPBI.

Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño

1. Ordena los resultados de tu experimento de acuerdo a la siguiente tabla:

Dosis Log No. Ratones Porcentaje p q ln(p/q)


D
(mg/Kg Ratones

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) Dormido Muertos Dormido Muertos Dormido Muertos Dormido Muertos Dormido Muertos
s s s s s

10
20
30
40
50
60
80
120
160

2. Elabora una gráfica con tus resultados; con los valores de %Efecto vs Log D.
3. Elabora una gráfica con los valores de L vs ln D.
4. Determina por el método gráfico la DE50 y DL50.
5. Calcula por el método Logit los valores de DE50 y DL50.
6. Elabora tus conclusiones con respecto al experimento.

Cuestionario Complementario
1. Cual es la DE50 y DL50 de pentobarbital sódico rata y ratón, reportados en la literatura.
2. Como podemos medir la potencia de un fármaco?, explica tu respuesta.
3. Define los conceptos de:
a. Intervalo terapéutico (IT).
b. Dosis Toxica 50 (DT50)
c. Índice de seguridad (IS)

Bibliografía

Anexos

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Práctica No. 8

Influencia del pH Urinario en la Excreción de Fármacos

Competencia
Valorar la influencia del pH urinario en la excreción de fármacos en condiciones de orina ácida y alcalina, a través
de la administración de aspirina por vía oral y cuantificación de salicilatos en orina, para comprender la influencia
del pH urinario en los esquemas de dosificación de medicamentos.

Fundamento Teórico
El riñón es el órgano de excreción de principios activos y de metabolitos. Pera esto, ejecuta tres funciones:
filtración glomerular, secreción tubular y reabsorción tubular.
Filtración glomerular: el paso del fármaco del plasma al filtrado glomerular se efectúa a través de la pared del
glomérulo por filtración debido a un gradiente de presión. Solamente pueden atravesar esta membrana las
moléculas que poseen un tamaño lo suficientemente reducido: las macromoléculas, como la albúmina, las
globulinas y otras proteínas plasmáticas no pueden atravesarla, ni mucho menos el fármaco que se encuentre
unido a ellas.
La velocidad de filtración es función del flujo sanguíneo renal, por lo que en casos de insuficiencia cardiaca se
producirá un descenso de la excreción renal de los fármacos. Se trata de un proceso pasivo que no requiere
gasto de energía.
Secreción tubular: proceso que sigue un mecanismo de transporte activo, que se efectúa en el túbulo proximal,
por el que algunos fármacos presentes en la sangre pasan a la luz tubular. Se trata de un proceso saturable,
existiendo, por lo tanto, mecanismo de competencia por un mismo sistema de transporte activo.
Reabsorción tubular: proceso por el que el fármaco que a llegado a la luz tubular, ya sea por filtración glomerular
o por secreción tubular, es reabsorbido a nivel tubular y pasa de nuevo a la sangre. Este proceso se efectúa por
difusión pasiva, por lo que influyen notablemente la liposolubilidad, el grado de ionización y el peso molecular del
fármaco a reabsorber.
Conviene recordar que el pH de la orina puede modificar el grado de ionización de numerosos fármacos y, por
tanto, su mayor o menor facilidad para poder ser reabsorbidos y pasar a la sangre o, de forma alternativa, ser
excretados en la orina. A la vista de todo lo anterior, se puede afirmar que la velocidad de excreción renal de un
fármaco es igual a la velocidad de filtración más la secreción, menos la velocidad de reabsorción.

Proceso

A) El grupo se dividirá en tres equipos.


Equipo No.1. Estudiará la excreción de aspirina en un pH urinario alcalino.
Equipo N0.2: Estudiará la excreción de aspirina en un pH urinario ácido.

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Equipo No.3: Estudiará la excreción de aspirina en un pH normal.


Cada equipo nombrará un voluntario, quien se tomará una dosis de 1 gr de Aspirina vía oral, y procederá de
acuerdo al protocolo experimental que a continuación se muestra.

B) Criterios de inclusión y/o exclusión.


