ANLISIS INSTRUMENTAL (9124)

INFORME DE LABORATORIO N1

ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN
UV-VISIBLE




Integrantes:
Luna, Melisa
Palazesi, Paula
Tesando, Micaela


AO 2014

OBJETIVOS
Determinar el espectro de absorcin UV-visible de permanganato de
potasio y encontrar la longitud de onda ptima para realizar la curva de
calibracin.
Realizar la curva de calibracin y determinar el contenido de manganeso en
una solucin problema.
Introduccin
Las tcnicas espectroscpicas de absorcin de radiacin se basan en la
interaccin de la radiacin electromagntica con la materia.
La espectroscopa de absorcin UV-Visible presenta varias ventajas entre las
cuales se destacan:
Alta sensibilidad, ya que los lmites habituales varan entre 10
-4
M y 10
-5
M.
Buena exactitud ya que presenta errores relativos entre el 1% y 5%.
Facilidad y rapidez de las mediciones.
Amplia aplicabilidad.
Espectros UV-Visibles
Las molculas experimentan 3 tipos de transiciones: rotacionales, vibracionales y
electrnicas.
Las transiciones rotacionales y vibracionales generan cambios de energa muy
prximos entre s, y las lneas individuales se convierten en espectros de bandas.

Transmitancia, Absorbancia y Ley de Lambert-Beer
Se define la transmitancia como la relacin entre la radiacin que llega al detector
del equipo y la radiacin incidente en la muestra.
T=P/P
0
La absorbancia se define como el menos logaritmo de la transmitancia.
A= -Log(P/P
0
)= -Log (T)
Existen 2 factores que generan variaciones en la absorbancia:
Trayectoria: Para una solucin de concentracin C, cunto ms largo sea el
medio por el que pasa la luz, existirn ms molculas absorbentes en el
trayecto y por lo tanto la absorbancia ser mayor.
Concentracin: para una trayectoria fija, un aumento en C del analito
implica ms molculas en el trayecto, lo que producir ms absorbancia.
En funcin de stos 2 factores se deduce lo que se conoce como Ley de Lambert-
Beer:
A

=

.b.C
Donde = [Lmol
-1
cm
-1
]
se define como absortividad molar y es una constante que depende de:
La sustancia
Longitud de onda
Temperatura, en algunos casos
Solvente
Seleccin de longitud de onda
Para construir curvas de calibracin a partir de un espectro de absorcin, se debe
seleccionar una longitud de onda correspondiente a un mximo de absorcin, ya
que nos garantiza que la variacin en la absorbancia ante pequeas variaciones
en la longitud de onda no ser significativa y el error en las mediciones ser
menor. Adems, la sensibilidad de las medidas de absorcin ser mayor, ya que el
cambio en absorbancia por unidad de concentracin ser mayor.
Procedimiento
Seleccin de la longitud de onda de trabajo
A partir de una solucin patrn de permanganato de potasio se prepararon 25ml
de una solucin 2x10
-4
M.

Error pipetas (Ep)=0.01ml
Error matraz 25ml (Em)=0.04ml
Concentracin del patrn= 2.67x10
-4
M (se considera que la solucin patrn no
presenta error)

Error de la concentracin de la solucin:

Concentracin de la solucin preparada= (2.67x10
-4
4.27x10
-7
) M
A dicha solucin se le midi la absorbancia a diferentes longitudes de onda (de
410 a 600 nm.) obteniendo as un espectro de bandas.
(nm) A(absorbancia) (nm) A(absorbancia)
410 0.089 515 0.610
420 0.086 520 0.626
430 0.081 525 0.693
440 0.083 530 0.769
450 0.102 540 0.691
460 0.123 550 0.719
470 0.182 560 0.575
480 0.234 570 0.451
490 0.354 580 0.376
500 0.413 590 0.182
510 0.578 600 0.134


Con estos valores se construy el espectro del KMnO
4.
400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
longitud de onda (nm)
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a
Absorbancia vs longitud de onda



Para realizar la curva de calibracin se seleccion una longitud de onda de 530
nm, la cual corresponde al mximo absoluto del espectro. Ah se tiene el
coeficiente de extincin ms alto, pudindose detectar concentraciones ms bajas,
es decir, mayor sensibilidad.
Obtencin de la curva de calibracin
Para la obtencin de la curva de calibracin se prepararon 4 soluciones de 25 ml
de KMnO
4
de diferente concentracin extrayendo 5; 7.5; 10 y 15ml de la solucin
patrn respectivamente.
Extraccin de 5ml

C
1
= (5.34x10
-5
0.02x10
-5
) M

Extraccin de 7.5ml

C
2
= (8.01x10
-5
0.02x10
-5
) M
Extraccin de 10ml

C
3
= (1.068x10
-4
0.003x10
-4
) M
Extraccin de 15ml

C
4
= (1.602x10
-4
0.004x10
-4
) M
Se midi la absorbancia de las soluciones a 530 nm. A una de las muestras se le
realiz la medicin de absorbancia por duplicado para poder estimar el error del
equipo utilizado. En ambos casos se obtuvo el mismo valor, de modo que se
consider que el equipo no presenta error.
0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8
x 10
-4
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
0.45
0.5
0.55
0.6
0.65
concentracin C (M)
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a

A
Absorbancia vs concentracin
C(M) Absorbancia (A)
0.0000534 0.188
0.0000801 0.242
0.0001068 0.419
0.0001602 0.612

Con los datos anteriores obtuvimos la curva de calibracin:


De la curva de calibracin y basndonos en la Ley de Lambert-Beer obtenemos el
valor de la pendiente de la curva, la cual es igual a *b.
ste valor representa la absortividad molar del KMnO
4
a 530 nm:
=

Lmol
-1
cm
-1

donde b=1cm
(

) (

)

Lmol
-1
cm
-1


Una vez construida la curva de calibracin se midi la absorbancia de una
solucin problema de KMnO
4
y se obtuvo un valor de A= 0.545.
Se determin la concentracin de la solucin problema y su respectivo error.

Ley de Lambert-Beer: A

.b.C

Donde b=1cm

C
problema
= (1.3728x10
-4
0.0008x10
-4
) M










Conclusiones
Podemos decir que la tcnica de Espectroscopa de absorcin UV-visible es
cuantitativa, rpida, de bajo costo y no es destructiva.
En funcin de la teora, al realizar el espectro de absorcin UV-visible
seleccionamos una longitud de onda correspondiente al mximo de absorcin, ya
que de este modo el error cometido es pequeo y la sensibilidad es alta. Pudiendo
as, medir concentraciones del orden de 10
-5
.
En cuanto a la muestra problema, su valor de concentracin calculado
analticamente por medio de la Ley de Lambert-Beer (1.3728 x10
-4
), es muy
aproximado al valor que puede leerse del grfico de Absorbancia vs.
Concentracin (1,41x10
-4
aprox.).
No podemos estimar el nivel de error relativo de esta concentracin porque no
disponemos del valor real de sta.