PRACTINA N° 12

DETERMINACION DE PROTEINAS

Alumnas: Ramos Huayllani Sara Abigail

Reque Torrico Ruvina
Silencio Arias Claudia Camila
Grupo: 404
Nombre de grupo: Vitamina B2-
Riboflavina
 Desarrollada por Johan Kjeldahl
(1883)

Permite determinar la materia Trampa

Nitrogenada total. kjeldahl
Contenido
del matraz
Empleadas para determinar las después de Refrigerante
Balón la digestión
proteínas presentes en un alimento. digestor

1°Etapa Fuente
de calor
Oxidación de la muestra orgánica que Digestión:
posee la muestra, con ácido sulfúrico - Balones digestores.
concentrado, pasando a nitrógeno - Balanza analítica.
Aparato de destilación
- Fuente de calor.
amoniacal o sulfato de amonio en - Campana de extracción de gas.
presencia de un catalizador como el - Papel filtro.
sulfato de sodio anhidro y sulfato de - Pipetas.
cobre. - Propipeteador
2°Etapa
- Acido sulfúrico.
Destilación, usando el hidróxido de Destilación: - Sulfato de sodio anhidro.
sodio al 45 % para llegar al punto de - Aparato de destilación. - Sulfato de cobre.
neutralización y recoger el destilado en - Matraz Erlenmeyer de 500 ml. - Hidróxido de sodio al 45 %
ácido sulfúrico 0,1 N. - Probeta. - Acido sulfúrico 0,1 N.
- Agua destilada.
3°Etapa - Muestra digerida.
Titulación, con hidróxido de sodio 0,1 N, Titulación: - Hidróxido de sodio 0,1 N.
utilizando el rojo de metilo como - Pinza para bureta. - Rojo de metilo.
- Buretas. - Muestra después de
indicador.
destilación.
PROCEDIMIENTO

Pesar el papel vacío y Pesar el papel mas la muestra Introducir dentro del Medir 10 ml. De ácido
registrar. molida de 0,5 a 0,7 g balón la muestra sulfúrico
1 2 3 4

Digestión Llevar a la campana y proseguir a Elevar la temperatura una Hasta que la solución se
vez que empieza la torne a un color verde Enfriar el balón
la digestión a una temperatura
ebullición esmeralda o a
inicial suave 7
5 6 veces incoloro

Disolver la muestra del balón con Transferir al equipo

un poco de agua destilada e Lavar bien el balón aproximadamente
de 150 a 200 ml con agua destilada. de destilación.
introducir al balón. 3
Destilación 1 2

Neutralizar la muestra con Hasta que la muestra cambie de Recibir el destilado en un matraz
hidróxido de sodio al 45 % color celeste a pardo o café Erlenmeyer de 500 ml
4 5

En una bureta de 50 ml colocar el Poner el matraz 4 gotas de rojo de Titular hasta el punto final que se
hidróxido de sodio 0,1 N hasta metilo el cuál vira de rosado a manifiesta por cambio de color
Titulación enrase.
1
incoloro..
2 de rosado a amarillo
3
Anotar los ml gastados en la
titulación.
4
 Cálculos
Donde:
%NT : Porcentaje de nitrógeno total
𝑉 .𝑎𝑐.𝑠𝑢𝑙𝑓 ×𝑁 𝑎𝑐.𝑠𝑢𝑙𝑓×𝐹𝑐 − 𝑉𝑁𝑎𝑂𝐻 ×𝑁𝑁𝑎𝑂𝐻 ×𝐹𝑐 ×1,4 V: ac, sulf. : Volumen de acido sulfúrico
%NT= N: ac, sulf : Normalidad del acido sulfúrico
𝑃𝑚 Fc : Factor de corrección
%PT = %NT× 6,25 V : NaOH : Volumen gastado de hidróxido de
sodio
N : NaOH : Normalidad de hidróxido de sodio
Resultados % PT : Porcentaje de proteína total
Ejemplo del método Kjeldhal determinación
DATOS de proteínas de huevo
%NT : ?
V: ac. sulf : 50 ml [ 50 𝑚𝑙 ×0,1 𝑁×1,010 − 33,5𝑚𝑙 ×0,1 𝑁 ×1,020 ]1,4
%NT= 0,9020𝑔
N: ac sulf : 0,1 N
%NT=2,53
Fc : 1,010
%PT = %NT× 6,25
V : NaOH : 33,5 ml
%PT= 2,56 x 6,25
N : NaOH : 0,1 N
%PT=15,81 gramos de proteína por cada 100 gr de
Fc:1,020
alimento
Pm= 0,9020 g
% PT : ?

Conclusiones Se pudo comprender el método adecuado para la

determinación de proteínas y %NT que son necesarios para los
cálculos