1. Jóvenes sanos de 18 a 28 años de edad.
2. Sexo masculino o femenino.
3. No padecer ningún tipo de enfermedad crónica.
4. Al momento del experimento no estar enfermos.
5. No consumir, al menos una semana antes y durante el experimento, algún fármaco terapéutico, social o
de abuso.
6. No consumir bebidas alcohólicas al menos 3 días antes y durante el experimento.
7. Respetar el protocolo experimental, mismo que se le dará a leer y entenderá antes de iniciar el estudio.
8. Firmar carta de consentimiento informado, antes de iniciar el estudio.

Protocolo experimental:
1. El día del experimento cada voluntario vaciará completamente la vejiga a las 5:00 am. Llevar a cabo la
micción en un vaso de precipitados. Tomar el pH de la orina, anotar el valor en la hoja correspondiente y
desechar la orina.
2. Tomar una tableta de Aspirina de 1g con 200 ml de agua natural. Anotar en la hoja correspondiente la
hora exacta de la toma del medicamento.
3. A las 6:00 am Tomar la siguiente solución:
▪ Equipo No.1 (orina alcalina): tomar 40 mEq (4 g) de bicarbonato de sodio (NaHCO3),
posteriormente tomar 12 mEq (1 g), cada 4 horas (a las 10:00 am y 2:00 pm).
▪ Equipo No.2 (orina acida): tomar 4 g de ácido ascórbico, posteriormente tomar 2 g, cada 4 horas
(a las 10:00 am y 2:00 pm).
▪ Equipo No.3 (control): tomar 200 ml de agua natural.
4. Asegurarse de tomar 200 ml de agua cada hora, las primeras 6 horas postadministración. Después de
las 6 horas consumir agua al gusto.
5. Durante el experimento no consumir ninguna otra clase de líquidos (bebidas carbonatadas, agua de
frutas, agua con saborizantes, etc.).
6. Colectar la orina durante 10 horas (ultima orina colectada a las 3:00 pm) postadministración del fármaco.
Durante este periodo orinar cada vez que el cuerpo lo requiera. Asegurarse de cada vez de vaciar
completamente la vejiga. Depositar la orina en un vaso de precipitado y medir el volumen total en una
probeta graduada. Tomar el pH de la orina. Guardar una alícuota de 200 ml y desechar el resto. Anotar
volumen de orina, pH urinario y la hora de micción en la hoja correspondiente.
7. A las (8:00 am consumir un desayuno, el cual consistirá de 2 sándwiches; elaborados con una rebanada
de jamón y una de queso, una rodaja de tomate y, lechuga y mayonesa al gusto. Además, una manzana
de tamaño mediano.
8. A las 13:00 consumir una comida al gusto. Incluir una bebida de té helado, máximo de 300 ml.

Cuantificación de salicilatos en orina

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Equipo, Instrumental, Material e Insumos

Matraz volumétrico de 250 ml 1


Matraz volumétrico de 50 ml 2
Matraz volumétrico de 25 ml 1
Probeta graduada de 50 ml 1
Probeta graduada de 500 ml de plástico 3
Probeta graduada de 100 ml de plástico 3
Tubos de ensayo con tapón de rosca 16x125 20
Pipetas volumétricas de 1 ml 10
Pipeta graduada de 5 ml 2
Vaso de precipitado de 100 ml 2
Vidrio de reloj 1
Espátula 1
Gradilla 1
Pizeta 500 ml 1
Recipiente para colectar orina de 2 Lt 3
Vasos no estériles para muestras de orina 30
Balanza analítica 1
Centrifuga 1
Espectrofotómetro UV-visible 1
Agitador vortex 4
Bicarbonato de sodio grado farmacéutico 6 gr
Ácido ascórbico grado farmacéutico 8 gr
Aspirina tabletas de 500 mg 6
Salicilato de sodio 50 mg
Papel para medir pH con caja de referencia 3
Nitrato férrico nonahidratado 10 gr
Cloruro mercúrico 10 gr
Ácido clorhídrico concentrado (12 N) 12 ml

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Agua destilada 1 Lt
Orina libre de fármaco 100 ml

Preparación de Soluciones
Ácido clorhídrico 1 N. En un matraz volumétrico de 50 ml depositar 4.2 ml de ácido clorhídrico concentrado (12
N), llevar al aforo con agua destilada.
Reactivo para desarrollar color: Pesar con exactitud y por separado 10 g de nitrato férrico nonahidratado y 10 g
de cloruro mercúrico, colocarlos en un matraz volumétrico de 250 ml. Adicionar un poco de agua destilada para
disolver, añadir 30 ml de una solución 1 N de ácido clorhídrico y diluir hasta el aforo con agua destilada.
Solución de referencia de salicilato de sodio (100 mcg/ml): Pesar con exactitud 50 mg de salicilato de sodio y
depositarlos en un matraz volumétrico de 50 ml, disolver totalmente en 20 ml de orina libre de medicamentos
(diluida 1:1 con agua) y llevar hasta el aforo con la misma orina. De esta solución tomar con exactitud una
alícuota de 2.5 ml y depositar en un matraz volumétrico de 25 ml, llevar al aforo con agua.

Desarrollo del método analítico para cuantificar salicilatos en orina.


En un tubo de ensaye colocar 1 ml de muestra de orina y adicionar 5 ml del reactivo para desarrollar color, agitar
la muestra en vortex durante 1 min y centrifugar durante 5 min a 2500 rpm para obtener una solución
transparente; decantar la solución a un nuevo tubo de ensaye y determinar absorbancia a una longitud de onda
de 540 nm, ajustando a cero con un blanco de agua preparado a las mismas condiciones que la muestra. De
igual manera proceder con 5 ml de la solución patrón de referencia de salicilato de sodio a 100 mcg/ml.

Mecanismos de Evaluación y Evidencia de Desempeño

1. Calcular la concentración de salicilato en las muestras de orina, utilizando la siguiente ecuación:

2. Calcula la cantidad total de salicilato en cada una de las muestras de orina.


3. Determinar la cantidad total de salicilato eliminado durante el periodo completo de muestreo.
4. Compara los resultados de los tres equipos de trabajo y elabora tus conclusiones.

Cuestionario Complementario
1. Que otro compuesto se puede utilizar para acidificar la orina?
2. Menciona tres fármacos básicos y tres ácidos con los cuales se favorezca su excreción acidificando o
alcalinizando la orina, respectivamente?

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Bibliografía

Anexos

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Anexo I: Hoja de Registro


Fecha:

Nombre del Voluntario:


Edad: Peso: Sexo: M( ) F( )

Orina: Ácida ( ) Alcalina ( ) Control ( )


pH Urinario Basal:

Hora de toma del medicamento:

Numero Volumen
Hora pH Orina Observaciones
Muestra Excretado

10

Comentarios:

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Anexo II: Carta de Consentimiento Informado

Lugar y Fecha: _____________________________________________________________________________.

Por medio de la presente acepto participar en el estudio de:


__________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________
___________________________________________________________, correspondiente a la práctica No. 7
del manual de laboratorio de farmacología.

El objetivo del estudio es:


__________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________
_________________________________________________.

Se me a explicado que mi participación consistirá en:


__________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________
___________________________________________________________.

Declaro que se me ha informado ampliamente sobre los posibles riesgos, inconvenientes, molestias y beneficios
derivados de mi participación en el estudio, que son los siguientes:
__________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________________
_________________________________________________.
El investigador(es) se ha(n) comprometido a responder cualquier pregunta y aclarar cualquier duda que le
plantee acerca de los procedimientos que se me llevaran a cabo, los riegos, beneficios o cualquier otro asunto
relacionado con el experimento.
Entiendo que conservo el derecho de retirarme del estudio en cualquier momento en que lo considere
conveniente, sin que ello afecte mi perfil como estudiante del Laboratorio de Farmacología.

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Nombre y Firma del Voluntario: ________________________________________________________________.

Nombre y Firma del Investigador: _____________________________________________________________.

Testigos: _________________________________________ y ______________________________________.

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